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1.
伊氏锥虫抗独特型抗体疫苗的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
用纯化的伊氏锥 虫变异表面糖蛋白（ＶＳＧ）免疫大白鼠制备出抗血清，经饱和硫酸铵盐析，ＤＥ－５２纤维素离子交换层析和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ新和层析提取ＶＳＧ特异性多克隆ＬｇＧ抗体。用Ａｂ１免疫大白鼠和家兔制备出抗独特型血清。ＥＬＩＳＡ抑制试验检测结果表明，８份大白鼠抗独特型血清的抑制率高于２５％。用正常大白鼠ＩｇＧ致敏的醛化绵羊红细胞吸收兔抗独特型血清除去异种抗体，采用Ａｂ１－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ 相似文献
2.
用提纯的Ａｂ２制成免疫制剂，在大白鼠、小白鼠可诱导特异性ＶＳＧ抗体（Ａｂ３）。免疫保护试验结果表明，Ａｂ２制剂免疫动物对攻虫感染具有明显的保护效应。单独用抗独特型抗体免疫的小白鼠、大白鼠、豚鼠对５０条同型锥虫攻击的保护率分别为６０％，６０～８０％，８０％；抗独特型抗体作为“引子”，可使小白鼠获得８０～１００％的保护，对大白鼠和豚鼠的保护率为１００％。单独使用抗独特型抗体免疫的小白鼠对５个数量（２５，５０，１００，２００，４００）锥虫攻击的保护率分别为８０％，６０％，２０％，０％，０％，而作为“引子”免疫小白鼠对５个数量锥虫攻击的保护率分别为１００％，８０％，４０％，２０％，０％。这些结果表明，制备的兔抗独特型抗体（Ａｂ２）含有ＶＳＧ表位的内影像，具有模拟ＶＳＧ的功能，在实验动物体内可诱导主动免疫，因此可作为一种潜在的疫苗制剂为家畜伊氏锥虫病的免疫预防提供一个可能的途径。 相似文献
3.
伊氏锥虫抗独特型抗体疫苗的研究：Ⅲ.伊氏锥虫变异表面糖蛋白抗独特… 总被引：1，自引：0，他引：1
用提纯的Ａｂ２制成免疫制剂，在大白鼠、小白鼠可诱导特异性ＶＳＧ抗体（Ａｂ３）。免疫保护试验结果表明，Ａｂ２制剂免疫动物对攻虫感染具有明显的保护效应。单独用抗独特型抗体免疫的小白鼠、大白鼠、豚鼠对５０条同型锥虫攻击的保护率分别为６０％，６０￣８０％，８０％；抗独特型抗体作为“引子”，可使小白鼠获得８０￣１００％的保护，对大白鼠和豚鼠和保护率为１００％。单独使用抗独特型抗体免疫的小白鼠对５个数量（２５ 相似文献
4.
牛重组型生长激素抗独特型抗体的产生与鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
利用纯化的兔抗牛生长激素抗体ＩｇＧ来免疫３只绵羊以制备抗独特型血清。间接ＥＬＩＳＡ法和琼脂糖双扩散法测定抗血清滴度分别达到或超过１：１２８０００和１：６４以上。之后用硫酸铵沉淀法和亲和层析法纯化抗独特型抗体。采用间接ＥＬＩＳＡ法来研究抗独特型抗体与第一抗体ＩｇＧ成分特异性结合及生长激素与第一抗体中ＩｇＧ结合的影响,结果显示出它不但能ＩｇＧ成分特异性结合。而且能与生长激素竞争性结合第一抗体ＩｇＧ成分 相似文献
5.
猪水泡病病毒抗独特型抗体的研究—Ab2的制备与鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
用猪水泡病病毒中和单抗２Ｂ６和４Ｈ９免疫家兔，制备出ＳＶＤＶ兔抗独特型抗体。经亲和层析纯化，用ＥＬＩＳＡ鉴定性质，结果表明，所制备的Ａｂ２能竞争抑制Ａｂ１与ＳＶＤＶ抗原结合，同时，Ａｂ２与Ａｂ１的结合可被病毒抗原阻断，表明所制备的Ａｂ２具有ＳＶＤＶ抗原内影像关系。 相似文献
6.
