产气荚膜梭菌主要毒力因子的分子生物学研究进展     

宋厚辉  方维焕等 《预防兽医学进展》2001,3(1):13-16

  相似文献   

表达猪链球菌溶血素基因的减毒沙门氏菌的构建及鉴定   总被引：3，自引：1，他引：3  

马有智  戴贤君  李肖梁  方维焕 《中国兽医学报》2005,25(5):478-480

将猪链球菌溶血素（suilysin，SLY）基因克隆入原核表达栽体pBV220，将重组质粒再导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SV4089株，经PCR和酶切鉴定，构建成携带猪链球菌溶血素基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。结果表明：该减毒株具有相对安全性；用酶切和PCR鉴定法证实在无抗生素存在的条件下携带重组质粒的减毒株比较稳定；SDS-PAGE显示SLY能在宿主菌中进行表达。该结果为进一步研究制备猪链球菌口服活疫苗奠定了基础。  相似文献   

嗜水气单胞菌免疫蛋鸡IgY效价变化规律和体外抑菌效果观察     

李肖梁  钱娅  朱志刚  方维焕 《中国兽医杂志》2006,42(5):48-49

大约在100多年以前,Klemperer发现免疫的鸡可以将Ig从血清转移到蛋黄中,具有IgG样的免疫球蛋白作用.用禽卵大量制备多克隆抗体它有几个优势：饲养成本较低;不会造成动物的伤害;易产生高水平的抗体;在pH4～11时较稳定,可作为口服剂和检测试剂用于预防、治疗和诊断动物疾病,是近年来抗体制备技术中新兴的研究领域。  相似文献   

O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达与抗原性分析     

徐程  陈亚波  方维焕 《动物医学进展》2007,28(6):14-18

研究分析了O型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1与当前猪FMDV疫苗血清的免疫反应性.将VP1基因克隆至原核表达载体pET32c,并在大肠埃希菌BL21中得到了表达,Western blot分析表明该重组蛋白与豚鼠O型FMDV标准阳性血清具有良好免疫反应性.目的蛋白经纯化后用ELISA分析其与猪疫苗血清的免疫反应性,结果显示该重组VP1蛋白(rVP1)只能与部分O型FMDV疫苗血清反应.推测当前使用的不同O型FMDV疫苗毒株在VP1重要中和抗原位点G-H环(134 aa～158 aa)与C末端(200 aa～213 aa)存在较大差异.  相似文献   

猪链球菌2型溶血素基因缺失株构建及其生物学特性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴炜  张晓燕  唐宇龙  方丽华  方维焕 《动物医学进展》2012,33(5):22-26

猪链球菌溶血素(SLY)是较早确定的猪链球菌毒力因子之一,具有细胞毒性,在猪链球菌致病过程中发挥重要作用。利用同源重组技术成功构建了猪链球菌2型(SS2)sly基因缺失的突变株SS2-Δsly,缺失株的体外溶血活性消失,对小鼠脑血管内皮细胞的细胞毒性显著低于亲本菌株(P<0.01),但不影响猪链球菌2型在巨噬细胞中的存活。该菌株可以用于研究SS2溶血素在感染细胞中的作用机制。  相似文献   

奶牛隐性乳房炎的病原学调查(简报)     

方维焕  黄利权  胡松华  刘汉儒  蒋次升 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1992,(1)

奶牛乳房炎作为一种多因素性疾病,主要表现在致病菌的多样性,其中包括多种细菌以及真菌、病毒、霉形体等。为了摸清部分奶牛场乳房炎病原菌的区系分布及流行情况,我们于1981年至1988年间,对杭州及合肥市郊六个奶牛场956头奶牛的2300个隐性乳房炎乳区的奶样,进行了细菌的分离鉴定。  相似文献   

两种抗菌素油剂防治奶牛干奶期乳房炎的疗效比较     

方维焕  裘志明 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1990,(3)

以杭州乳房炎诊断法(HMT)、细菌学检验和临床检查结果为依据,综合判断PC-805和TA-125两种抗菌素油剂对干奶期乳房炎的防治效果。66头受试奶牛随机分成两组,第一组35头136个乳区于停奶当天经由乳头管注入20ml PC-805;第二组31头121个乳区以同样方法注入20ml TA-125。第一组牛在干奶前有72个乳区为HMT强阳性(++、+++),至产后降为11个,转阴率为84.7％;第二组牛在干奶前HMT强阳性乳区为66个,产后降至6个,转阴率为90.9％。第一、二组HMT强阳性乳区的细菌转阴率分别为57.4％和68.4％,除去新感染后则分别为70.5％和75.4％。这两种制剂对链球菌感染的效果较好,而对葡萄球菌的作用较差,第一组牛在千奶期间的临床发病率为2.9％,第二组为1.7％。尽管TA-125的疗效较好,但统计结果表明这两种制剂对HMT和细菌转阴率以及临床发病率方面均无显著差异(P>0.05)。  相似文献   

