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使用ＳＰＦ鸡制备的抗ＮＤＶ（新城疫病毒）高免血清可中和ＮＤＶ种毒或鸡新城疫疫苗ＬａＳｏｔａ株１０~７ＥＩＤ５０／０．１ｍｌ（即１０个使用剂量），并具有高度持异性。对于ＮＤＶ疫苗实验室模拟污染ＩＢＶ传染性支气管炎病毒）研究表明，用ＮＤＶ高免血清中和ＮＤＶ疫苗１０个使用剂量后，可检测到ＩＢＶ１０~（－６）污染水平。对于某生药厂ＮＤＶＬａＳｏｔａ疫苗中疑似ＩＢＶ污染的样品进行检测，排除了ＩＢＶ污染。文章同时证明了免疫胚接种ＮＤＶＬａＳｏｔａ毒后胎儿表现出类似感染了ＩＢＶ的病变。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒(IBV)干扰新城疫病毒(NDV)增殖现象的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
ＩＢＶ毒株Ｈ１２０、Ｈ５２、ＭＡ５对ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ的干扰实验证明ＩＢＶ特异性干扰ＮＤＶ增殖。１）采取不同顺序的同胚接种法：ＩＢＶ接种之后再接种ＮＤＶ;或ＮＤＶ接种之后再接种ＩＢＶ,及ＩＢＶ,ＮＤＶ同时接种,ＩＢＶ均干扰ＮＤＶ的增殖。２）ＮＤＶ接种３６小时之内,干扰现象最为明显,Ｈ１２０,Ｈ５２的干扰能力稍强于ＭＡ５。３）ＮＤＶ血清中和实验结果显示,不同顺序同胚接种ＮＤＶ、ＩＢＶ时,ＮＤＶ－ＬａＳｏｔａ不影响ＩＢＶ的增殖能力。同胚增殖ＩＢＶ,ＮＤＶ的关键是控制ＮＤＶ、ＩＢＶ的接毒量及选择合适的收毒时间。 相似文献
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新城疫病毒融合蛋白裂解位点基因的分离克隆及在原核细胞中的… 总被引：8，自引：4，他引：4
用ＳＰＦ鸡胚繁殖新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４６Ｅ９株（强毒）、ＬａＳｏｔａＥ４株（弱毒）、对病毒进行纯一提ＲＮＡ。用１对均为２７个碱基的引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，扩增出了２个毒株的融合蛋白裂解位点（Ｆｃ）基因。将Ｆｃ基因定向克隆人ｐＵＣＬａＦｃ，用ＥｃｏＲＩ／Ｓａｌ Ｉ双酶切法、ＰｓｔＩ单酶切法、ＰＣＲ法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的ＬａＳｏｔａＥ４Ｆｃ基因定向导入表达载体质粒ｐＢＶ２２１，ａｑｔ 相似文献
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采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、激光扫描技术、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和糖蛋白染色方法对新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ９株的结构蛋白进行了分析，结果表明，它具有ＮＤＶ的典型结构特征，与ＬａＳｏｔａ毒株相比无显著差异 相似文献
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鸽新城疫病毒的分离及鸽群自然感染状况的调查 总被引：20，自引：3，他引：17
将在北京某信鸽群采集的两只具神经症状的病鸽脑组织悬液接种ＳＰＦ鸡胚后，分离出二株病毒分离物ＰＢ９６０１和ＰＢ９６０２，通过对鸡红血球的血球凝集试验，用已知鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）高免血清任务在球凝集抑制试验（ＨＩ）及２～３月龄鸽的攻毒试验，证明这两个毒株为对鸽呈高致病性的ＮＤＶ。交叉ＨＩ试验表明，鸽ＮＤＶ分离株与鸡ＬａＳｏｔａ株间有很高的血清交叉反应，但也存在着一定抗原性差异。对扬州地区若鸽群中２－ 相似文献
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用新城疫病毒（ＮＤＶ）ＬａＳｏｔａ株,鸡传染性支气为病毒（ＩＢＶ）Ｍ４１株接种鸡胚,收获含毒鸡胚尿液。用传染性法氏囊病病毒地方强毒ＨＢ９０９株接种３０－４０日龄用鸡,发病后取囊组织制备成含毒组织悬液。将三种病毒液按一定比例混合,制备成三联油乳剂灭活苗。 相似文献
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鸡新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ和肾变病型传染性支气管炎（ＮＩＢ）Ｗ９３弱毒经１０日龄ＳＰＦ鸡胚同胚培养,收获含毒鸡胚液,制成Ｌａｓｏｔａ－Ｗ９３二联活疫苗。经实验室检测和临床应用证明,用于预防ＮＤ和ＮＩＢ效果好。 相似文献