抗IBDV独特型抗体疫苗的制备与应用 总被引：1，自引：1，他引：0
应用提取纯化的抗ＩＢＤＶＩｇＧ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ２／０细胞在ＰＥＧ作用下融合，应用ＥＬＩＳＡ法检测筛选，经有限稀释法克隆２次，获得２株（２Ｂ６株，５Ｆ４株）分泌抗ＩＢＤＶ独特型抗体的杂交瘤细胞株，其能诱生ＢＡＬＢ／ｃ小鼠产生高效价的含抗ＩＢＤＶ独特型抗体的腹水。用此独特型抗体分别与福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂按１∶１比例乳化制备成抗ＩＢＤＶ独特型抗体疫苗，免疫接种ＳＰＦ鸡和普通京白公鸡，然后用ＩＢＤＶ野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒，保护率分别为８／８、１４／１４，从而证实抗独特型抗体疫苗有潜在的研究和应用价值。 相似文献
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应用提取纯化的抗ＩＢＤＶ ＩｇＧ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，其脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞在ＰＥＧ作用下融合，应用ＥＬＩＳＡ法检测筛选，经有限稀释法克隆２次，获得了２株（２Ｂ６株、５Ｆ４株）分泌抗ＩＢＤＶ独特型抗体的杂交瘤细胞株，并能诱生Ｂａｌｂ／ｃ小鼠产生高效价的含抗ＩＢＤＶ独型抗体腹水。 相似文献
8.
用抗原免疫构建分泌兔出血症病毒抗独特型抗体的杂交瘤细胞 总被引：3，自引：0，他引：3
用纯化的兔出血症病毒（ｒａｂｂｉｔｈａｅｍｏｒｈａｇｉｃｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ,简称,ＲＨＤＶ）免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠。正如网络学说所指出的,从免疫鼠的杂交瘤细胞克隆中,不仅筛选出能分泌抗ＲＨＤＶ抗体（Ａｂ１）的细胞克隆,同时也筛选出能分泌抗ＲＨＤＶ独特型抗体（ａｎｔｉ－ｉｄｉｏｔｙｐｉｃａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ,Ａｂ２）的杂交瘤细胞,用抗原而不用单克隆抗体（Ａｂ１）免疫,诱导产生抗独特型抗体（Ａｂ２）是一种具有广阔的应用前景的新技术 相似文献
9.
分别用血清中和（ＳＮ）试验和单克隆抗体（ＴＧＥｍＡｂ和ＴＧＥ／ＰＲＣＶｍＡｂ）阻断酶联免疫吸附试验（Ｂ－ＥＬＩＳＡ）对８１头美国进口猪血清作猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）抗体检测。ＳＮ试验检出７份阳性血清，检出率为８．６４％；Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于ＳＮ试验 相似文献
10.
用曼氏血吸虫抗原特异性的保护性单抗Ｄ６多次免疫新西兰大白兔，从１只免疫兔分离得到的免疫血清在ＥＬＩＳＡ试验中对单抗Ｄ６的反应，比对血吸虫的其它两株同亚型抗原特异性单抗Ｎ（１２２）和Ｎ（３４）的反应强，能强烈地抑制单抗Ｄ６识别曼氏血吸虫尾蚴抗原（ＣＡＰ）和虫卵抗原（ＳＥＡ），而不能抑制单抗Ｎ（１２２）和Ｎ（３４）识别ＣＡＰ和ＳＥＡ。多次实验的结果还证明，单抗Ｄ６免疫兔血清不能识别ＣＡＰ和ＳＥＡ，正常兔血清不能抑制单抗Ｄ６识别ＣＡＰ和ＳＥＡ。单抗Ｄ６免疫兔血清经饱和硫酸铵和结合有正常小鼠血清蛋白的免疫亲和层析柱纯化后，其免疫原性不变。这些结果说明，免疫兔血清中含有抗保护性单抗Ｄ６的抗独特型抗体。日后可用它免疫动物，探索抗独特型抗体疫苗在血吸虫病免疫预防上的应用价值。 相似文献
11.
抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立 总被引：6，自引：1，他引：5
将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）组织毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ，病毒中和试验检测分泌抗体，获得了６株稳定分泌抗ＩＢＤＶ单隆抗体的杂交瘤细胞，命名为ＮＩＢ－１，ＮＩＢ－２，ＮＩＢ－３，ＮＩＢ－４，ＮＩＢ－５，ＮＩＢ－６；６株ＭＣＡｂ均具ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，亚类鉴定表明，前４株属于ＩｇＧ２ａ，后２株属于ＩｇＧ１。杂交瘤细胞冻存６个月后复苏，均 相似文献
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用抗传染性氏囊病毒单克隆抗体建立夹心阻断ELISA检测鸡血清抗体及 … 总被引：1，自引：0，他引：1
朱红 《动物科学与动物医学》2000,17(5):51-52
用酶标记抗传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体，建立夹心阻断ＥＬＩＳＡ，检测ＩＢＤＶ鸡血清抗体。用Ｄ７８细胞毒免疫２４日龄的雏鸡，每周采血一次，共４次，用夹心阻断ＥＬＩＳＡ、微量细胞中和试验（ＶＮ）、琼脂扩散试验（ＮＧＰ）检测鸡血清抗体，结果表明：夹心阻断ＥＬＩＳＡ同ＶＮ之间具有较高的相关性（ｒ＝０．８１２６），与ＡＧＰ的相关性较低（ｒ＝０Ｘ．７５７５）。 相似文献
13.
间接酶联免疫吸附试验检测禽流感抗体的最佳工作条件 总被引：2，自引：0，他引：2
禽流感病毒（ＡＩＶ）感染的鸡胚尿囊液经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯ＡＩＶ,纯化的ＡＩＶ经ＮＰ４０处理并反复冻融,即为ＡＩＥＬＩＳＡ抗原,用该抗原包被聚苯乙烯微量反应板。将健康鸡ＩｇＧ提纯后免疫兔,制备兔抗鸡ＩｇＧ,用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡ＩｇＧ。确立了间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测禽流感抗体的最适工作条件,即：抗原包被浓度１．９～３．８μｇ／ｍｌ,每孔１００μｌ,４℃冰箱过夜;用含０．５％牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的磷酸盐缓冲液,３７℃封闭６０分钟;待检血清最佳稀释度为１８０～１６４０,作用６０分钟;酶标抗体作１２０００稀释,作用６０分钟。根据对５２份ＳＰＦ鸡血清的检测结果制定了判定标准。 相似文献
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用ELISA和PCR对猪,牛血清中HBV抗原,抗体及DNA的检测 总被引：4，自引：0，他引：4
用三个家生产的乙型肝炎（ＨＢ）ＥＬＩＳＡ试剂盒及聚合酶反应（ＰＣＲ）对牛、猪和羊血清分别进行了乙型肝炎病毒抗原（ＨＢＶ－Ａｇ）、抗体（Ａｎｔｉ－ＨＢＶ－Ａｂ）及ＤＮＡ的检测。ＥＬＩＳＡ共检出阳性牛血清１３份（１３／１３６），其中ＨＢ４Ａｇ阳性８份，ＨＢｅＡｇ阳性５份；阳性猪血清４份（４／３６），其中有ＨＢｅＡｇ阳性３份，ＨＢｅＡｇ阳性１份。全部阳性血清和部分阴性血清共１２０份经用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤ 相似文献
15.
