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用狄高辛标记DNA探针从人工感染鸡脏器检出I型马立克氏病病毒 总被引：1，自引：0，他引：1
用狄高辛标记ＤＮＡ探针从人工感染鸡脏器检出Ｉ型马立克氏病毒（ＭＤＶ），检出结果表明，人工感染ＧＡ强毒第三就高可从５只鸡只的三只心，肝，肺，肾，法氏囊，胸腺，肌胃检出Ｉ型ＭＤＶ，第２５天５只鸡的脏器均能检出Ｉ型ＭＤＶ，同时从感染第１０天就可从羽囊检出Ｉ型，到第１５天羽囊检出阳性率１００％。 相似文献
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狄高辛标记DNA探针对鸡马立克氏病的流行病学研究 总被引：2，自引：0，他引：2
用狄高辛标记的Ⅰ型马立克氏病病毒特异性ＤＮＡ探针，对自然感染鸡羽囊、人工感染鸡羽囊和脏器、同居感染鸡羽囊进行了检测。结果表明，自然感染鸡，其羽囊最早出现阳性的日龄为４２日龄，随日龄增大，羽囊阳性检出率升高，１５０日龄达最高峰（２６．７％）。以后则阳性率显著下降（６月龄为０．４８％，１年以上为０．２４％）。鸡人工感染马立克氏病国际标准强毒（ＭＤＶ－ＧＡ强毒）后３ｄ，就可从５只鸡中３只的心、肝、肺、肾、法氏囊、胸腺、肌胃等脏器检出Ⅰ型ＭＤＶ－ＤＮＡ；２５ｄ，５只鸡的脏器均能检出ＭＤＶ－ＤＮＡ；同时，感染后１０ｄ，就可从羽囊检出ＭＤＶ－ＤＮＡ，１５ｄ羽囊检出阳性率达１００％。同居感染鸡从羽囊排毒的最早时间为同居后３１ｄ，即接触强毒２１ｄ后开始持续排毒，直至死亡。 相似文献
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应用单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验检测兔出血症病毒 总被引：3，自引：0，他引：3
应用建立的单克隆抗体夹心酶联兔疫吸附试验（ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）,检测了人工感染兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）ＤＪＲＫ细胞毒、肝毒的兔以及自然感染ＲＨＤＶ的兔的组织样品。结果表明,感染死亡兔的肝、脾、肾、骨髓样品病毒抗原的检出率为１００％,淋巴结和肌肉的检出率分别为９７．５％和７９．５％。ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ能检出肌肉中血凝试验不能检出的ＲＨＤＶ抗原。此外,还用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测了肝毒人工感染兔血中ＲＨＤＶ的动态,并对１０份兔出血症脏器灭活苗的效价作了滴定。 相似文献
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应用聚合酶链反应鉴别诊断马立克氏病病毒及免疫效果监测 总被引：1，自引：0，他引：1
应用３对引物建立了３套聚合酶链反应检测体系。用该技术分别检测马立克氏病毒１型，３型毒株，并能鉴别１型致癌性强毒株和非致癌性弱毒株；可从强毒感染 病鸡病变脏器和弱毒免疫的ＳＰＦ雏鸡不同时期采集的弱髓中检测到ＭＤＶ１型病毒的ＤＮＡ；可鉴别强毒发病鸡羽髓和弱毒免疫鸡羽髓。以羽髓为检测材料，应用上述ＰＣＲ技术可以ＭＤＶ１型弱毒疫苗免疫鸡群进行免疫效果监测。 相似文献
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免疫鸡MDV感染后羽毛根HVT的分离及HVT免疫对MDV抗原检测的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
