亚洲璃眼蜱唾液腺一新功能基因的克隆与测序   总被引：1，自引：0，他引：1  

程天印  周金林  施启顺  周勇志  林矫矫 《畜牧与兽医》2005,37(5):4-6

HaB1是亚洲璃眼蜱雌成蜱唾液腺差异表达基因文库中的一个片段,根据其序列设计引物HaB1-GSP1和HaB1-GSP2,以唾液腺总RNA为模板,RACE法扩增获得HaB1的未知3′-末端。测定该末端序列,进行序列拼接,设计全长引物5-′CCAGTCCGAAGGAAGGGCG-3′和5-′TCTC-CGGGCACGTGAAGTGTC-3′。以cDNA第一链为模板,扩增获得基因全长。经核查表明,该基因为一新基因(登录号AY803896)。  相似文献   

亚洲璃眼蜱唾液腺一新基因(GP29)的原核表达及产物鉴定     

程天印  周金林  周勇志  施启顺  林矫矫 《畜牧兽医学报》2006,37(11):1194-1197

将吸血诱导的亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP29的开放性阅读框插入pGEX-4T-1,转化BL21,表达出一相对质量为53 ku的蛋白,其大小与预计结果一致。蛋白质的肽质量图谱和“1381.7511”肽段序列两方面的结果证明,SDS-PAGE胶板上相对质量为53 ku的蛋白就是由目的基因表达的GST融合蛋白。该蛋白与SwissPROT库中的任何蛋白均有较大差别,可能是一个新功能分子。  相似文献   

抗原表位及其在血吸虫疫苗研究中的应用     

章登吉  彭运潮  林矫矫 《中国兽医寄生虫病》2006,14(2):34-39

血吸虫病是世界上危害最严重的寄生虫病之一，其疫苗的研究是世界血吸虫病防治的一项工作重点也是一大难题。抗原表位是疫苗设计和免疫识别的基础，本文对抗原表位在疫苗设计中的分子理论基础做了阐述．介绍了其在血吸虫疫苗设计中的应用，并提出了一些问题与展望。  相似文献   

东方田鼠肝脏裂解物筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库     

孙焕  LIU Jin-ming  孙帅  SONG Zhen-yu  石耀军  LU Ke  李浩  JIN Ya-mei  林矫矫 《中国预防兽医学报》2008,30(8)

东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为寻找东方田鼠抗血吸虫抗性相关靶基因，探索其分子机理，我们将日本血吸虫童虫与东方田鼠不同组织／器官裂解物共培养，比较它们对血吸虫童虫的杀伤效果，之后，以杀伤效果较好的肝脏裂解物为探针，以亲和淘洗方法筛选日本血吸虫成虫（44d）噬菌体展示cDNA文库。经三轮筛选后，随机挑取92个噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析，获得了19个有效EST序列，其中15条EST序列与已知基因或表达序列标签同源，4个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性，为新的表达序列标签。对19个有效EST编码蛋白的功能预测结果显示，其中6个为卵壳蛋白（Eggshell protein）相关基因，10个EST及其编码蛋白的功能与血吸虫基因表达调控及蛋白质加工修饰相关。研究结果提示，东方田鼠直接或间接地影响血吸虫基因表达，进而影响血吸虫的发育，可能是东方田鼠具有抗血吸虫特性的一个重要分子机理。  相似文献   

日本血吸虫四跨膜孤儿受体(TOR)克隆及其第一个膜外区基因的表达     

马帅  韩艳辉  洪炀  张旻  曹晓丹  韩倩  刘艳涛  陆看  马茜茜  陆珂  贾秉光  林矫矫  傅志强 《中国动物传染病学报》2014,(6):46-52

埃及血吸虫和曼氏血吸虫四跨膜孤儿受体(trispanning orphan receptors,TOR)受体可以结合补体C2a,可能在血吸虫免疫逃避过程中起重要作用。为研究日本血吸虫TOR受体的特性和功能,利用PCR扩增到Sj TOR基因并进行了生物信息学分析;同时克隆了Sj TOR基因N端第一个膜外区(ed1)基因,构建了重组质粒p ET-28a-Sj TOR-ed1,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达后用组蛋白亲和层析纯化获得重组蛋白Sj TOR-ed1,Western blot结果显示r Sj TOR-ed1能被日本血吸虫阳性小鼠血清识别。该研究为进一步开展研究日本血吸虫TOR受体的功能提供了基础。  相似文献   

