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大肠杆菌新菌毛抗原的研究Ⅰ．菌毛抗原及其血凝活性测定 总被引：3，自引：0，他引：3
Ｎｏ．１和Ｎｏ．２两株大肠杆菌产生一种新菌毛抗原（暂定名Ｆ１９８７），并有性菌毛形成；菌毛直径３．６３６ｎｍ，性菌毛直径４．２ｎｍ。抗Ｄ－甘露糖血凝试验（ＭＲＨＡ）表明：本菌毛抗原具有独特的血凝谱，能稳定地凝集人（Ａ、Ｂ、ＡＢ、Ｏ）及貂的红血球，不凝集豚鼠、绵羊、山羊、马、牛、家兔、犬、貉子、小白鼠、鸡、鸽、鹌鹑等动物的红血球，对猪红血球凝集不稳定；血凝作用仅能被相应菌毛因子血清所抑制，不被Ｋ＿８８、Ｋ＿９９、Ｆ＿４１，及ＣＦＡ／Ⅰ、ＣＦＡ／Ⅱ等菌毛因子血清所抑制。血凝作用存在４℃－３７℃－４℃的凝集－解脱－复凝集现象。用Ｍｉｎｃａ培养基做３７℃培养１８～２４ｈ，可使菌毛抗原良好表达。在玻片凝集反应、反向间接血凝及反向间接血凝抑制试验中，本菌毛抗原与动物中常见的Ｋ＿８８、Ｋ＿９９、９８７Ｐ、Ｆ＿４１，及人源ＣＦＡ／Ⅰ、ＣＦＡ／Ⅱ等菌毛抗原不存在类属反应。 相似文献
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大肠杆菌的一种新型菌毛抗原（F1987） 总被引：6，自引：2，他引：4
从腹泻死亡貉病例中分离到２株（Ｎｏ１,Ｎｏ２）能产生一种新型菌毛抗原（暂定名：Ｆ１９８７）的大肠杆菌。该新型菌毛在菌体上生长致密、长短不一,直径为３．６３６ｎｍ,同时有性菌毛形成（直径４．２ｎｍ）。该菌毛在Ｍｉｎｃａ培养基上３７℃培养能良好表达,具有能稳定地凝集人及貂红细胞的特定血凝谱,血凝作用可被相应抗血清所抑制。菌毛蛋白质的分子量为１９１００,等电点为３．０,含有天门冬氨酸等１６种氨基酸。用凝集反应、沉淀反应、标记抗体技术等血清学反应能有效地检验该新型菌毛抗原。产生该新型菌毛抗原相应菌株的菌体抗原为Ｏ２３群,能产生肠毒素,人工感染能引起本动物貉发病。 相似文献
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大肠杆菌K99菌毛抗原的制备及其免疫抗体效价的测定 总被引：3，自引：0，他引：3
肠毒素型大肠杆菌 (Enterotoxigenic E.coli,ETEC)是幼龄动物 (仔猪、犊牛、羔羊等 )腹泻中常见而且重要的致病菌之一 ,此类大肠杆菌能借助于其所产生的菌毛抗原粘附于动物的小肠黏膜上 ,定居并产生肠毒素 ,从而呈现出致病作用。当大肠杆菌 K99菌毛粘附于绵羊红细胞上时 ,能使红细胞发生凝集 ,且不被 D-甘露糖抑制 ,系一种甘露糖低抗血凝反应 (MRHA) ,菌毛的MRHA可被相应的抗体抑制 ,故又可用甘露糖抵抗血凝抑制反应 (MRHI)来对其作出确诊[1] 。目前在各种动物中已发现并展开研究的大肠杆菌菌毛抗原主要有 :K88(F4)、K99(F5)、987… 相似文献
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大肠杆菌新菌毛抗原的研究：Ⅵ.用沉淀反应检验菌毛抗原 总被引：1，自引：0，他引：1
大肠杆菌新菌毛抗原的研究Ⅵ．用沉淀反应检验菌毛抗原房海，陈翠珍（河北农业技术师范学院，昌黎０６６６００）对从腹泻动物所分离的大肠杆菌菌株，做菌毛抗原成分的检查是一项重要内容。常用的方法有抗甘露糖血凝试验及血凝抑制试验、用特异菌毛抗原因子血清做直接玻板... 相似文献
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仔猪腹泻源大肠杆菌贵州株K88菌毛研究 总被引：12，自引：0，他引：12
通过玻片凝集试验、抗Ｄ－甘露糖微量血凝试验（ＭＲＭＨ）、离体细胞粘附试验、菌体蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫印迹、质粒ＤＮ民泳等。分析了仔猪腹泻源大砀杆菌贵州株（４０９－１１）所产Ｋ８８菌毛的血凝谱、对肠上皮细胞粘附特性、菌毛蛋白单位分子量,并对其Ｋ８８基因进行了初步定位。结果表明：其所产Ｋ８８菌毛的血凝谱能凝集豚鼠和允许红细胞;能介导细菌粘会于仔猪离体肠上皮细胞,这种粘附作用 相似文献