５只ＨＶＴ免疫鸡,实验感染ＭＤＶ后的第１～１０周期间,分别采用初次细胞分离培养物上清中的自由病毒粒子鉴定,ｄｏｔ－ｂｌｏｔＤＮＡ杂交和常规ＡＧＰ试验等方法,对并发感染鸡羽毛根进行了病毒及病毒抗原的动态检测与比较。结果显示,在上述羽毛根中可同时存在ＨＶＴ粒子和ＭＤＶＤＮＡ。ＨＶＴ可分离时间为ＭＤＶ攻毒后１～７周;ＭＤＶＤＮＡ最早检出时间为ＭＤＶ攻毒后的第１８～２２天,并达到其持续性（２２～７０ｄ）的检出率最高峰（１００％）;而ＡＧＰ法对此期间鸡只羽毛根ＭＤＶ抗原的最早检出时间在第２２天,且检出率很低。因此,羽毛病毒抗原ＡＧＰ检测法,对免疫鸡只或鸡群ＭＤＶ感染的诊断仍然是特异的,但较单纯感染的检测,其检出率更低,因而更难以反映出免疫鸡群中ＭＤＶ感染的真实状况。 相似文献
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应用间接免疫荧光法检测鸡传染性贫血病病毒抗体的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
用鸡传染性贫血病病毒（ＣＩＡＶ）ＭＳＢＩ－ＴＫ５８０３毒株感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ；细胞涂片为抗原，建立了检测ＣＩＡＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＩＦＡ）。应用该ＩＩＦＡ方法对人工感染的ＳＰＦ鸡进行了检测１５只１日龄ＳＰＦ鸡在接种后第７、１４天时均呈阴性反应；２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，３５天时呈明显阳性反应；１４只４０日龄ＳＰ 相似文献
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为了建立一种监测鸡群马立克氏病病毒（ＭＤＶ）早期感染的微量ＰＣＲ方法,根据血清Ⅰ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ１）基因组ＢａｍＨＩ－Ｌ片段的核酸序列设计了１对寡核苷酸引物,用含０．３ＵＴａｑ酶的１０μＬ反应体系分别扩增了ＭＤＶ１型（京－１株、ＭＤ１１／７５ｃ株）、ＭＤＶ２型（ＳＢ－１株）和ＨＶＴ（ＦＣ－１２６株）的核酸,并用京－１株感染细胞ＤＮＡ作了敏感性试验。结果显示,该引物对ＭＤＶ１型病毒特异,京－１株和ＭＤ１１／７５ｃ株都扩增到４２５ｂｐ的核酸条带,而ＳＢ－１株、ＦＣ－１２６株和正常ＣＥＦ细胞的ＤＮＡ都没有得到任何条带;敏感性试验结果表明,微量ＰＣＲ能够检测到０．１ｐｇ的京－１株感染细胞ＤＮＡ;对京－１株感染鸡,在接种后第５天就能在血液细胞中检测到ＭＤＶＤＮＡ。微量ＰＣＲ可望成为监测鸡群ＭＤＶ早期感染的一种快速、有效的方法。 相似文献
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用羽髓物鸡胚接种法诊断鸡马立克氏病 总被引：1，自引：0，他引：1
利用鸡胚卵黄囊接种试验 ,以绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）上病毒痘斑生长情况为依据 ,诊断鸡ＭＤ ,收到满意效果。１健康鸡胚经隔离饲养、血清学检验（ＡＧＰ）并证明无ＭＤ抗体的种鸡所产种蛋孵化的鸡胚。２羽髓浸液ＭＤ可疑鸡５只（７０日龄） ,每只鸡取翅羽２０根 ,剪下带羽囊的羽根放入消毒过的试管内 ,加入灭菌生理盐水３ｍＬ ,用消毒过的镊子挤出羽髓 ,弃去羽囊壳 ,破碎羽髓 ,搅拌后即为１份羽髓浸液 ,备用。３接种试验用上述羽髓浸液 ,按常规方法 ,即时（不加保存）接种于已孵化４～５ｄ的健康鸡胚卵黄囊 ,每份羽髓浸液接种１２个鸡胚 ,每胚… 相似文献
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应用间接免疫荧光法检测禽网状内皮组织增生病病毒抗体的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
