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1.
在兔支气管败血波氏杆菌灭活疫苗中加入不同剂量的槐花多糖,制备兔波氏杆菌槐花多糖灭活苗.选取体质量1 kg左右的健康獭兔72只,随机分为6组,其中Ⅰ～Ⅲ组为槐花多糖疫苗组(槐花多糖含量分别为60,40,20 g/L),Ⅳ组为兔波氏杆菌蜂胶疫苗对照组,V组为无多糖的兔波氏杆菌疫苗对照组,Ⅵ为空白对照组,各组分别于免疫后0,3,7,14,21,28,35,42 d采血,用平板凝集试验检测血清抗体效价,全自动血细胞分析仪测定淋巴细胞比率,试剂盒检测血清中IL-2的含量.结果显示,Ⅰ～Ⅳ组各指标均高于V组,其中Ⅰ、Ⅳ组显著高于V组(P＜0.05);Ⅱ组与Ⅲ组总体差异不显著(P＞0.05);Ⅳ组总体水平略低于Ⅰ组.由此表明,槐花多糖能提高獭兔对支气管败血波氏杆菌的免疫作用,60 g/L剂量的效果最佳,这为开发槐花多糖作为新型免疫佐剂和免疫增强剂奠定了基础. 相似文献
2.
泰山松花粉多糖对PRRSV GP5亚单位疫苗免疫增强作用的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
《中国预防兽医学报》2017,(9)
为研究泰山松花粉对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5的免疫增强作用,本研究以原核表达的高致病性PRRSV GP5蛋白为抗原,添加不同剂量的天然提取的泰山松花粉多糖(TPPPS)作为免疫佐剂配制PRRSV亚单位疫苗。选取72只SPF昆明小鼠随机分为6组(Ⅰ-Ⅵ),12只/组。Ⅰ组免疫纯化的GP5亚单位疫苗,Ⅱ-Ⅳ组分别免疫不同浓度的TPPPS(20 mg/mL、40 mg/mL、60 mg/mL)佐剂GP5亚单位疫苗,V组免疫弗氏不完全佐剂GP5亚单位疫苗,VI组注射PBS;1周后各组均加强免疫1次,加强免疫后,每周每组随机挑选3只小鼠采集外周血,分别检测小鼠血清抗体效价、T淋巴细胞亚群比例、T淋巴细胞转化率和细胞因子的含量,评价TPPPS对PRRSV-GP5蛋白诱导的免疫应答反应的调节作用。结果显示,所有疫苗免疫组小鼠的上述免疫指标比对照组均有显著提高,而添加TPPPS和弗氏佐剂的疫苗组各项指标均显著高于单独GP5蛋白免疫组。3个浓度的TPPPS佐剂中,60 mg/mL浓度的免疫增强效果最显著。本研究表明,重组表达的PRRSV GP5蛋白能够诱导动物机体显著的免疫应答,TPPPS佐剂对PRRSV GP5蛋白呈现显著的免疫增强效果。本研究为研制PRRSV亚单位疫苗提供了参考。 相似文献
3.
共表达鹅细小病毒VP3-gIL2重组乳酸杆菌的构建及其口服免疫评价 总被引：1，自引：0，他引：1
笔者拟构建共表达鹅细小病毒(GPV)VP3和鹅白细胞介素-2(IL-2)的分泌性重组乳酸杆菌,评价口服表达融合蛋白GPV VP3-gIL2的重组乳酸杆菌的免疫效果。通过酶切将VP3基因和IL-2基因连接,并在其5′端连入乳酸杆菌的信号肽基因SP,亚克隆到乳酸杆菌整合表达载体pMJ67,电转化入干酪乳杆菌L.CECT5276,SDS-PAGE和Western blot法鉴定重组菌GPVVP3-gIL2融合蛋白的表达活性。将重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅后检测血清GPV抗体、小肠黏液sIgA和脾淋巴细胞增殖情况,评价其免疫效果。结果表明,酶切和测序结果表明成功构建重组表达载体pMJ-SP-GPVVP3-gIL2,PCR证实质粒pMJ-SP-GPVVP3-gIL2成功整合到乳酸杆菌基因组;Western blot表明重组乳酸杆菌分泌表达的融合蛋白GPVVP3-gIL2能与GPV阳性血清特异性结合;淋巴细胞增殖试验表明口服重组菌后能特异地刺激脾淋巴细胞增殖,且在第4、5、6周明显高于GPV VP3组和gIL2组;重组乳酸杆菌口服免疫雏鹅可以产生抗VP3蛋白抗体,且具有中和活性的抗体显著高于GPV VP3组;小肠黏液sIgA细胞生成的数量自第2周较GPV VP3组和疫苗组显著上升。动物攻毒试验结果显示GPV VP3-gIL2融合蛋白免疫组能够获得85%的保护率,表明所构建的重组乳酸杆菌口服后对GPV的攻击具有较好的免疫保护作用。本试验成功构建能稳定表达GPV VP3-IL2融合蛋白的口服乳酸杆菌工程菌,为研究其作为口服疫苗奠定了基础。 相似文献
4.