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本中心对部分鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）毒株,尤其是Ｌａｓｏｔａ株的１日龄雏鸡脑内致病指数（ＩＣＰＩ）作了多次测定,测定的结果与厂家介绍或有关资料上的数值基本一致,现将检测方法与部分检测结果报道如下。１检测方法ＮＤＶ分离毒或冻干疫苗经ＳＰＦ鸡胚增殖后,无菌... 相似文献
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同胚增殖鸡新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的效果观察及免疫应答反应 总被引：6，自引：0，他引：6
鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）和鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）混合在同一鸡胚中增殖,当ＮＤＶ和ＩＢＶ接种浓度控制在一定范围时,最佳收毒时间选择使ＮＤＶ有足够时间增殖到最佳滴度,且在这一时间内不至于因孵育时间过长而致ＩＢＶ毒力减弱。结果表明ＮＤＶＬａｓｏｔａ株经１０倍稀释分别与４株ＩＢＶ１０００倍稀释液等体积混合后接种,能在同一鸡胚中正常增殖,即９６ｈ收毒,血凝（ＨＡ）方法测定两种病毒的血凝价均能达到最佳滴度,其血凝价不低于各自单独增殖的滴度。４种ＩＢＶ株与ＮＤＶ同胚增殖的ＨＡ滴度进一步证实,在合适的条件下,ＩＢＶ均不对ＮＤＶ的复制产生干扰作用,４种ＩＢＶ的血凝价无明显差异。免疫试验中用同胚增殖两种病毒二联苗接种,鸡体血清中可产生抗两种病毒的ＨＩ抗体,与各自单独接种时的ＨＩ抗体水平几乎一致。本试验中制备的ＩＢ血凝抗原在４℃保存一个月,其血凝活性保持不变。ＩＢＶ微量血凝抑制（ＨＩ）试验特异性测定结果证实,用自制ＩＢＶ血凝抗原进行ＨＩ试验检测鸡ＩＢ阳性血清均能产生稳定的特异性反应,并且无交叉反应。说明ＨＩ试验是检测ＩＢＶ抗体水平的有效可行的方法。 相似文献
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最近我们从平顶山市某养鸡场的发病鸡群中分离到１株病毒（ＰＳ株）。分离毒经鸡胚传代后可使鸡胚出现死亡、卷曲胚或侏儒胚;不能直接凝集１％鸡红细胞,经１％胰酶处理后能凝集鸡红细胞;干扰试验表明分离毒有干扰ＮＤＬａＳｏｔａ株在鸡胚上生长的特性;中和试验表明分离毒与Ｍ４１株抗原性差异较大,而与Ｔ株抗原性基本一致,这与肾型ＩＢＶ一致;电镜观察到的病毒粒子具有典型的冠状结构;回归试验能使雏鸡死亡,出现肾脏肿大、肾小管和输尿管充满白色尿酢盐沉积等特征性病变。因此认为分离毒为肾型ＩＢＶ。分离到的ＰＳ株是从外地购买… 相似文献
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不同新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８、Ｎ－７９、ＬａＳｏｔａ和分离株Ｘ以１∶１００００稀释接种９日龄ＳＰＦ鸡胚,每胚０．２ｍｌ,结果发现,Ｆ４８Ｅ８和分离株Ｘ毒力较强,可在５０小时左右致死鸡胚,ＬａＳｏｔａ和Ｎ－７９较弱。Ｆ４８Ｅ８和Ｘ株接种鸡胚的肌肉、肝脏、脑和尿囊液均有大量病毒存在,而Ｎ－７９和ＬａＳｏｔａ只在尿囊液中有大量病毒存在,胚体病毒极少。 相似文献
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采用Ｌａｓｏｔａ种毒和ＮＩＢＶ同胚接种，ＥＤＳ－７６种毒鸭胚培养的方法研制了ＮＤ－ＥＤＳ－７６－ＮＩＢＯＥＶ，并依据有关标准进行了安检和效检试验，３０日龄雏鸡接苗１毫升／只，临床无不良反应；接苗０．０２毫升／只，２１天后ＮＤ攻毒保护率为１００％，接苗０．２毫升／只，２１天后ＮＩＢ攻毒保护率为８０％，接种０．５毫升／只，２天天后采血测ＥＤＳ－７６ＨＩ抗体ＧＭＴ为２２２．８试验结果表明本疫苗安全，有效 相似文献
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新城疫病毒融合蛋白裂解位点基因的分离克隆及在原核细胞中的表达 总被引：5，自引：1，他引：4