用禽网状内皮组织增生病病毒（ＲＥＶ）感染ＳＰＦ鸡胚次代成纤维细胞涂片为抗原，建立了检测ＲＥＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＦＡ）。确定了待检血清稀释度１：６４和兔抗鸡ＩｇＧ荧光抗体的稀释度１：３２的工作浓度。应用该ＩＦＡ方法对人工感染ＲＥＶ的２０只３０日龄ＳＰＦ鸡进行了检测，接种后４天时均呈阴性反应，７天时８只鸡呈阳性反应，１４天２０只全部呈阳性的反应。通过对ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＡＬＶ、ＭＤＶ、ＣＩＡＶ、 相似文献
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用两个抗鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）中和性单抗，ＦＭ２０和ＦＭ２９的混合物（灭囊灵），对人工感染发病和自然发病鸡群进行被动免疫治疗和免疫保护试验。实验结果表明：人工感染发病鸡分别注射２０μｇ／ｍｌ和４０μｇ／ｍｌ的灭囊灵，在２４／小时后，全部阳性鸡均转为阴性鸡，治愈率达１００％，对野外自然发病鸡群肌注４０μｇ／ｍｌ，治愈率达９０％以上；以４０μｇ／ｍｌ作肌肉注射，被动免疫保护期达８天以上。在福建、江苏等地已经应用１２０万羽份，治愈率达９０％以上，获得了养鸡户的好评。灭囊灵在被动免疫治疗和预防该病具有很高的实用价值。 相似文献
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致病性马立克氏病病毒的污染与监测 总被引：2，自引：0，他引：2
马立克氏病（ Ｍａｒｅｋ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ＭＤ）是危害世界养禽业最严重的病毒性肿瘤性传染病。ＭＤ经羽毛囊排毒，空气传播，传染力极强，是鸡的三大主要疫病之一，可造成重大的经济损失。该病的致病因子为马立克氏病病毒（Ｍａｒｅｋ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＭＤＶ），属疱疹病毒科成员，根据其嗜淋巴细胞性相似于γ－疱疹病毒，而其基因组结构却相似于α－疱疹病毒［１］。 ＭＤＶ按其致病性和血清学反应不同分为三个血清型：血清Ｉ型（ＭＤＶＩ）包括致瘤致病性的强毒株（如 ＨＰＲＳ－ １７、ＧＡ、Ｍｄ／５、ＢＪ－１）… 相似文献
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分别以血清型Ⅱ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ）疫苗株（Ｚ４、ＳＢ１）、血清Ⅲ型火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗株（ＦＣ１２６）及二价疫苗（Ｚ４＋ＦＣ１２６、ＳＢ１＋ＦＣ１２６）免疫鸡群，用琼脂扩散试验（ＡＧＰＴ）检查各鸡群ＭＤＶ强毒攻击后不同时期的羽囊抗原。结果，二价苗能使试验鸡羽毛囊强毒排出高峰推迟，排毒率显著下降。 相似文献
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马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特异性和群共同性决定簇的单克隆抗体 总被引：3，自引：1，他引：2
用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体。以Ⅰ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的２株单克隆抗体细胞株，定名为ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ＭＤＶ均呈阳性反应；单抗ＢＡ４只对Ⅰ型ＭＤＶ（包括ＣＶＩ９８８疫苗株）呈阳性反应。免疫沉淀反应进一步确证２株单抗识别的是ＭＤＶ糖蛋白Ｂ抗原。 相似文献