禽波氏杆菌免疫荧光检测和抗体检测ELISA方法的建立与应用 总被引：3，自引：0，他引：3
采用改良的Wooldridge法提取了禽波氏杆菌外膜蛋白（0MP）,通过Bradford方法测定禽波氏杆菌OMP含量为320μg／mL,SDS-PAGE电泳检测发现禽波氏杆菌P5株OMP含有5种成分,相对分子质量分别为58、47、41、36、24ku;P8株OMP含有6种成分,相对分子质量分别为58、47、41、38、21、16ku。将提取的禽波氏杆菌OMP免疫健康青紫兰兔,每周免疫1次,共免疫4次,获得了兔抗禽波氏杆菌OMP高免血清,以此高免血清建立了检测禽波氏杆菌的间接ELISA和间接免疫荧光（IFA）方法,并对其工作条件进行了优化和筛选,试验结果表明间接ELISA抗原、抗血清最佳工作浓度分别为10μg／mL、1：12800,酶标二抗工作浓度为1：5000,最佳包被条件为4℃、24h,最佳封闭条件为37℃、1h;间接免疫荧光（IFA）兔高免血清释释度为1：20,FITC标记羊抗兔IgG稀释度为1：10,感作时间为45min时,禽波氏杆菌特异性黄绿色荧光最清晰,非特异性荧光最弱。经临床检测证明该两种方法均具有简便、快速、特异性强的特点,为禽波氏杆菌病的流行病学、血清学调查和临床快速诊断奠定了基础。 相似文献
5.
为研究乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌菌体OMP的免疫增强作用,本试验利用超声波细胞粉碎器破碎、TritonX-100处理技术提取了乳酸杆菌与地衣芽孢杆菌OMP,通过考马斯亮蓝G-250法测得两者菌体OMP含量,进行了SDS-PAGE电泳检测,然后将提取的菌体OMP以不同的方式、含量作为免疫增强剂与新城疫病毒尿囊液混合后再与油佐剂以1:3比例制备成免疫原,免疫7日龄雏鸡,通过持续10周的抗体检测、外周淋巴细胞比例(A)及白细胞吞噬指数(B)检测,判断菌体OMP对新城疫病毒具有免疫增强作用.结果,乳酸杆菌与地衣芽孢杆菌菌体OMP含量分别为2 323.5、867.6 mg/L;SDS-PAGE电泳试验得出分子量分别为6.4×104、8.6×104的乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌菌体OMP蛋白含量多,带的颜色较深,为起主要作用的蛋白;各试验组HI抗体效价免疫保护期远远高于单独使用新城疫LaSota株灭活油苗的对照组及空白组,差异显著(P<0.01或P<0.05);各试验组外周淋巴细胞比例(A)及白细胞吞噬指数(B)均高于单独使用新城疫LaSota株灭活油苗的对照组及空白组,差异显著(P<0.01或P<0.05);同时还可以得出菌体OMP含量越高则HI抗体效价、淋巴细胞比例(A)、白细胞吞噬指数(B)均增高;不同菌体OMP混合免疫增强作用高于单独使用一种菌体OMP.由此表明乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌菌体OMP能显著增强ND疫苗的免疫效果,为今后研制免疫效果更好地ND疫提供了技术支持. 相似文献
6.