抗日本血吸虫单克隆抗体的建立及特性测定   总被引：3，自引：1，他引：3  

林矫矫  叶萍 《中国农业科学》1994,27(6):78-84

 用感染日本血吸虫尾蚴的小鼠脾脏，制备单克隆抗体（McAb），获得24株抗日本血吸虫单抗，选择12株进行Ig亚型测定，对血吸虫抗原敏感性和特异性的测定，组织定位，免疫印迹，体外ADCC对血吸虫童虫的杀伤效应和体内被动免疫转移试验等方面的研究。其中一株IgM单抗在Balb/c小鼠体内诱导了38.41%的减虫率；另一株IgG#-1单抗在昆明系小鼠体内诱导了32.23%的减虫率，并观察到有抑制宿主肝脏肉芽肿形成的现象。  相似文献   

日本血吸虫谷胱甘肽S－转移酶小鼠免疫试验     

林矫矫  田锷  叶萍  傅志强  施福恢  石躍军  达陈永军  林邦发  钱承贵  张正达 《中国兽医寄生虫病》1996,(1)

用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析柱纯化中国大陆株日本血吸虫成虫谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）。把纯化的ＧＳＴ结合福氏性剂免疫了二批达ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，获得了２９．５８～３２．７１％的减虫率和５２．９４～６８．１３％的粪便减卵率。ＥＬＩＳＡ试验表明免疫小鼠产生了体液免疫应答，免疫印迹试验（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ）显示日本血吸虫水溶性成虫抗原和ＧＳＴ抗原的２６、２８ｋＤ蛋白被免疫小鼠血清所识别。  相似文献   

血吸虫的抗原伪装研究进展     

刘金明傅志强  林矫矫蔡幼民 《中国兽医寄生虫病》2005,13(4):36-40

抗原伪装是包括寄生虫在内的病原体的一种逃避宿主免疫反应方式.血吸虫在宿主间的转移实验证明了血吸虫具有抗原伪装现象.在血吸虫生活史的主要阶段均发现了许多与宿主相同的抗原以及众多的免疫抑制物质.这些物质有些是血吸虫自身表达的,有些是血吸虫结合的宿主抗原.它们通过掩盖血吸虫抗原等多种机理伪装血吸虫进而使血吸虫逃避宿主的免疫攻击.  相似文献   

日本血吸虫童虫冷冻保藏复苏后生活史循环的研究     

林邦发汪英华  田锷朱顺海  石耀军张正达施福恢  林矫矫 《中国兽医寄生虫病》1994,2(1):1-5

本文报告了日本血吸虫童虫经液氮冻藏复苏后的生活史循环的情况。童虫冻藏３６天和５０天后腹腔注射感染小鼠，亲代成虫回收率为９．０和８．９％。感染鼠肝内的子代虫卵孵出的子１代毛蚴感染钉螺，感染率为５９和６７％；平均每个钉螺第１次逸出的子１代尾蚴数为８００～９００条。子１代尾蚴感染小鼠后，其子１代成虫回收率为５５和５６％。合抱雌、雄成虫的体长、性腺的发育和虫体对宿主的致病力与正常途径感染者无明显差异。  相似文献   

pVAX1/SjTSP2 DNA疫苗免疫预防小鼠日本血吸虫病的效果评估     

曹燕  赵彬  韩艳辉  艾德宙  张娟  石耀军  洪炀  陆珂  李浩  林矫矫  傅志强 《中国动物传染病学报》2012,(2):53-58

为评估SjTSP2分子作为日本血吸虫DNA疫苗候选抗原分子的潜力,本实验扩增了编码该分子的DNA片段,构建了重组真核质粒pVAX1/SjTSP2,检测其在哺乳动物细胞中表达情况后,通过基因枪轰击法免疫小鼠,应用ELISA、流式细胞术等检测重组质粒诱导的免疫反应,计算减虫减卵率,评估对小鼠日本血吸虫病的免疫保护效果。间接免疫荧光试验结果显示该质粒能在293T细胞中表达。质粒免疫小鼠诱导了显著升高的特异性IgG抗体和IFN-γ、IL-4等细胞因子。小鼠免疫保护试验结果表明,免疫组小鼠虫荷数较PBS对照组增加12.4%(P=0.368),但肝组织虫卵减少10.01%(P=0.486)。说明制备的DNA疫苗能刺激小鼠产生较强的免疫反应,但诱导的免疫保护作用并不理想,为血吸虫DNA疫苗研究提供了参考数据。  相似文献