以提纯鸡ＩｇＧ做抗原免疫Ｂａｌｌ／ｃ小鼠，取鼠细胞在ＰＥＧ１０００作用下与小鼠骨髓细胞（Ｓｐ２／ｏＡｇ１４）融合，采用间接免疫荧光（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测上清抗体，阳性孔经有限稀法进行细胞克隆，共获得了７株分泌抗鸡ＩｇＧ单克隆抗体的杂交瘤细胞（２Ｈ８、４Ｄ８、４Ｄ８、１Ｂ７、２Ａ７、２Ｂ３、１Ｇ１２、３Ｄ１２）将这些细胞分别接种间系小鼠制备出腹水抗体，ＥＬＩＳＡ效价可达１０＾ 相似文献
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用ＣＥＡＥ ＤＥ－５２分离纯化的锥虫，经超声波粉碎后离心，上清经硫酸铵沉淀，再经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２００分子筛层析，ＤＥＡＥ Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ＥＤ－５２离子交换层析，２’，‘ＡＤＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ层析得到纯化。筛选到抗蠕虫药奥芬哒唑（Ｏｘｆｅｎｄａｚｏｌｅ）对ＴＲ有抑制作用。但对治疗锥虫病没有作用；兔抗ＴＲ抗体与安锥赛共同注射人工感染锥虫病的小白鼠，可增加安锥赛对锥虫病的疗效。 相似文献
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以纯化的兔出血症病毒免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，应用杂交瘤技术获得了分泌抗ＲＨＤＶ单抗杂交瘤细胞１７株，其中有３株杂交瘤细胞分泌单抗的ＥＬＩＳＡ效价为１：４０９６００，１：４０９６；５株单抗具有血凝抑制活性。兔抗ＲＨＤＶ高兔血清对１７株ＭｃＡｂ的ＥＬＩＳＡ抑株为ＩｇＧ２ｂ。各株ＭｃＡｂ与欧洲棕色兔病病毒无抗原交叉反应，也无沉淀反应特性。 相似文献
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用三个厂家生产的乙型肝炎（ＨＢ）ＥＬＩＳＡ试剂盒及聚合酶链反应（ＰＣＲ）对牛、猪和羊血清分别进行了乙型肝炎病毒抗原（ＨＢＶ－Ａｇ）、抗体（Ａｎｔｉ－ＨＢＶ－Ａｂ）及ＤＮＡ的检测。ＥＬＩＳＡ共检出阳性牛血清１３份（１３／１３６），其中ＨＢ＿ｓＡｇ阳性８份，ＨＢ＿ｅＡｇ阳性５份；阳性猪血清４份（４／３６），其中有ＨＢ＿ｓＡｇ阳性３份，ＨＢｅＡｇ阳性１份。全部阳性血清和部分阴性血清共１２０份经用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ均为阴性，未扩增出特异性ＤＮＡ片段。此结果初步表明，无论家畜血清中有无ＨＢＶ－Ａｇ，均无感染性ＨＢＶ粒子存在，因此没有足够的证据担心家畜会在ＨＢＶ的传播上对人类构成威胁。 相似文献
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高纯度鸡IgA的制备与鉴定 总被引：5，自引：0，他引：5
本试验应用乙醇（ＰＥＧ）粗提后，ＤＥＡＥ纤维素离子交换，Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ凝胶过滤层析方法，从鸡胆汁分离提取ＩｇＡ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳表明可达电泳纯。 相似文献
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分泌抗鸡Ig单抗杂交瘤细胞系的建立与单抗生物学特性的鉴定 总被引：7，自引：0，他引：7
从传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞系１Ｄ１０、１Ｇ１中得到了３株能稳定分泌抗鸡免疫球蛋白（Ｉｇ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６。其抗体类和亚类均属ＩｇＧ２ｂ，腹水的ＥＬＩＳＡ效价≥１∶２５６００，琼扩效价为１∶８～１∶１６。３株ＭｃＡｂ能与鸡血清中的Ｉｇ出现沉淀反应，琼扩在２４ｈ以内出现清晰的沉淀线，而不能和鸭、鸽、鹌鹑等禽类及异种动物血清出现沉淀线。纯化的鸡ＩｇＧ、ＩｇＭ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后，分别用纯化并经辣根过氧化物酶（ＨＰＲ）标记的１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６单抗酶结合物进行免疫印迹试验证明，３株单抗识别的均为ＩｇＧ、ＩｇＭ分子的轻链 相似文献