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嗜水气单胞菌粘附特性的研究 总被引：6，自引：1，他引：6
不同来源的６株嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）对１０种不同红细胞的血凝试验表明，Ｊ－１株能凝集所有的１０种红细胞，而与其他菌株的血凝谱有所不同。血凝图式有２种：人、鸡、麻雀的红细胞凝集快，呈大小不等的絮状；而鲫鱼、绵羊、猪、小鼠、兔、鸭、犬的红细胞凝集慢，且呈均匀颗粒状。这两种血凝均能被Ｄ－甘露糖抑制，但不能被Ｊ－１株Ｒ菌毛抑制。组织粘附试验显示，Ｊ－１株能粘附小鼠和鲫鱼的肠组织和肠绒毛。将提纯的Ｒ菌毛预处理肠组织，或用Ｄ－甘露糖或木瓜蛋白酶消化的Ｒ菌毛抗血清Ｆａｂ片段预处理菌体，都不能抑制上述的粘附作用。Ｊ－１株对ＨＥｐ－２细胞显示强粘附，菌体随机粘附在细胞上，有少数侵入细胞浆内。其余５株菌的粘附特性与Ｊ－１株不尽相同。所有６株菌对草鱼肠组织及肠绒毛、ＥＰＣ细胞（鲤鱼乳头状上皮瘤细胞系）均无粘附性。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒肾型毒株血凝特性的研究 总被引：10，自引：0，他引：10
本文对鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）澳大利亚Ｔ株和分离的四株肾型毒株（ＢＪ＿（９３０１）、ＢＪ＿（９３０２）、ＴＪ＿（９３０１）、ＨＮ＿（９３０１）株）的血凝特性进行了系统研究。结果表明ＩＢＶ供试毒株经１～２％胰蛋白酶处理后，能凝集鸡和小鼠红细胞，同一毒株对两种红细胞的凝集价相近，且均能被ＩＢＶ澳大利亚Ｔ株血清所抑制。处理后的ＩＢＶ对鸡红细胞的血凝以缓冲液浓度０．０１～０．０５ＭｐＨ６．０～８．４为宜，对反应温度及稀释液种类无严格要求。ＩＢＶ的血凝活性能耐受３７℃２３天、５６℃１２小时、８０℃１．５小时，但在－３０℃、４℃和室温下保存２个月后，绝大部分丧失血凝活性。ＩＢＶ经０．２％甲醛、０．２％脱氧胆酸钠、２％硼氢化钠、０．０１Ｍ高碘酸钠３７℃灭活２４小时，仍能保持其血凝活性。从ＩＢＶ的血凝活性可被过量胰蛋白酶破坏和氯仿灭活，推断该血凝素可能是由脂质和蛋白质组成。 相似文献
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禽病原性大肠杆菌I型菌毛单克隆抗体的研制及其对分离株的检测 总被引：1，自引：0，他引：1
从禽病原性大肠杆菌分离株ＴＫ３（Ｏ１）提取Ｉ型菌毛免疫ＢＡＩＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得４株能稳定分泌针对Ｉ型菌毛的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为ａＢ６、ｂＧ５、ｃＦ３和ｃＧ３。单克隆阻断甘露糖敏血凝试验,免疫胶体金和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ试验证明,单抗是Ｉ型菌毛特异的。这些单抗培养上清及腹水的ＥＬＩＳＡ效价为分别为１０＾－２～１０＾－３和１０＾－５～１０＾－６;腹水的平 相似文献
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本试验用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（Ｔ）、ＰＢＳ缓冲液（Ｐ）、生理盐水（Ｓ）和２Ｍ尿素ＰＢＳ缓冲液（Ｕ）以热处理的方法提取大肠杆菌Ｋ９９和Ｆ４１菌毛抗原,并用硫酸铵盐析纯化Ｋ９９以及用１Ｎ醋酸滴定和氯化镁沉淀分别纯化Ｆ４１。根据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和蛋白质含量测定结果,四种缓冲液对Ｋ９９的提取量依次是Ｕ〉Ｓ〉Ｐ,而Ｔ检不出Ｋ９９;对Ｆ４１的提取量依次是Ｕ〉Ｔ〉Ｐ〉Ｓ。Ｋ９９纯化后取得了满意的纯化结果, 相似文献
