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1.
观察不同剂量纳米氧化铈颗粒染毒后对大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量的影响及大鼠肺组织GRP78蛋白表达情况,探讨其导致肺损伤的作用机制。将粒径为35nm±3nm的纳米氧化铈颗粒悬液以不同剂量(100mg/kg、400mg/kg)给大鼠气管滴注,染毒28d后,测定大鼠血清中SOD活力、MDA含量及肺组织GRP78蛋白表达情况。与对照组相比,高低剂量纳米氧化铈染毒组大鼠血清中SOD活力及MDA含量均无明显改变(P0.05),GRP78蛋白表达均显著增高(P0.05)。纳米氧化铈染毒大鼠所致肺损伤与内质网应激有关,与氧化应激的关系有待进一步研究。 相似文献
2.
《中国畜牧兽医》2018,(12)
本研究旨在克隆猪葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)基因,并进行生物信息学分析,探讨其在猪不同组织中的表达情况。根据GenBank上公布的猪GRP78基因序列(登录号:XM_001927795.6)设计引物,PCR扩增及测序获得猪GRP78基因CDS序列,使用在线软件分析GRP78的理化性质、跨膜结构、信号肽、疏水性、保守结构域、二级结构和三级结构,并进行同源性比对及系统进化树构建,利用实时荧光定量PCR方法检测猪GRP78基因在各组织中的表达情况。结果显示,猪GRP78基因CDS区长1 965bp,可编码654个氨基酸。生物信息学分析表明,GRP78理论分子质量为72.3ku,等电点(pI)为5.06,半衰期为30h,其水溶液在280nm处的消光系数为30 495,肽链N端为蛋氨酸(Met),不稳定系数为32.39,属于稳定蛋白。脂肪系数为85.40,总平均疏水指数为-0.496,无跨膜结构,存在信号肽序列,说明该蛋白属于分泌型蛋白;GRP78蛋白只包含1个超家族保守结构域:HSP70结构域。蛋白二级结构分析显示,GRP78蛋白中α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲分别为40.06%、20.49%、8.10%和31.35%。同源性比对结果显示,猪GRP78基因与人(登录号:NM_005347.4)、小鼠(登录号:NM_001163434.1)、大鼠(登录号:NM_013083.2)、山羊(登录号:XM_005687138.3)、牛(登录号:NM_001075148.1)核苷酸序列的同源性分别为93%、91%、90%、95%、95%,氨基酸序列的同源性分别为99%、98%、98%、99%、99%,各个物种之间GRP78基因保守性较高。实时荧光定量PCR结果显示,GRP78基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、胃、卵巢、输卵管、乳腺、小脑、大脑、垂体等组织中均有表达,在心脏、脾脏、肺脏中相对高表达。本研究结果为今后深入研究GRP78基因的生物学功能提供了基础材料。 相似文献
3.
本研究旨在克隆猪葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78，GRP78）基因，并进行生物信息学分析，探讨其在猪不同组织中的表达情况。根据GenBank上公布的猪GRP78基因序列（登录号：XM_001927795.6）设计引物，PCR扩增及测序获得猪GRP78基因CDS序列，使用在线软件分析GRP78的理化性质、跨膜结构、信号肽、疏水性、保守结构域、二级结构和三级结构，并进行同源性比对及系统进化树构建，利用实时荧光定量PCR方法检测猪GRP78基因在各组织中的表达情况。结果显示，猪GRP78基因CDS区长1 965 bp，可编码654个氨基酸。生物信息学分析表明，GRP78理论分子质量为72.3 ku，等电点（pI）为5.06，半衰期为30 h，其水溶液在280 nm处的消光系数为30 495，肽链N端为蛋氨酸（Met），不稳定系数为32.39，属于稳定蛋白。脂肪系数为85.40，总平均疏水指数为-0.496，无跨膜结构，存在信号肽序列，说明该蛋白属于分泌型蛋白；GRP78蛋白只包含1个超家族保守结构域：HSP70结构域。蛋白二级结构分析显示，GRP78蛋白中α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲分别为40.06%、20.49%、8.10%和31.35%。同源性比对结果显示，猪GRP78基因与人（登录号：NM_005347.4）、小鼠（登录号：NM_001163434.1）、大鼠（登录号：NM_013083.2）、山羊（登录号：XM_005687138.3）、牛（登录号：NM_001075148.1）核苷酸序列的同源性分别为93%、91%、90%、95%、95%，氨基酸序列的同源性分别为99%、98%、98%、99%、99%，各个物种之间GRP78基因保守性较高。实时荧光定量PCR结果显示，GRP78基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、胃、卵巢、输卵管、乳腺、小脑、大脑、垂体等组织中均有表达，在心脏、脾脏、肺脏中相对高表达。本研究结果为今后深入研究GRP78基因的生物学功能提供了基础材料。 相似文献
4.