《中国兽医杂志》2018,(8)
为了评估表达产气荚膜梭菌α毒素plc基因的重组植物乳酸杆菌口服活菌疫苗的免疫保护效果,分别进行了重组活菌疫苗的免疫和产气荚膜梭菌攻菌试验。免疫组雏鸡分为3组,于7~28 d分别连续免疫p SIP409空载体植物乳酸杆菌、pSIP409-plc重组植物乳酸杆菌和灭菌PBS;攻菌组雏鸡免疫方法同上,于43~47 d连续口服产气荚膜梭菌(设置PBS免疫组不攻菌只口服等量PBS对照)。通过病理组织学检查疫苗对雏鸡组织器官的损害作用; ELISA检测抗体动态变化、攻菌后细菌分离计数、剖检肠道病变评分、雏鸡体重变化和免疫器官发育情况来整体评价疫苗的免疫水平。结果显示,与对照组相比重组疫苗的免疫没有对雏鸡组织器官产生损害作用,plc特异性抗体IgG和s IgA水平检测显示,抗体水平随日龄增长呈现上升趋势,且与未免疫组有显著和极显著差异(P 0.05,P 0. 01);攻菌后免疫组雏鸡各项指标在短暂下降后很快升高,且明显高于未免疫组雏鸡。攻菌组各项试验也证明,我们的重组口服活菌疫苗对产气荚膜梭菌攻击雏鸡起到很好的保护作用。 相似文献
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禽波氏杆菌病原性研究及防治初探 总被引：4，自引：0，他引：4
本文介绍了禽波氏杆菌的培养特性、药物敏感性及生化特性，重点进行了禽波氏杆菌对雏鸡的致病性研究，结果证明本菌主要引起雏鸡的急性死亡，主要病变为肺脏出血，肝脏出血、边缘坏死，肾脏出血，腺胃、肌胃浆膜出血，肠道出血。不同日龄的雏鸡对禽波氏杆菌的抵抗力不同，与日龄成正相关。同时还用不同来源的8株禽波氏杆菌制成蜂胶灭活苗，并分别免疫1日龄和11日龄雏鸡，结果发现本疫苗对雏鸡的保护率低。 相似文献
8.
为了评估表达产气荚膜梭菌NetB毒素的重组植物乳酸杆菌口服活菌疫苗对鸡的免疫保护效果,分别进行了重组活菌疫苗的免疫和产气荚膜梭菌攻菌试验。设置3组免疫组雏鸡,于7~28日龄分别连续免疫pSIP409空载体植物乳酸杆菌、pSIP409-Net B重组植物乳酸杆菌和灭菌PBS;设置4组攻菌组雏鸡,免疫方法同上,免疫后于43~47日龄连续口服产气荚膜梭菌(设置PBS免疫组不攻菌只口服等量PBS对照)。通过免疫后肠道分离重组菌、病理组织学检查疫苗对雏鸡组织器官有无损害作用及保护作用;攻菌后细菌分离计数、剖检肠道病变评分来评价疫苗的免疫水平。结果显示,免疫后2周仍可在免疫鸡的小肠、盲肠段分离到重组菌;组织学检查发现与对照组相比重组疫苗的免疫没有对雏鸡组织器官产生损害作用;NetB攻菌组的肠道损伤情况较空载体攻菌组和PBS攻菌组轻微;NetB攻菌组的肠道病变评分低于空载体攻菌组和PBS攻菌组。表明所构建的重组口服活菌疫苗安全有效,结果为重组植物乳杆菌表达系统作为口服疫苗应用提供了理论依据。 相似文献
9.
《黑龙江畜牧兽医》2020,(3)
为了评价黄芪多糖作为疫苗佐剂的潜力,试验用黄芪多糖和灭活的H9N2亚型禽流感病毒免疫C57BL/6小鼠,将20只小鼠均分为4组,第1组为黄芪多糖组(免疫黄芪多糖),第2组为灭活H9N2亚型禽流感病毒组(免疫灭活H9N2亚型禽流感病毒),第3组为混合组(免疫黄芪多糖和灭活H9N2亚型禽流感病毒),第4组为生理盐水组(注射生理盐水),通过淋巴细胞增殖试验和流式细胞术对C57BL/6小鼠外周血淋巴细胞的增殖反应、B淋巴细胞和T淋巴细胞的变化及T淋巴细胞亚群比值变化进行研究。结果表明:混合组对小鼠外周血淋巴细胞的增殖有促进作用,可以提高小鼠外周血B淋巴细胞和CD~+_3CD~+_4T淋巴细胞亚群比例,并对小鼠外周血T淋巴细胞亚群有调节作用。说明灭活H9N2亚型禽流感病毒与黄芪多糖混合时具有协同作用。 相似文献
10.
