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1.
《广东畜牧兽医科技》2021,46(5)
本文旨在研究大豆异黄酮(SIF)对缓解猪肠道细胞氧化应激损伤的影响。试验采用体外细胞培养方法,使用过氧化氢(H_2O_2)将猪肠道上皮细胞(IPEC-J2)诱导为氧化应激状态后,分别用10、50、100μmol/L大豆异黄酮和100μmol/L乙氧基喹啉(EMQ)处理16 h。结果表明,经H_2O_2诱导的氧化模型组细胞存活率显著低于溶剂对照组、SIF 10组、SIF 50组和SIF 100组(P﹤0.05),细胞内ROS和MDA水平,SIF 10组、SIF 50组和SIF 100组均极显著低于氧化模型组(P﹤0.01),而细胞内SOD水平均高于氧化模型组,且SIF 100组达到极显著水平(P﹤0.01);乙氧基喹啉(EMQ)组与氧化模型组相比,细胞存活率和ROS显著降低(P﹤0.05),但细胞内MDA和SOD水平没有显著差异(P0.05)。结果提示大豆异黄酮具有缓解细胞氧化应激作用。 相似文献
2.
金雀异黄酮对鸡骨骼肌卫星细胞脂质过氧化和抗氧化酶活性的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
为了探明大豆异黄酮主要成分金雀异黄酮(GEN)对鸡骨骼肌卫星细胞的抗氧化保护效应,试验研究了GEN对离体培养的鸡骨骼肌卫星细胞脂质过氧化、抗氧化酶活性和基因表达的影响。试验采用岭南黄羽肉鸡骨骼肌卫星细胞接受不同浓度的GEN处理48h后,测定细胞培养上清液中谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性以及丙二醛含量,应用TaqMan实时荧光定量PCR法测定GEN对骨骼肌卫星细胞中谷胱甘肽过氧化物酶基因表达的影响。结果表明:与空白对照组相比,添加金雀异黄酮组骨骼肌卫星细胞培养上清液中丙二醛含量显著降低(P<0.05),添加1μmol/L和16μmol/L金雀异黄酮显著提高了鸡骨骼肌卫星细胞培养上清液中超氧化物歧化酶活性(P<0.05),添加4μmol/L和16μmol/L金雀异黄酮显著提高了谷胱甘肽过氧化物酶活性(P<0.05),细胞培养液中添加金雀异黄酮具有提高谷胱甘肽过氧化物酶mRNA拷贝数的趋势(P>0.05)。 相似文献
3.
为研究镉对新生大鼠原代大脑皮质神经细胞的脂质过氧化损伤及N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)的保护效应,对神经细胞用不同浓度(0,5、10、20 μmol/L)醋酸镉染毒和NAC(100 μmol/L)进行保护,检测细胞内活性氧(ROS)水平、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氩酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量.结果表明,与时照组比较,染毒组细胞内ROS水平、MDA含量和CAT活性极显著升高(P＜0.01),GSH-Px活性降低,20μmol/L组出现显著差异(P＜0.05);NAC保护组与相应染毒组比较,ROS水平、MDA含量和CAT活性呈不同程度降低,部分组间出现显著差异(P＜0.05);说明镉有促进神经细胞脂质过氧化的作用,NAC可提高神经细胞的抗氧化能力,对镉暴露所致的脂质过氧化损伤有一定的保护作用. 相似文献
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5.
本试验旨在探究大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用及其分子机制。以小鼠乳腺上皮细胞系HC11作为培养细胞。利用MTT法筛选CBD的最佳作用浓度，最终选择2、4、6μmol/L CBD作为后续试验的作用浓度。分别用1μg/mL LPS单独处理，2、4、6μmol/L CBD与1μg/mL LPS共处理HC11细胞，并设不进行药物处理的对照组，处理24 h后分别检测氧化应激相关指标、抗氧化相关基因mRNA和蛋白表达的变化。结果显示：1)与对照组相比，1μg/mL LPS处理后HC11细胞内活性氧(ROS)大量生成，丙二醛(MDA)含量显著增加(P<0.05);与LPS组相比，2、4、6μmol/L CBD预处理后HC11细胞内ROS含量明显下降，MDA含量显著降低(P<0.05),其中以6μmol/L CBD的效果最为显著。2)与对照组相比，1μg/mL LPS处理后HC11细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)均极显著降低(P<0.01)。与LPS组相比，2μmol/L ... 相似文献
6.