为了研发新型兽用纳米注射液,发挥中药独特优势,采用双提法提取中草药得到挥发油与水溶性药液,将挥发油以纳米胶束的形式增溶于水溶性药液中,再经精制、灌装、灭菌等步骤制备成“复方草连”纳米注射液。挥发油纳米胶束的外观为圆球形,粒径为100＋12nm,表面Zet。电位为～83．2±0．8mV;样品于40±2℃条件下放置,其第6个月与0个月的气相色谱图基本一致,表明纳米胶束对于挥发油具有良好的稳定作用。初步结果表明“复方草连”纳米注射液与安乃近注射液均能降低患猪的体温,二者之间无显著性差异（P〉0．05）,但“复方草连”纳米注射液组患猪的外周血液T细胞亚群CD3＋、CD4＋含量（28．59±5．53％）高于安乃近组（18．43±4．18％）．二者之间有显著差异（P〈0．05）。 相似文献
5.
研究阿替美唑对小型猪特异性麻醉剂(XFM)麻醉下大鼠大脑皮质c-jun蛋白表达的影响,探讨阿替美唑颉颃XFM催醒大鼠与脑皮质c-jun基因的关系.将78只SD纯种大鼠随机分为XFM对照组、XFM+阿替美唑组、XFM+生理盐水组.采用蛋白质印迹法检测大脑皮质内c-jun蛋白表达量.结果表明,XFM麻醉大鼠大脑皮质内c-jun蛋白表达量逐渐增加,与给药前0 min比较差异显著(P＜0.01或P＜0.05);XFM麻醉大鼠腹腔注射生理盐水,各时间点c-jun蛋白表达与对照组间比较无显著差异(P＞0.05);阿替美唑注射后引起XFM麻醉大鼠大脑皮质c-jun蛋白表达减少,与XFM对照组比较差异显著(P＜0.01或P＜0.05).结果提示,大脑皮质c-jun基因参与了阿替美唑颉颃XFM麻醉作用.阿替关唑抑制XFM诱导大鼠大脑皮质c-jun蛋白表达,可能是阿替美唑催醒XFM麻醉大鼠的重要机理之一. 相似文献
6.
为探讨银杏叶提取物（EGb）对去卵巢大鼠神经细胞的保护作用及其机制，采用免疫组织化学SP法检测了假手术大鼠、去卵巢大鼠和去卵巢后用EGb治疗大鼠的大脑皮质中凋亡相关蛋白Bcl～2和Bax的表达量。结果，与假手术大鼠相比，摘除双侧卵巢的大鼠大脑皮质中Bcl-2阳性细胞的数目和表达强度极显著下降（P〈0．01），Bax阳性细胞的数目和表达强度极显著增加（P〈0．01）；用EGb对摘除双侧卵巢的大鼠治疗后，其Bcl-2阳性细胞的表达强度极显著增加（P〈0．01），而Bax阳性细胞的数目极显著下降（P〈0．01），Bax阳性细胞的表达强度也显著下降（P〈0．05）。结果表明，摘除双侧卵巢后大鼠因缺乏内源性雌激素而导致大脑皮质中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达量发生了改变，而EGb能通过上调Bcl-2和下调Bax蛋白的表达对神经细胞起保护作用。 相似文献
7.
10周龄SD大鼠单剂量腹腔注射5mg／kg玉米赤霉烯酮玉米油溶液，分别于3、6、12、24、48h时剖杀取卵巢组织，检测不同时间卵巢组织Bax和Bcl-2的表达。结果显示，病理组织学观察发现卵巢组织出现不同程度损伤，卵泡颗粒细胞发生凋亡。免疫组化SP法试验组与对照组卵巢组织中均有Bax和Bcl-2的表达，并且随着时间的推进呈现动态变化。Bax在3、6、12h时表达量上调，表达量与对照组比较差异显著（P〈0．05），24、48h时表达量下降，与对照组比较差异不显著（P〉O．05）。3～48h卵巢组织中Bcl-2表达量与对照组比较差异不显著（P〉0．05）。结果表明，大鼠玉米赤霉烯酮中毒可引起卵巢组织的病变及颗粒细胞凋亡，且Bax在玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢颗粒细胞凋亡中起着重要作用，Bcl-2的作用不明显。 相似文献
8.