牛奶中大肠杆菌(Escherichia coli)生长的荧光测定法   总被引：1，自引：0，他引：1  

方维焕  施明华 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1992,(4)

大肠杆菌(Escherichia coli)产生的β-葡糖苷酸酶可以分解4-甲基伞形酮酰β-D-葡糖醛酸苷(4-MUG),形成产生荧光的终产物:4-甲基伞形酮,本试验将4-MUG加入牛奶中并应用荧光扫描仪检测酶解终产物的荧光强度以判断大肠杆菌在牛奶中的生长状况.试验结果表明,荧光强度自第4小时起开始上升,滞后于活菌数的增加,但荧光度增强与活菌数增加具有较好的一致性,而且方法快速,简便,应用荧光分析法初步证明乳酸菌对大肠杆菌的生长未见有抑制作用.  相似文献   

集约化猪场PWD病原性大肠杆菌毒力因子分析   总被引：3，自引：0，他引：3       下载免费PDF全文

姜中其  王娜  方维焕  孙建华  李洪州 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2006,32(5):520-526

探索浙江省集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)病原性大肠杆菌血清型和毒力因子特征,为PWD防治及耐药性研究提供资料.从10个规模化猪场以直肠棉拭子采集PWD病料,经细菌分离纯化、革兰氏染色、生化试验和小鼠致病性试验等,对病原进行鉴定.采用11种猪源大肠埃希氏茵常见O型抗原血清、应用K88及F18菌毛单因子血清对分离茵进行玻板凝集试验和PCR方法分析黏附素及肠毒素类型.分离鉴定的56株病原性大肠杆菌O抗原定型了33株,共覆盖了11种血清型,其中O149、O139、O8为优势血清型,共17株,占定型菌株的51.5%;茵毛单因子血清玻板凝集试验和PCR测得病原性大肠杆菌中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)比例较高,占病原性大肠杆菌分离总数的67.92%(36/53),肠毒素中含STa、STb、STa+STb、LT和SL-2e分别占总检测菌株数的30.19%(16/53)、35.85%(19/53)、18.9%(10/53)、1.89%(1/53)和9.43%(5/53).黏附素类型主要有K88和F18两种,分别占总检测菌株数的24.53%(13/53)和28.30%(15/53).结果表明,浙江省PWD病原性大肠杆菌至少覆盖了包括优势血清型O149、O139、O8在内的11种血清型;大肠杆菌中以产肠毒素型为主,主要毒力因子包括黏附素F18及K88和肠毒素STa、STb、SLT-2e等.  相似文献   

减毒沙门氏菌为载体传递DNA疫苗诱导对新城疫病毒的免疫保护   总被引：8，自引：2，他引：6  

方维焕  梁雪芽  李建荣 《中国兽医学报》2003,23(6):527-530

探讨了以减毒鼠伤寒沙门氏茵为栽体传递新城疫病毒DNA疫苗的安全性、免疫原性和可行性。将含新城疫病毒(NDV)F48E9株融合蛋白(F)基因的真核表达质粒pcDNA3-F的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ZJ111株(ZJ111／pcD-NA3一F菌株)，以10^8CFU进行首免，2周后二免，三免后4周攻击强毒株F48E9，观察其安全性和免疫原性，同时设只含空载体pcDNA3的ZJ111／pcDNA3菌株对照及口服PBS对照。结果表明：重组ZJ111／pcDNA3-F菌株具有良好的安全性。对强毒株攻击的保护率达64．7％。重组ZJ111／pcDNA3-F菌株不仅能诱导雏鸡产生NDVELISA抗体，而且诱导产生的法氏囊B淋巴细胞和胸腺T淋巴细胞增殖反应显著高于ZJ111／pcDNA3时照组。这些结果提示，减毒沙门氏菌为载体不仅可直接将NDVF基因呈递给鸡体细胞进行表达，产生抗NDV的体液免疫，而且还可诱导细胞免疫应答。  相似文献