用ＳＰＦ鸡胚繁殖新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４６Ｅ９株（强毒）、ＬａＳｏｔａＥ４株（弱毒），对病毒进行纯化，抽提ＲＮＡ。用１对均为２７个碱基的引物进行ＲＴ－ＰＣＲ，扩增出了２个毒株的融合蛋白裂解位点（Ｆｃ）基因。将Ｆｃ基因定向克隆入ｐＵＣ１８的ＥｃｏＲＩ和ＳａｌⅠ位点之间，获得２个毒株Ｆｃ基因克隆ｐＵＣＦ４６Ｆｃ和ｐＵＣＬａＦｃ，用ＥｃｏＲＩ／ＳａｌⅠ双酶切法、ＰｓｔⅠ单酶切法、ＰＣＲ法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的ＬａＳｏｔａＥ４Ｆｃ基因定向导入表达载体质粒ｐＢＶ２２１，获得重组子ｐＢＶＬａＦｃ。ＰＣＲ和内切酶酶切法鉴定表明，Ｆｃ插入的位置和方向都正确无误。用Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α通过热诱导法进行了表达。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ法检测了表达产物。结果表明，有１条能够与ＮＤＶ多抗反应的特异条带，分子量约１５７００，与预期大小一致，说明是Ｆｃ基因的表达产物 相似文献
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原倍鸡传染性法氏囊炎（ＩＢＤ）高免血清可以中和１０个羽份ＩＢＤ病毒；中和后的病毒接种鸡胚卵黄囊后继续孵化至出雏，雏鸡健活；用ＮＤＶＬａＳｏｔａ毒和鸡鹌鹑痘病毒模拟污染ＩＢＤＶＢ８７毒再经ＩＢＤ高免血清中和，可以检出模拟污染的病毒；高免血清可以中和１０个羽份的ＩＢＤ疫苗毒。 相似文献
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不同新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８、Ｎ－７９、Ｌａ Ｓｏｔａ和分离株Ｘ以１：１００００稀释接种９日龄ＳＰＦ鸡胚,每胚０．２ｍｌ,结果发现,Ｆ４８Ｅ８和分离株Ｘ毒力较强,可在５０小时左右致死鸡胚,Ｌａ Ｓｏｔａ和Ｎ－７９较弱,Ｆ４８Ｅ８和Ｘ株接种鸡胚的肌肉,肝脏,脑和尿囊液均有大量病毒存在,而Ｎ－７９和Ｌａ Ｓｏｔａ只在尿囊液中有大量病毒存在,胚体病毒极少。 相似文献
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１ 材料和方法 １１ 抗原制备 分别将ＮＤＬａｓｏｔａ株和ＥＤＳ７６种毒接种９～１１日龄鸡胚、鸭胚增殖病毒，收获感染胚液，经检测血凝价（ＨＡ）ＮＤ为≥１∶６４０，ＥＤＳ７６≥１∶２０４８０，病毒含量以尿囊腔内注射的感染量≥１０６０ＥＩＤ５０／０１ｍｌ时，可用于制苗用毒，经甲醛溶液３７°Ｃ灭活备用。１２ 油相制备 取１０号白油，司本８０按一定比例混合后加硬脂酸铝少量，随加随搅拌，煮沸至透明为止，高压灭菌后备用。１３ 水相制备 将灭活的Ｌａｓｏｔａ．ＥＤＳ７６尿囊液按一定比例混匀后，加入吐… 相似文献
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应用鸡新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ株病毒和产蛋下降综合征（ＥＤＳ７６）病毒、传染性支气管炎（ＩＢ）病毒分别接种鸡胚、鸭胚和鸡胚，增殖病毒，收获感染的胚液，制备抗原液，经甲醛溶液灭活后与油相佐剂乳化，制出三联灭活油苗。对制品的安全性和免疫性进行了测定，具有良好的安全性和免疫效果。 相似文献
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鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定 总被引：12，自引：0，他引：12
天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病,经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎（ＧＩＢ）,并分离出ＩＢＶ ＪＢ９７０２株,ＨＡ效价为２＾１２,ＥＩＤ５０为１０＾－６．８１／０．２ｍＬ。病毒干扰试验中,ＩＢＶ ＪＢ９７０２＋ＮＤＶ ＬｓＡｏｔａ接种鸡胚ＨＡ效价为２＾４～６,ＬａＳｏｔａ接种鸡胚ＨＡ效价为２＾１０～１１;用ＩＢＶ ＪＢ９７０２病毒液１：１０稀释后感染经ＩＢＶ Ｈ 相似文献
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试用鸡胚法氏囊原代细胞传代、增殖鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），均不同程度地产生特征性细胞病变效应。采用双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ和细胞毒回归鸡试验证实，ＩＢＤ－ＶＨ株组织毒适应于鸡胚法氏囊细胞，并随传代次数增加，病毒增殖能力增强；而在鸡胚成纤维细胞上盲传２代之后才开始出现细胞病变效应。比较了ＩＢＤＶ在鸡胚法氏囊细胞和鸡胚成纤维细胞上增殖能力的差异，讨论了培养基ＰＨ值、小牛血清浓度对鸡胚法氏囊细胞培养及病毒增殖的影响。 相似文献