果寡糖对肉鸡生长、肠道菌群和肠形态的影响 总被引：20，自引：0，他引：20
研究了饲粮中分别添加0、2000、4000、6000mg/kg果寡糖对艾维菌商品代肉鸡生长性能、肠道菌群和肠形态的影响。结果表明：目粮中添加4000mg/kg果寡糖使肉鸡日增重提高了9．53％（P＜0．01），2000、4000mg/kg果寡糖使料重比分别降低了5．09％（P＜0．05）和7．87％（P＜0．05）；4000mg/kg果寡糖使盲肠中双歧杆菌和总厌氧菌数分别增加了257．65％（P＜0．05）和100．00％（P＜0．05），使梭菌数下降了79．36％（P＜0．05）；2000、4000mg/kg果寡糖使盲肠中乳酸杆菌数分别增加了45．73％（P＜0．05）和67．97％（P＜0．01），使大肠杆菌数分别下降了75．71％（P＜0．05）和71．35％（P＜0．05）；4000和6000mg/kg果寡糖使盲肠中乙酸、丁酸和总短链脂肪酸含量分别提高了23．25％（P＜0．05）和26．08％（P＜0．05）、144．36％（P＜0．05）和202．97％（P＜0．01）、47．08％（P＜0．01）和58．31％（P＜0．01）；2000、4000和6000mg/kg果寡糖使盲肠中丙酸含量分别提高了45．27％（P＜0．05）、73．22％（P＜0．01）和89．37（P＜0．01）；4000、6000mg/kg果寡糖使盲肠上皮黏膜腺窝深度和细胞密度分别提高了22．62％（P＜0．05）和25．72％（P＜0．01）、19．28％（P＜0．05）和23．07％（P＜0．05）。 相似文献
9.
在高产奶牛日粮中添加13克高活性康贝试验组的产奶量比对照组提高1．78千克（P＜0．05），当添加量达到20克时，增加达2．74千克（P＜0．05），乳胆量也显著比对照组高9．88％（P＜0．05），而且牛奶中的体细胞数也显著低于13克组和对照组（P＜0．05）。大群饲喂20克康贝的生产试验也获得了相似的结果。 相似文献
10.
11.
《中国兽医学报》2020,(5)
探讨高铜对肉鸡心肌氧化损伤和内质网应激的影响,将48羽1日龄白羽肉鸡随机平均分为4组,分别饲喂对照日粮(Cu 11 mg/kg,对照组)和高铜日粮(Cu 110 mg/kg,高铜I组;Cu 220 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 330 mg/kg,高铜Ⅲ组)。49日龄时进行心脏采集,制备切片观察心脏组织病理学变化,检测心肌总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽还原酶(GR)活性及丙二醛(MDA)含量的变化,实时荧光定量PCR检测内质网应激相关基因GRP78、GRP94、eIF2α、ATF6、XBP1、CHOP的mRNA转录水平,Western blot检测GRP78蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,高铜组心肌纤维间隙增宽;随着日粮中铜含量的增加,心脏组织中T-AOC、SOD、CAT和GR活力下降,MDA含量显著升高(P0.05),GRP78、GRP94、eIF2α、ATF6、XBP1和CHOP mRNA表达量升高,GRP78蛋白表达显著上调(P0.05)。结果表明,高铜可以诱导心肌氧化损伤和内质网应激。 相似文献
12.
通过添加不同浓度K_2CO_3(1．5％、2．0％、3．0％)调制苜蓿干草,对苜蓿干燥速度及主要营养物质含量变化的规律进行了研究。结果表明,添加K_2CO_3可以显著缩短苜蓿干燥时间;三种不同浓度K_2CO_3添加处理调制的苜蓿干草粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)和钙(Ca)的含量均显著高于常规调制的苜蓿干草(P＜0．05),而中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量显著低于常规调制的苜蓿干草(P＜0．05)。添加浓度为2．0％和1．5％K_2CO_3的苜蓿干草CP含量均显著高于3．0％添加组(P＜0．05);2．0％与3．0％K_2CO_3添加组苜蓿较1．5％K_2CO_3添加组EE含量有显著提高(P＜0．05);就NDF指标,1．5％K_2CO_3处理的苜蓿最高(50．89％±0．28％),比2．0％和3．0％K_2CO_3处理的苜蓿NDF分别高出1．72％和1．29％(P＜0．05);就ADF指标,3．0％K_2CO_3处理的苜蓿最高(36．37％±0．27％),比1．5％和2．0％K_2CO_3处理的苜蓿ADF分别高出0．93％和1．45％(P＜0．05);Ca含量以1．5％K_2C_3处理组苜蓿为最高(1．63±0．01％),比2．0％和3．0％K_2CO_3处理的苜蓿分别高出0．08％和0．20 (P＜0．05);P的含量在3个不同处理间差异不显著(P＞0．05)。 相似文献
13.