研究了1株解淀粉芽孢杆菌对氧化应激状态下Caco-2细胞抗氧化功能的影响。试验分3个组,每组3个重复。对照组I和对照组Ⅱ分别添加终浓度为0和100μmol/L H2O2,处理组同时添加100μmol/L H2O2和1 mL芽孢杆菌菌液(108cfu/mL)。细胞培养至12 h和48 h时测定培养上清和细胞裂解液中的抗氧化指标。结果表明,100μmol/L H2O2处理细胞12 h不会造成明显的氧化损伤,48 h则会引起丙二醛(MDA)显著升高(P<0.01);添加解淀粉芽孢杆菌后使细胞的总抗氧化能力、多种抗氧化酶活性、抗超氧阴离子活力和抑制羟自由基能力显著升高(P<0.01),同时降低乳酸脱氢酶(LDH)和MDA含量(P<0.01)。表明解淀粉芽孢杆菌能通过提高抗氧化酶活力和清除自由基能力来提高细胞总抗氧化能力,缓解氧化应激所引起的脂质过氧化损伤。 相似文献
7.
【目的】探究硒对铅致小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响。【方法】以小鼠睾丸间质细胞为研究对象,分为对照组、硒组、铅组和硒+铅组：硒组在细胞培养液中添加2μmol/L亚硒酸钠;铅组在细胞培养液中添加40μmol/L醋酸铅;硒+铅组在细胞培养液中联合添加2μmol/L亚硒酸钠+40μmol/L醋酸铅,体外培养24 h。采用MTT法检测细胞增殖情况;检测细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;使用化学荧光法测定活性氧(ROS)水平;运用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测凋亡相关基因天冬氨酸半胱氨酸酶-3(Caspase3)、Caspase8、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA和蛋白表达水平。【结果】与对照组相比,铅组细胞增殖显著受到抑制(P<0.05),MDA含量和ROS水平显著上升(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著下降(P<0.05),同时,铅显著上调了Caspase3、Caspase8、Bax的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),显著下调了... 相似文献
8.
本实验旨在研究体外成熟(IVM)培养基中添加不同浓度α-亚麻酸(ALA)(0、10、50、100、200μmol/L)对绵羊卵丘扩展和卵母细胞核成熟的影响,测定IVM 24 h后培养基中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量。结果表明:与添加0μmol/L ALA相比,培养基中添加50、100μmol/L ALA促进绵羊卵母细胞的卵丘扩展(P<0.05),且100μmol/L ALA卵丘细胞扩展率最高;添加100μmol/L ALA促进绵羊卵母细胞的核成熟(P<0.05);添加200μmol/L ALA则具有抑制卵丘扩展和细胞核成熟的趋势(P<0.05);添加100μmol/L ALA增加SOD活力(P<0.05)和GSH-Px活力(P<0.05);添加50、100μmol/L ALA显著降低MDA含量(P<0.05),又以添加100μmol/L ALA效果最好。综上,添加100μmol/L ALA可以通过抗氧化作用改善绵羊体外成熟培养基微环境,促进卵丘扩展和卵母细胞核成熟。 相似文献
9.