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本试验主要从红细胞凝集谱、凝集解脱情况以及血凝性的影响因素几方面对本室分离的ＥＤＳ－ＢＨ９１毒株和ＥＤＳ－７６ＡＶ１２７毒株进行了比较系统的测定．试验结果表明：两毒株均能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，而且２４小时内无解脱现象；对兔红细胞呈可疑；对人、奶牛、绵羊、猪、小鼠、驴的红细胞不能凝集。血凝反应的最适温度为３７℃；最适红细胞浓度为１％；分别以ｐＨ７．４．浓度为０．ｏ１、０．０４、０．１、０．２Ｍ以及浓度为０．ｏ１Ｍ，ｐＨ为５．８、６．８、７．４和８．０的ＰＢＳ作为稀释液进行血凝试验．其血凝滴度无显著差异；０．０５～０．３％的甲醛溶液４℃下处理病毒７２小时以及反复冻融病毒５次，其处理前后的血凝性均无显著差异。８０℃１０分钟就可以破坏病毒血凝性，而５６℃作用１小时对病毒血凝性无影响。０．１２５～０．５００％的胰酶对血凝性的影响不明显；病毒对氯仿不敏感，属于无囊膜病毒。 相似文献
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本试验主要从红细胞凝集谱、凝集解脱情况以及血凝性的影响因素几方面对本室分离的ＥＤＳ－ＢＨ９１毒株和ＥＤＳ－７６ＡＶ１２７毒株进行了比较系统的测定。试验结果表明：两毒株均能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，而且２４小时内无解脱现象；对兔红细胞呈可疑；对人、奶牛、绵辜、猪、小鼠、驴的红细胞不能凝集。血凝反应的最适温度产３７℃；最适红细胞浓度为１％；分别以ｐＨ７．４，浓度为０．０１、０．０４、．０．１、０．２Ｍ以 相似文献
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通过转瓶培养ＩＢＲＳ２细胞，选择最佳接毒剂量、接毒时间和收毒时间生产出凝集价（ＨＡ）达２１２的猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）血凝抗原。用抗ＴＧＥＶＳ蛋白和 Ｍ蛋白的单克隆抗体与不同稀释度的ＴＧＥＶ血凝抗原等量混合，在 ３７℃作用 ３０分钟后接种ＩＢＲＳ２细胞和做中和试验（ＮＴ）和血凝抑制（ＨＩ）试验。结果表明ＴＧＥＶ血凝位点与中和位点一致，血凝素位于Ｓ蛋白Ａ位点或其附近。 相似文献
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大肠杆菌K99和F41菌毛抗原的不同缓冲液热处理提取方法比较的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（Ｔ）、ＰＢＳ缓冲液（Ｐ）、生理盐水（Ｓ）和２Ｍ尿素ＰＢＳ缓冲液（Ｕ）以热处理的方法提取大肠杆菌Ｋ９９和Ｆ４１菌毛抗原,并用硫酸铵盐析纯化Ｋ９９以及用１Ｎ醋酸滴定和氯化镁沉淀分别纯化Ｆ４１。根据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和蛋白质含量测定结果,四种缓冲液对Ｋ９９的提取量依次是Ｕ＞Ｓ＞Ｐ,而Ｔ检不出Ｋ９９;对Ｆ４１的提取量依次是Ｕ＞Ｔ＞Ｐ＞Ｓ。Ｋ９９纯化后取得了满意的纯化结果,Ｆ４１纯化后大量上样做电泳时仍有微细的污染带出现,而且氯化镁沉淀后造成Ｆ４１严重损失。Ｋ９９和Ｆ４１纯化前后的各个样品经超声波处理、０．５％脱氧胆酸钠处理和未处理的原液与自家因子血清做琼扩试验以及Ｋ９９和Ｆ４１做交叉琼扩试验,均具有良好的特异性,而且以超声波处理后的样品做琼扩试验效果最佳。 相似文献