本试验对二花脸仔猪生后三天内胃肠道及胰腺的生长模式进行了研究。结果表明，生后第一天，胃重及胃重体重比分别增加33％（P＜0．01）和32％（P＜0．01）；小肠长度增加19％（P＜0．01），重量增加35％（P＜0．01），主要是由于粘膜增量77％（P＜0.01）。此后至第三天，胃增重32％（P＜0.01），胃重体重比仅增加8％（P＞0．05）；小肠长度增加28％（P＜0．01），但重量变化不大（P＞0．05）。生后三天内，结肠长度、总重、粘膜重和非粘膜重分别增加28％（P＜0．05）、65％（P＜0.01）、95％（P＜0.01）和59％（P＜0．01）；胰腺的绝对重量及其相对于体重的重量持续显著增加。 相似文献
14.
中药制剂抗肉鸡热应激作用机理研究 总被引：1，自引：1，他引：0
将50只1日龄AA肉仔鸡饲养（高温条件下饲养）于MFD-233型人工气候室内,随机分成对照组和试验组,试验组肉仔鸡7日龄时在日粮中添加0．1％的中药,连用7d;然后分别于14,21日龄取法氏囊,用流式细胞仪检测应激状态下法氏囊细胞凋亡率和细胞周期时相变化,用Western—blot方法检测法氏囊中Bcl-2和caspase-3基因蛋白表达水平。试验结果表明：试验组肉仔鸡14,21日龄法氏囊细胞凋亡率明显低于对照组,差异显著（P〈0．05）;细胞周期时相发生变化,G1期细胞数量明显减少（P〈0．05）,G2期细胞数量明显增加（P〈0．05）,S期细胞数量变化不大（P〉0．05）;试验组肉仔鸡法氏囊中Bcl-2蛋白表达量高于对照组且差异显著（P〈0．05）,而caspase-3基因蛋白表达水平与Bcl-2相反,对照组表达量明显高于试验组且差异显著（P〈0．05）。这表明中药制剂对缓解热应激造成的法氏囊细胞凋亡作用可能是通过上调Bcl-2和下调caspase-3基因蛋白表达水平来完成的。 相似文献
15.
《中国兽医学报》2019,(5):962-966
为探究NFκB-Orai1是否参与游离脂肪酸(NEFA)诱导的内质网应激,首先通过体外添加一定浓度的非酯化脂肪酸(nonestesterifiedfatty acid,NEFAs)(1.2 mmol/L)处理大鼠肝细胞不同时间,运用Western blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,测定NEFAs对内质网应激(ER stress)标志分子GRP78表达量以及钙通道相关蛋白Orai1表达水平的影响。结果显示NEFAs处理12 h时GRP78、Orai1表达量极显著高于对照组(P0.01),证明12 h NEFAs刺激诱导产生内质网应激效果最佳。而后又通过分别添加NFκB抑制剂wogonin与Orai1抑制剂2APB,结果显示抑制NFκB和Orai1后NEFAs刺激可明显降低GRP78、NFκB p65、Orai1的表达水平。结果表明NFκB-Orai1参与NEFA诱导的内质网应激。 相似文献
16.
不同形式三价铬对肥育猪胴体组成和脂肪代谢的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
选择96头体质量约65kg的杜长大三元杂交猪,研究不同三价铬源对肥育猪胴体组成和脂肪代谢的影响。试验猪分成4组,每组3个重复。1组为对照组,饲喂基础饲粮,其余3组为试验组,分别饲喂基础饲粮添加来源于氯化铬、吡啶羧酸铬、纳米铬的含200μg·kg^-1铬试验饲粮,试验期40d。结果表明,与对照组相比,纳米铬提高了猪日增质量和饲料转化效率（P〈0．05）;增加了胴体瘦肉率和眼肌面积（P〈0．05）,降低了脂肪率和背膘厚（P〈0．05）。吡啶羧酸铬对胴体脂肪率和眼肌面积也有显著影响（P〈0．05）。纳米铬和吡啶羧酸铬提高了皮下脂肪组织激素敏感脂酶话性、血清总蛋白和游离脂肪酸水平（P〈0．05）,降低了血清葡萄糖和胰岛素水平（P〈0．05）。纳米铬还降低了尿素氮、甘油三酯和胆固醇含量（P〈0．05）,提高了血清高密度脂蛋白、胰岛素样生长因子Ⅰ水平及脂肪酶活性（P〈0．05）。结果提示,三价纳米铬对猪生长和胴体组成的效果优于常规铬源,对机体脂肪代谢有明品的调榨作用。 相似文献
17.