为探讨外源添加油酸和亚油酸对体外培养的奶山羊乳腺上皮细胞甘油三酯(TG)含量和乳脂肪合成相关基因表达的影响,试验以奶山羊乳腺上皮细胞为研究对象,分别用0、50、100、200μmol/L油酸和0、20、40、80μmol/L的亚油酸处理细胞24h,检测细胞内TG的含量;采用实时荧光定量PCR法检测细胞内乳脂合成相关基因mRNA水平的变化。结果显示,100、200μmol/L的油酸和40、80μmol/L亚油酸均显著促进细胞内TG的合成(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,添加100、200μmol/L油酸可显著上调二酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)及脂肪酸合成酶(FASN)基因的表达(P<0.05),显著抑制硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)基因的表达(P<0.05),而对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因的表达无显著影响(P>0.05)。添加20μmol/L亚油酸可显著抑制ACC和FASN基因的表达(P<0.05);亚油酸浓度为40和80μmol/L时可显著上调DGAT2基因的表达(P<0.05),抑制SCD1和SREBP1基因的表达(P<0.05),对ACC、FASN和PPARγ基因表达均无显著影响(P>0.05)。综上所述,100～200μmol/L油酸和40～80μmol/L亚油酸对奶山羊乳腺上皮细胞乳脂肪合成具有较好的促进效果。 相似文献
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《中兽医医药杂志》2020,(5)
研究湿生扁蕾乙酸乙酯提取物(GEE)对乙醇诱导人正常肝细胞(L02)氧化损伤的保护作用及其机制。用400μmol/L乙醇诱导L02细胞建立体外细胞氧化损伤模型,加入GEE 25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL作用24 h,采用MTT法检测细胞存活率;检测细胞培养上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的变化;DCFH-DA探针染色流式细胞仪检测细胞内ROS水平;DTNB-GR动力学循环法检测胞内还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)的含量变化。结果表明,400μg/mL乙醇诱导L02细胞24 h可建立肝细胞氧化损伤模型。GEE在25～100μg/mL对L02细胞无损伤。与模型组比较,GEE中剂量、高剂量组能显著提高L02细胞存活率(P0.001);降低细胞上清液中ALT、AST含量(P0.001);使细胞内SOD活力显著提高(P0.001);MDA含量明显降低(P0.001);同时使细胞内ROS水平降低(P0.01)、GSH/GSSG比值提高(P0.001)。提示GEE对乙醇诱导的L02细胞损伤具有保护作用,其机制可能与其减轻氧化应激反应有关。 相似文献
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水杨酸对匍匐翦股颖耐热性的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
配制成0、5、10、20、40μmol／L水杨酸（SA）浇灌处理匍匐翦股颖（Agrostis stolonifera）品种,摄政王（Regent）,在连续38℃／30℃（昼温／夜温）下培养6d,检测其叶片日均生长速率、叶片超氧化物歧化酶（SOD）活性、活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）含量的变化。结果表明,在高温胁迫下,10扯mol／LSA浇灌处理叶片日均生长速率显著大于对照（P〈0．05）;5～20μmol／L浇灌处理SOD活性显著高于对照（P〈O．05）,而ROS含量和MDA含量显著低于对照（P〈O．05）。SA浇灌后叶片SOD活性升高,可能是降低匍匐翦股颖热伤害的重要原因之一。5～40μmol／L处理中,以10μmol／L处理改善匍匐翦股颖耐热性的作用最好,可作为草坪管理的券者浓度。 相似文献
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乐果引起大鼠肝细胞凋亡的机理 总被引：2，自引：0，他引：2
通过给大鼠肝细胞培养液中加入乐果(0、3、10、30、100、300μmol/L),染毒122、4 h后,Annexin V/PI双染法检测肝细胞凋亡率;分别用Fluo-2/AM、双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)和罗丹名123检测细胞内Ca2+浓度、活性氧(ROS)和线粒体膜电位(Δψm)变化,并在扫描电镜和荧光显微镜下观察凋亡细胞情况,探讨乐果对大鼠肝细胞凋亡的影响。结果显示,肝细胞染毒12、24 h后,出现了明显的细胞凋亡的形态学变化,细胞凋亡率明显升高,除3μmol/L组外,与对照组相比差异显著(P0.05或P0.01),且呈时间-剂量效应。3μmol/L组细胞内Ca2+浓度极显著高于对照组(P0.01),之后随染毒剂量的增加,细胞内Ca2+浓度逐渐下降;细胞内ROS水平在3~100μmol/L随染毒剂量的增大和染毒时间的延长而升高,而在300μmol/L组略有下降,除3μmol/L组外,与对照组相比均差异极显著(P0.01);Δψm除24 h 300μmol/L组外均出现持续下降。结果表明,低剂量乐果染毒可诱导肝细胞发生凋亡,细胞内Ca2+、ROS和Δψm可能参与了这一过程。 相似文献
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为研究α-硫辛酸（α-lipoid acid,α-LA）对镉致PC12细胞氧化损伤的保护效应,通过不同浓度的醋酸镉染毒PC12细胞,并用100μmol/Lα-LA联合作用,测定PC12细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量。结果表明：与对照组相比,10μmol/L醋酸镉处理24h组细胞MDA含量和CAT活性极显著升高（P〈0.01）,SOD和GSH-Px活性极显著降低（P〈0.01）;不同浓度镉处理组细胞内MDA含量和CAT活性显著或极显著升高（P〈0.05或P〈0.01）,10和20μmol/L组SOD和GSH-Px活性极显著降低（P〈0.01）。α-LA保护组与相应染毒组相比,MDA含量和CAT活性显著降低（P〈0.05）,SOD和GSHPx活性有升高趋势,但组间差异不显著（P〉0.05）。说明镉可致PC12细胞发生氧化应激,α-LA可以提高PC12细胞的抗氧化能力,对镉引起的氧化损伤有一定的保护作用。 相似文献
