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本研究旨在制备猪腺病毒3型(PADV-3)Hexon蛋白多克隆抗体.试验构建重组原核表达载体pET28a-Hexon,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行Western blotting鉴定,目的蛋白与佐剂混合、乳化制备免疫原,免疫家兔制备Hexon蛋白多克隆抗体.采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性与抗体滴度.结果显示,Hexon蛋白原核表达以包涵体形式存在,分子质量约为105 ku;真核细胞表达的Hexon蛋白均定位于HEK293细胞质内,细胞核内无分布;IPMA测定所制备的多克隆抗体滴度为1:1 600,该抗体与体外培养的PADV-3及稳定表达Hexon蛋白的细胞均呈特异性反应.结果表明本试验制备的PADV-3型Hexon蛋白多克隆抗体免疫活性和特异性良好. 相似文献
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《畜牧与兽医》2017,(11):75-81
为了研究牛支原体P48抗原蛋白的免疫学功能及相应卵黄抗体的生物学特性,探究其抗体效价随免疫时间的变化规律,试验采用牛支原体P48蛋白疫苗免疫健康产蛋母鸡,定时采血并收集鸡蛋,用水稀释法结合硫酸铵盐析法制备特异性卵黄抗体,利用间接ELISA法检测血清抗体(IgG)和卵黄抗体(IgY)效价。结果表明,低、中、高剂量组均能诱导蛋鸡产生有效免疫应答,血清抗体效价与卵黄抗体效价的变化趋势基本一致,但卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,在首次免疫后8~10周Ig Y效价达到峰值,其中中剂量组的免疫效价最高,最高效价为1:212。经SDS-PAGE检测,制备所得的纯度达86%以上,得率在8.6 mg/m L以上。说明采用牛支原体P48蛋白免疫蛋鸡可制备高效价、高纯度的抗牛支原体P48蛋白卵黄抗体,从而为卵黄抗体在牛支原体的检测与防控方面的研究奠定了基础。 相似文献
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免疫胶体金快速诊断技术源于对血清与尿液的绒毛膜促性腺激素的免疫渗滤试验检测,之后有学者提出采用胶体金作为标记物替代酶应用于渗滤试验,并制备完成广泛应用的对抗人类免疫缺陷病毒抗体检测的试剂盒.由于免疫胶体金快速诊断技术方便快捷,已在妊娠试验、检测传染病病原抗体等方面进行应用,而应用于兽医诊断的研究刚刚起步. 相似文献
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<正> 随着免疫学技术的发展,第二抗体血清己广泛应用于教学、科研及医学、兽医学临床。在放射免疫、酶联免疫、荧光免疫及发光免疫等先进诊断技术中,二抗血清均为理想的中试品,批量生产的各种免疫药盒都不可缺少。1983年以来,我们先后采用微量免疫法免疫马、骡、驴等动物制备马(骡、驴)抗兔血清获得成功。凝胶双扩散免疫沉淀反应法检测效价均达到1:64倍以上。现将制备情况报告如下。 相似文献
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通过N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星和沙拉沙星分别与牛血清白蛋白偶联制备免疫抗原,与卵清白蛋白偶联制备检测抗原,筛选一种可用于多种氟喹诺酮残留的检测抗体。将免疫抗原分别免疫獭兔制备多克隆抗体,采用间接竞争ELISA法测定抗体特异性。诺氟沙星抗体特异性较强,与同类药物的交叉反应较少,沙拉沙星抗体与同类药物发生交叉反应最多,且与诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的交叉反应率较高。结果表明,确定沙拉沙星抗体作为进一步研究的抗体。 相似文献
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2型鸭疫里默氏菌抗体效价与免疫保护率的相关性测定 总被引：1，自引：0，他引：1
以在实验室条件下制备的2型鸭疫里默氏菌(RA-2)油佐剂火活疫苗免疫7日龄雏番鸭后,每隔7 d采血,采用间接ELlSA法测定免疫鸭血清中的抗体效价,并同时进行攻菌保护试验,寻找血清中RA-2 ELISA抗体效价与免疫保护率之间的相关性.结果表明血清中RA-2 ELISA抗体效价为1:100时,其免疫保护率为70%;为1:200时,免疫保护率为83.3%;而在抗体效价≥1:400时,其免疫保护率高达100%.可见,血清中RA-2 ELlSA抗体效价与免疫保护率呈正相关. 相似文献
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应用薄膜分散法(TFDM)和反相蒸发法(REM)制备了两种脂质体一新城疫(L-ND)疫苗.由REM制备的L-ND疫苗,无论应用于高母源抗体鸡,还是低母源抗体鸡,L-ND疫苗组的HI抗体效价均明显高于单纯疫苗组(P<0.05);在免疫后2～3周内,其ANAE~+淋巴细胞百分数也均高于单纯疫苗组(P<0.05);对高母源抗体鸡的有效免疫期比单纯ND疫苗延长1周,对低母源抗体鸡的有效免疫期延长3周. 相似文献
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为研究新型罗非鱼链球菌疫苗,并且建立检测罗非鱼无乳链球菌IgM抗体水平的ELISA方法,试验首先纯化了罗非鱼血清中的IgM,制备抗IgM的兔高免血清,优化反应条件,比较不同浓度浸泡型疫苗和注射型疫苗的相对免疫保护率,并利用建立的ELISA方法监测罗非鱼免疫后2周抗体水平以及攻毒后4个月内的免疫鱼血清抗体水平变化。结果表明:高浓度浸泡型疫苗能达到88. 65%的相对保护率; ELISA方法特异性较高,重复试验中变异系数最大值为8. 33%,灵敏度为1∶400。通过对免疫鱼血清抗体的跟踪监测,表明血清抗体在免疫后2周明显上升,且产生的免疫保护力可长达4个月之久。说明建立的ELISA方法可以检测罗非鱼IgM抗体,制备的疫苗通过浸泡的方式免疫,可使罗非鱼获得长达4个月的保护力。 相似文献
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现阶段,生物科学领域的一项重大发现即为卵黄抗体,由于其自身具有相对简单的制备过程,因此获得较为广泛的应用.其制取过程主要是在母鸡体内注射一种特定的抗原物质,特定抗原会受到母鸡免疫系统的影响完成处理,这样的化学反映在经过免疫之后便会产生抗体,并在卵黄中集中起来,因而形成卵黄抗体.研究表明,卵黄抗体在动物疾病防治中扮演着重要性角色,对其加以广泛性应用研究,有利于促进动物疾病防治效果的提升. 相似文献