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从福建省几个大肠杆菌病较严重的大型养鸡场分离到的８５株大肠埃希氏菌,从致病性试验、生化试验、药敏试验及生物学我试验结果表明,其中有５２株为致病菌,致病菌分离率６１．１％;分离菌株的生化特性符合大肠埃希氏菌的生化特性;所有菌株均能凝集鸡的红细胞,并能被Ｄ－甘露糖所抑制;对人、猪、山羊、乳牛、兔、犬、豚鼠、鸽和鱼的红的细胞表现为不同的血凝（ＨＡ）和Ｄ－甘露糖血凝抑制特性;２４株强致病菌中有７９．２％的表现为盐凝集试验（ＳＡＴ）阳性：所有菌株对丁胺卡那霉素（ＡＫＮ）和菌必治敏感,对氯霉素（ＣＭＰ）、先锋霉素（ＣＴＮ）、卡那霉素（ＫＡＮ）、呋喃妥因（ＮＩ）、氟嗪酸（ＯＦＬ）、壮观霉素（ＳＰＴ）、妥布霉素（ＴＯＢ）、新霉素（ＮＥＯ）、氟哌酸（ＮＯＲ）、复合磺胺（ＳＸＴ）和强力毒素（ＤＯＸ）有较高敏感性,而对红霉素（ＥＲＹ 相似文献
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导致鸡发生败血症的大肠杆菌一般具有Ｆ１（Ｉ型）菌毛（由Ｐｉｌ同源基因群编码）和／或Ｐ菌毛（由ｐａｐ同源基因群编码），这些菌毛通常被认为与感染和定殖有关。本实验以３株致病大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）Ｏ１（Ｐｉｌ＾＋／ｐａｐ＾＋）、Ｏ２（ｐｉｌ＾＋／ｐａｐ）和Ｏ７８（ｐｉｌ＾＋／ｐａｐ＾＋）通过气管内注射１．５周龄鸡，旨在探讨由不同毒力因子引起传染的动力学变化及其菌毛在体内的表述，感染后３～１４４小时剖检 相似文献
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猪传染性胃肠炎病毒的血凝作用 总被引：4，自引：0，他引：4
将猪传染性胃肠炎病毒Ａ株在ＩＢＲＳ２细胞上增殖，增减物经差速离心浓缩后与鸡红细胞出现了高凝集价。这种凝集作用能被兔抗ＴＧＥＶ高免血清所抑制。试验的最适反反应体积分数０．５０％红细胞４℃作用１ｈ。通过反复建立了一种简单实用的血凝抗原制备方法，病毒增减液不需浓缩可直接应用。 相似文献
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重组牛白细胞介素-2增强小鼠对伊氏锥虫可溶性抗原免疫应答的研究 总被引：4，自引：1，他引：3
使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠，研究了同时注射重组牛白细胞介素－２（ｒＢＩＬ－２）对ＮＫ细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响。试验鼠随机分为４组：Ａｇ组，ｒＢＩＬ－２组，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组和ＰＢＳ对照组。以ＬＤＨ释放法和间接ＥＬＩＳＡ法分别检测脾ＮＫ细胞杀伤活性及抗体水平。结果表明，首次免疫后２４ｄ，Ａｇ组ＮＫ细胞杀伤活性为３１．６％，ｒＢＩＬ－２组为９９．６６％，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为９８．９８％，对照组为１９．７３％；抗体效价Ａｇ组为２４，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为２６。说明ｒＢＩＬ－２可显著提高ＮＫ细胞杀伤活性及促进抗体生成，提高宿主免疫力。 相似文献
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本试验旨在探讨ＥＤＳ病毒血凝反应的最佳反应条件,观察病毒对各种动物红细胞的凝集谱,测定各种因素对病毒血凝素的影响,结果表明,血凝反应宜采用１％的鸡红血球,稀释液用ｐＨ７的生理盐水,室温作用３５ｍｉｎ（分钟）后观察表明,该病毒能凝集鸡,鸭,鹅红细胞,而不能凝集哺乳动物红细胞,耐热,５６℃１ｈ不影响其血凝性,对胰酶和浓度大于０．４％的甲醛敏感;反复冻融８次对血凝效价无影响。 相似文献