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Sirtuin1 (Sirt1) is a NAD-dependent deacetylase that plays important roles in a variety of biological processes. In the current study, we examined tissue-specific and different expression pattern of porcine Sirt1 and the effect of resveratrol (RES) on expression of Sirt1 in porcine adipocytes. The full-length complementary DNA sequence of porcine Sirt1 was 4,024 bp (GenBank accession no: EU030283), with a 2,226-bp open reading frame encoding a 742-AA protein (a predicted molecular mass of 80.9 kDa; GenBank accession no. ABS29571). Comparison of the deduced AA sequence with the corresponding sequences of human, dog, cattle, and mouse Sirt1 showed 82 to 92% similarity. Furthermore, the porcine Sirt1 was highly expressed in porcine brain, to a lesser degree in spleen and white adipose tissue, and had low but detectable expression in liver. In subcutaneous adipose tissue and omental adipose tissue, expression of the porcine Sirt1 mRNA was greater in adult pigs than in young pigs (P < 0.01). In vitro, exposure of cultured adipocytes to 40 and 80 micro M RES for 24 h increased mRNA levels of porcine Sirt1 by 47.86% (P < 0.01) and 91.04% (P < 0.01), respectively. Accordingly, lipid accumulation and NEFA release were decreased (P < 0.05), respectively. After cultures were treated with RES for 48 h, the mRNA level of porcine Sirt1 was increased by 103.84% (P < 0.01) and 148.79% (P < 0.01), respectively. Lipid accumulation was decreased and NEFA release was increased (P < 0.05), respectively. These results provide information needed for manipulating Sirt1 expression in regulating fat deposition in pigs. 相似文献
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镉对大鼠原代肝细胞的毒性损伤 总被引：3，自引：0，他引：3
用两步灌流法获得大鼠肝细胞,肝细胞暴露于浓度为2.5、5、10μmol/L的醋酸镉24 h.测定了细胞活力、培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性及细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的变化.结果表明,细胞相对存活率显著下降(P<0.01),LDH、AST和ALT的释放量增加,5μmol/L和10 μmol/L剂量组与对照组相比差异均显著(P<0.01),细胞内GSH-PX活性降低,各剂量染毒组与对照组相比,差异均极显著(P<0.01);细胞内GSH含量升高,5 μmol/L和10μmol/L剂量组与对照组差异均显著(P<0.05),细胞内MDA含量升高,10μmol/L剂量组与对照组相比差异显著(P<0.05).表明镉可致肝细胞损伤,并且氧化应激起了重要作用. 相似文献
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用不同浓度醋酸镉（0、5、10、20μmol／L）以及细胞内钙离子螯合剂BAPTA-AM（10μmol／L）单独或联合作用于大鼠大脑皮质神经细胞12h,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内[Ca2＋];、活性氧（ROS）水平以及线粒体膜电位（△ψm）。结果显示,与对照组相比,各镉染毒组细胞凋亡率、细胞内[Ca2＋]i和ROS水平显著或极显著升高（P〈0．05或P〈0．01）,△ψm显著或极显著降低（P〈0．05或P〈0O．01）。BAPTA-AM联合组与相应镉染毒组相比,细胞凋亡率、细胞内[Ca2＋]i和ROS水平降低,△ψm升高,部分组间差异显著或极显著（P〈0．05或P〈0．01）。结果表明,镉可诱导大脑皮质神经细胞凋亡,细胞内钙稳态失衡在镉诱导大脑皮质神经细胞凋亡中起着重要作用,凋亡机理可能与细胞内钙超栽引起ROS水平升高和△ψm下降有关。 相似文献
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NURIBIYAMU·Maimaitituoheti ZHAO Xi AIRIXIATI·Dilixiati ZHANG Bo ABULIZ·Wusiman 《中国畜牧兽医》2007,47(12):4000-4007
The purpose of this study was to investigate the effects of resveratrol (RES) at different concentrations (0,0.5,2.0,5.0 μmol/L) on in vitro fertilization (IVF) and antioxidant capacity of ovine oocytes and the secretion of steroid hormones by cumulus cells.Sheep oocytes were fertilized in vitro after maturated in different concentrations of RES for 24 h,and the in vitro maturation (IVM) medium was collected for detecting the enzyme activity of superoxide dismutase (SOD),glutathione peroxidase (GSH-Px) and the content of monochrome display adapter (MDA).The ELISA method was used to detect the concentration of estradiol (E2) and progesterone (P4).The results showed that when compared to the control group,adding 0.5 μmol/L RES to the IVM medium significantly increased the cleavage rate (P<0.05),but had no significant effect on the fertilization rate and blastocyst rate (P>0.05);5.0 μmol/L RES significantly reduced the fertilization rate,cleavage rate and blastocyst rate (P<0.05),which