《畜牧兽医学报》2017,(2)
不同血清型的致病性大肠杆菌是引起幼畜腹泻的主要病因之一。笔者拟对采用微囊包被技术制备的羊大肠杆菌灭活口服疫苗对大鼠的免疫效果进行评价。将制备的羊大肠杆菌蜂胶佐剂灭活苗作为芯材,天然高分子材料海藻酸钠为壁材,采用喷雾干燥法制备微囊化口服疫苗。微囊化口服疫苗的含菌量为7.52×1011菌·g-1。100只成年健康大鼠随机分为对照组、注射组和微囊包被口服疫苗组(再分为基础剂量、10倍基础剂量和20倍基础剂量三组),免疫后采用微量凝集试验和本室建立的间接ELISA方法检测免疫血清抗体效价并对细胞和黏膜免疫进行检测。微量凝集试验检测结果显示,免疫后7d各试验组即可产生抗体,免疫后28d时抗体效价达到高峰,随后开始下降。间接ELISA方法检测结果显示,免疫后14d各试验组特异抗体转阳,并持续到28d。口服组的抗体效价均显著高于对照组(P0.05),而与注射组无差异(P0.05),且各口服剂量组之间差异不显著(P0.05)。免疫后35d口服试验组特异抗体转为阴性,而注射组可维持到35d;T淋巴细胞转化结果显示,免疫7d后,三个口服剂量组的SI值均显著高于对照组和注射组(P0.05)。免疫后口服各剂量组的肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量均高于同期的对照组和注射组,21d后sIgA含量达到高峰。微囊包被口服疫苗能够产生与注射组同样的体液免疫,同时还可以刺激大鼠机体产生较好的细胞免疫和黏膜免疫。 相似文献
11.
12.
本文旨在克隆禽波氏杆菌外膜蛋白OmpA的编码基因,并预测OmpA蛋白二级结构和B细胞抗原表位,从而探讨禽波氏杆菌外膜蛋白OmpA在免疫保护中所起的作用。作者对禽波氏杆菌的外膜蛋白ompA基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学相关软件和方法,对禽波氏杆菌OmpA蛋白的二级结构和B细胞抗原表位进行预测。禽波氏杆菌ompA基因全长597bp,编码199个氨基酸。二级结构以无规卷曲为主,有少量的α-螺旋和β-片层,少见β-转角;推测OmpA蛋白有5个B细胞优势抗原表位区域、2个糖基化位点。本研究为进一步分析禽波氏杆菌免疫机理、制备单克隆抗体和设计表位疫苗等奠定理论基础。 相似文献
13.
本试验将卡介菌多糖核酸应用于新城疫疫苗免疫雏鸡,观察其抗氧化和对鸡体免疫功能的影响。将200只1日龄AA肉鸡随机分为5组,每组40只,分别为卡介菌多糖核酸高（0.12 mg/只）、中（0.06 mg/只）、低（0.03 mg/只）剂量组,黄芪多糖组（阳性对照,0.06 mg/只）和空白对照组。每组鸡7日龄时免疫新城疫疫苗并同时按分组要求注射药物,连续7 d,空白对照组以生理盐水代替。分别于用药后5、10、15和20 d分批剖杀鸡,采取胸腺、脾脏、法氏囊和颈静脉血,测定免疫器官系数,鸡新城疫病毒（NDV）抗体滴度,血浆IgG、IgM、超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化物（LPO）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的含量。结果表明,卡介菌多糖核酸能显著提高鸡血清中SOD和GSH-Px含量,降低LPO含量（P＜0.05）,具有良好的抗氧化功能;能显著提高受试鸡的免疫器官系数、NDV抗体滴度、血清中IgG和IgM含量（P＜0.05）,具有良好的免疫佐剂效应。 相似文献
14.
Fowl cholera: influence of Bordetella avium on vaccinal immunity of turkeys to Pasteurella multocida
Turkeys exposed to Bordetella avium were vaccinated against fowl cholera with live Pasteurella multocida vaccine. Previous exposure to B. avium resulted in impairment of systemic immunity conferred by the vaccine: 86% of the vaccinated turkeys exposed to B. avium at 1 day old developed lesions or died of fowl cholera after challenge at 15 weeks old with virulent P. multocida. Of vaccinated turkeys not previously exposed to B. avium, only 26% had lesions or died of fowl cholera. 相似文献
15.
本试验以超声破碎和高速离心方法提取禽波氏杆菌外膜蛋白,作为抗原免疫家兔,制备并纯化兔抗禽波氏杆菌外膜蛋白IgG,建立了能进行禽波氏杆菌抗原定位和检测的间接免疫酶组化法,并对试验条件进行了优化。对禽波氏杆菌人工感染海兰褐雏鸡的检测结果表明,该法能特异性地对气管、肺、肝、心、脾、肾中的禽波氏杆菌进行抗原定位,同细菌分离鉴定的结果符合率为100％。同时对感染鸡胚肝脏和心脏中禽波氏杆菌的检测结果均为阳性。该法具有高度敏感性和特异性特点,可用于禽波氏杆菌临床和试验感染条件下的诊断和定位检测。 相似文献
16.