应用组织化学和免疫组织化学方法对正常及攻毒不同时相组大鼠肾组织肥大细胞的数量、活性、分布范型、组织化学性质的动态变化及P物质的表达水平进行了研究。结果显示，攻毒后第6h炎性细胞开始浸染肾小管基膜、肾小囊壁层及肾小球，12h后浸染程度开始减少，第24h出现最低值，而后又开始增多，至第72h浸染达到高峰。且此间质内血管出现轻微的裂隙。同时不同时相肾组织的肥大细胞及其脱颗粒数量和P物质的表达水平均与炎性细胞浸染变化相吻合，攻毒后第6、12、48、72h的炎性细胞、肥大细胞及其脱颗粒数量均显著高于攻毒前（P〈0．05），且在攻毒后第72h均达到最高值；P物质的表达与肥大细胞相关联。证实，肥大细胞和P物质参与了乳腺炎所致肾组织损伤与肾功能衰竭的病理过程。 相似文献
18.
本文旨在建立胰脂肪酶实时荧光定量PCR检测方法的基础上研究纳米氧化铈对蛋鸡胰脂肪酶活性及基因表达的影响.试验选择26周龄健康商品蛋鸡384只,随机分为4组,每组8个重复,每个重复12只鸡.以玉米-豆粕型饲粮为基础饲粮,在基础饲粮中分别添加0(Ⅰ组)、30(Ⅱ组)、60(Ⅲ组)和90 mg/kg(Ⅳ组)的纳米氧化铈,试验期7周.结果表明:1)本试验建立的胰脂肪酶实时荧光定量PCR检测方法具有线性关系好,特异性、敏感性、重复性高等特点,可用于检测胰脂肪酶mRNA表达水平;2)Ⅲ组胰脂肪酶活性显著或极显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P ＜0.05或P＜0.01),胰脂肪酶mRNA表达水平显著高于其他各组(P＜0.05).由此得出,饲粮中添加60 mg/kg纳米氧化铈可显著提高蛋鸡胰脂肪酶活性,上调胰脂肪酶mRNA表达水平. 相似文献
19.
不同有机物进食量和外流速度对瘤胃发酵及微生物蛋白合成效率的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
采用2×2随机因子试验设计研究持续动态瘤胃模拟装置(RSI-Ⅱ)不同有机物进食量(OMI)(27．67g、36．74g、46．00g)和瘤胃外流速度(0．02/h、0．035/h、0．05/h)对稻草-玉米-豆粕型日粮瘤胃发酵及微生物蛋白合成效率的影响。结果表明,RSI内pH值不受有机物进食量和外流速度的影响;在低外流速度下各OMI组瘤胃内0～72h干物质、有机物、粗蛋白、NDF、ADF降解率均高于高外流速度(P＜0．05)。随着OMI的增加,同一外流速度下日粮可发酵有机物产生VFA量(TVFA/FOM,mmol/g)逐渐下降(P＜0．05);相同OMI组饲料降解氮转化为微生物氮的效率在外流速度为0．02h时显著高于高外流速度(P＜0．05)。 相似文献
20.
旨在使用原核表达系统表达幽门螺杆菌铁蛋白Ferritin,获得具有天然纳米结构的铁蛋白纳米颗粒,从而通过表面修饰等方法应用于疾病治疗和抗原呈递等研究。将铁蛋白氨基酸序列按照大肠杆菌常用密码子进行优化,合成重组铁蛋白基因并克隆至原核表达载体。使用镍柱进行亲和层析纯化重组蛋白,并在透析复性后利用透射电子显微镜对体外自组装纳米颗粒进行鉴定。结果显示,本研究成功构建了pET-32a-Ferritin原核表达载体,并使用IPTG进行诱导表达获得His-Ferritin重组铁蛋白,且主要以包涵体形式存在。通过镍柱进行亲和层析纯化获得纯度为96%的重组蛋白,使用脱盐柱将重组蛋白梯度透析至2mol·L-1尿素缓冲液中进行复性后,使用电子显微镜观察胞外自组装重组蛋白为粒径在12~20nm的均一的纳米结构,与天然铁蛋白纳米粒子类似。本研究成功建立了Ferritin蛋白原核表达体系,通过诱导表达、亲和层析纯化及复性获得了具有天然纳米结构的铁蛋白纳米颗粒,为其在生物医药领域的应用奠定基础。 相似文献