had an inhibitory effect on embryonic development.Adding 0.5 μmol/L RES to IVM and IVC (in vitro culture,IVC) medium significantly increased the fertilization rate,cleavage rate and blastocyst rate (P<0.05).Compared to the control group,the addition of RES to IVM solution had a certain inhibitory effect on the secretion of E2 by cumulus cells,5.0 μmol/L RES significantly reduced E2 concentration (P<0.05);0.5 μmol/L RES significantly increased the P4 secretion of cumulus cells (P<0.05).0.5 and 2.0 μmol/L RES increased the activity of SOD,GSH-Px and other enzymes,but there was no significant difference when compared with the control group (P>0.05),but significantly reduced MDA content (P<0.05),while 5.0 μmol/L RES significantly reduced the activity of antioxidant enzymes and increased the content of MDA (P>0.05).In conclusion,0.5 μmol/L RES simultaneously added to IVM and IVC medium could enhance the antioxidant capacity of oocytes and concentration of P4,and reduced the content of MDA,thus improved the cleavage rate and blastocyst rate. 相似文献
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D-S. SON S. HARIYA M. SHIMODA E. KOKUE 《Journal of veterinary pharmacology and therapeutics》1996,19(3):176-183
Protein binding kinetics of basic antimicrobials including trimethoprim (TMP), erythromycin (EM), lincomycin (LM) and clindamycin (CM) were studied using porcine plasma, albumin and æ-acid glycoprotein (AGP). Rosenthal plots of these basic drugs in porcine plasma suggest saturable and non-saturable binding. Dissociation constants (Kd) and binding capacity (Bmax) for saturable binding were as follows: TMP, Kd= 8.58 μmol/L, Bmax= 5.26 μmol/L; EM, kd= 2.72 μmol/L, Bmax= 3.06 μmol/L; LM, kd= 3.96 μmol/L, Bmax= 6.58 μmol/L and CM, kd= 4.43 μmol/L, Bmax= 21.7 μmol/L. The proportionality constants (Bmax2/kd2) for non-saturable binding were 0.29 in TMP, 0.52 in EM, 0.17 in LM and 3.2 in CM. The kds of the drugs in porcine AGP solution were determined by a fluorescence quenching method, using 1-anilino-8-naphthalene sulphonate (ANS) as a fluorescent probe: 9.51 μmol/L in TMP, 1.89 μmol/ L in EM, 4.48 μmol/L in LM and 9.69 μmol/L, in CM. Comparable kd values between porcine plasma and AGP solution indicated that AGP is a major saturable binder in porcine plasma. Binding property to porcine albumin presented linearity, showing the following proportionality constants: 0.23 in TMP, 0.38 in EM, 0.01 in LM and 0.76 in CM. The comparable proportionality constants of TMP and EM between porcine plasma and albumin solution indicate that albumin is a major non-saturable binder, whereas proportionality constants of LM and CM in albumin solution compared to those in porcine plasma were low, implying another non-saturable binder, i.e. lipoprotein. Simulation curve of drug-binding percentage vs. AGP concentrations showed that in pigs under a pathologic state, or during early growth stage with high AGP levels, AGP could be a main contributor to drug-plasma protein binding for all drugs examined. The increase of AGP from normal to pathological concentrations induced a decrease in the unbound fraction: LM > CM > EM > TMP in order of AGP contribution to drug binding. Therefore, the disposition and efficacy of basic antimicrobials which bind to AGP with high affinity could be markedly influenced by altered AGP levels, implying AGP contribution to pharmacokinetics and pharmacodynamics. 相似文献