研究玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的调节作用。将120只1日龄雏鸡随机分成6组,分别为空白对照组、玉竹多糖对照组、玉竹多糖调节组、板蓝根多糖对照组、板蓝根多糖调节组、免疫抑制对照组,除空白对照组外,其余各组在7日龄时饮水免疫鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(LaSota株+H120株)。测定免疫后不同阶段雏鸡新城疫疫苗抗体滴度、血清IgA含量和外周淋巴细胞OD570 nm值,以及脾脏指数和法氏囊指数。结果显示,环磷酰胺造模后,可见环磷酰胺抑制对照组抗体滴度持续处于较低的状态,血清IgA含量较低,外周淋巴细胞增殖受抑制,免疫器官指数较低;在免疫后14 d、21 d、28 d和35 d,玉竹多糖调节组和板蓝根多糖调节组血清抗体滴度显著高于免疫抑制对照组(P<0.05);在免疫后21d、35 d,玉竹多糖调节组和板蓝根多糖调节组血清IgA含量、外周淋巴细胞OD570 nm值和免疫器官指数显著高于免疫抑制对照组(P<0.05)。本试验结果表明,玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺造模形成免疫抑制雏鸡免疫系统具有调节功能,可解除免疫抑制,使免疫系统恢复至正常水平,能够提高雏鸡新城疫疫苗抗体滴度、血清IgA含量,增强外周淋巴细胞增殖。 相似文献
17.
An experiment was conducted to investigate the effects of polysaccharide extracts (E) of two mushrooms, Lentinus edodes (LenE) and Tremella fuciformis (TreE), and an herb, Astragalus membranaceus (AstE), on the immune responses of chickens infected with Eimeria tenella. A total of 180 broiler chickens were assigned to nine groups: three groups were fed with each of the extracts (LenE, TreE, and AstE), three groups were fed with the extracts and immunized with live oocyst vaccine (LenE+V, TreE+V, and AstE+V), a group was immunized with the vaccine only, and there were two controls (E. tenella-infected and noninfected groups). The oocyst vaccine was given at 4 days of age, and the extracts (1 g/kg of the diet) were supplemented from 8 to 14 days of age. At 18 days of age, all birds except those in the noninfected group were infected with 9 x 10(4) sporulated oocysts. The results showed that at 7 days postinfection (p.i.), birds fed the extracts without vaccination had lower body weight (BW) gain than those given the vaccine only. However, the extracts in conjunction with the vaccine significantly enhanced BW gain of the infected chickens compared with the vaccine group. Of the three extracts, LenE and TreE showed a better growth-promoting effect. The extracts largely increased oocyst excretion of droppings during the primary response postvaccination. The cecal peak oocyst output and lesion scores measured at 7 days p.i. were higher in the groups fed the extracts than in the group immunized with the vaccine only, whereas those of the groups fed with the extracts and immunized with the vaccine were not significantly different from the vaccine group. Of the three extracts, both LenE- and AstE-fed groups showed lower cecal oocyst output. Thus, as compared with the extracts, the live, attenuated vaccine showed better results with significantly increased immune response in coccidial infected birds. The polysaccharide extracts may prove useful against avian coccidiosis, and, particularly when they are used in conjunction with vaccine, they have shown preliminary promise against the experimental coccidial infection. 相似文献
18.
怀牛膝多糖对雏鸡疫苗免疫效果的影响 总被引：1，自引：1，他引：1
150羽14日龄蛋公鸡随机均分成3组,用新支二联弱毒苗点眼滴鼻免疫的同时,2个试验组分别肌肉注射高、低剂量的怀牛膝多糖溶液,对照组注射生理盐水,每天注射1次,连续注射3次。分别于免疫后第7、14、21、28、35和42天各组随机抽取8只鸡翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制（HI）抗体效价,于免疫后第10、20、30、40和50天每组随机抽取5只鸡心脏采血,分离淋巴细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖的动态变化,流式细胞仪双染色法检测CD^4＋、CD^8＋T淋巴细胞含量,并放血致死称取体重和胸腺、脾脏、法氏囊的质量,计算器官指数。结果表明,怀牛膝多糖高剂量组的HI抗体效价、CD^4＋/CD^8＋比值和免疫器官指数都明显高于对照组,并且高剂量怀牛膝多糖可以显著促进T淋巴细胞增殖。提示怀牛膝多糖对鸡新支二联疫苗的免疫效果有明显的增强作用。 相似文献