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利用重组反转录病毒表达马立克氏病病毒Meq基因 总被引：7，自引：1，他引：6
为研究马立克氏病病毒Ｍｅｑ蛋白的生物学功能，应用磷酸钙与ＭＤＶ Ｍｅｑ基因重组的反转录病毒转染载体质粒ＲＣＡＳ－Ｍｅｑ的ＤＮＡ，转染于鸡胚成纤维细胞质ＤＦ１。经同间接免疫荧光技术研究表明，转染后第３天即开始有少量ＤＦ１细胞在细胞核表达Ｍｅｑ蛋白，以后阳性细胞增多，到转染后第７天阳性细菌最多，之后荧光即衰减，通过酶联免疫吸附试验检测，发现细胞培养上清中游离病毒在转染后第５天即可检出，直至第７天仍维持 相似文献
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试验选用５周石歧杂公鸡４５０只，随机分成５个组，每组９０只鸡，每组含３个重复，每重复３０只鸡，１组为对照组，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ为试验组，Ⅰ组给予自然光照，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别给予１２Ｌ：１２Ｄ、６Ｄ、３Ｌ：３Ｄ：２Ｄ的人工间歇光照。试验期鸡的基础日粮含代谢能１２．９３ＭＪ／ｋｇ，ＣＰ１６．７８％。鸡只自由采食和不，记录统计每日采食量。从４０日龄开始，每隔２周称重，且从每重复中随机抽取３只鸡，采用闷杀法 相似文献
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一、发病情况我市某镇一养鸡专业户饲养２０００羽９３９商品蛋鸡。１３日龄时，经邻村一个体禽病门诊部推荐，从该处购买１８支５００羽份／瓶传染性囊病弱毒冻干疫苗进行点眼免疫。该养殖户发现以前该疫苗首免都是１羽份／只，而这次的免疫剂量是４．５羽份／只，怕引起疫苗反应而只用了１４支疫苗（即３．５羽份／只）。接种后第２天，鸡雏全群发病并陆续出现死亡现象，第５天死亡５４只，第７天死亡１３０多只随后虽经治疗，病情得到控制，但仍有２００多只鸡个体矮小，发育受阻，造成较大的损失。二、症状及病变病鸡精神沉郁，羽毛粗乱… 相似文献
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HVT免疫鸡羽毛根中病毒抗原的检测 总被引：2，自引：0，他引：2
１日龄非免疫鸡,ＨＶＴ常规剂量免疫后,于第３周起,每周采集一次羽毛根,分别作常规ＭＤＶ琼扩抗原的检测。结果显示,在免疫事第３～８周检测,均未观察到特异性ＡＧＰ沉淀线,若取较多数量的富含羽髓的羽毛根,经２ｍｌ磷酸缓冲液（ＰＢＳ）浸提,浓缩胶浓缩约４０倍后,再作上述检测,则分别于免疫接种后的第３～５周都有特异性的,ＡＧＰ沉淀线出现,且与感染细胞上清中浓缩的ＨＶＴ及ＭＤＶ琼扩抗原所形成的沉淀线基本吻合, 相似文献
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６周龄商品ＡＡ肉鸡单独感染鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）强毒（ＩＢＤＶ）后，紧急注射ＩＢＤ高免卵黄，可在２天内得到控制；单独感染新城疫（ＮＤ）强毒后，紧急注射ＮＤⅠ系疫苗，可在５天内得到控制；而混合感染ＩＢＤＶ和ＮＤＶ或感染ＩＢＤＶ后继发感染ＮＤＶ，紧急注射ＮＤⅠ系疫苗，未能在７天内控制疫情。由此证明鸡群感染强毒ＩＢＤＶ可对ＮＤ产生严重免疫抑制。 相似文献
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对实验感染犬瘟热病毒的病犬进行了系统的病理学观察，并用酶标ＳＰＡ法对病犬脏器组织中ＣＤＶ抗原进行了定位检查。结果表明，淋巴系统各器官组织是ＣＤＶ急性感染早期首先侵犯的靶器官。脏器组织的病理改变与ＣＤＶ抗原检出呈正相关。脏器组织中包涵体的检出与形态结构具有一定的特征性和示病意义，但采用免疫组化方法检查ＣＤＶ抗原，更具优越性。作者认为，ＣＤＶ９３０３９株和ＣＤＶ９３０４１株是致病力很强的泛嗜性ＣＤＶ。 相似文献