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相似文献
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1.
为了研究不同醇沉浓度刺五加多糖对脾细胞增殖和细胞因子IL-2表达的影响,试验采用分级醇沉的方法对刺五加多糖进行醇沉得到粗糖,并去蛋白得到精制糖,研究分级醇沉刺五加多糖不同浓度对小鼠脾细胞增殖、ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖反应和脾细胞产生细胞因子表达的影响。结果表明:40%醇沉组多糖浓度为7.8~125μg/mL时均能促进脾细胞增殖,并且其促进脾细胞增殖作用与多糖浓度呈剂量依赖性,促增殖作用增强;40%醇沉组多糖浓度为15.62~125μg/mL时能促进ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖反应;各醇沉组多糖浓度为15.62~125μg/mL时均能显著促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖反应;20%、40%、60%醇沉组多糖浓度为3.9~7.81μg/mL时IL-2的表达水平呈上升趋势;并且随药物浓度的增大细胞因子表达量先增多后减少。说明以40%醇沉刺五加多糖免疫增强效果优于其他醇沉多糖。  相似文献   

2.
试验将7种浓度蛹虫草多糖(CMP)单独或与刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)同时加入鸡脾脏淋巴细胞的培养体系中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖(A570值)的变化;将5种浓度的CMP 40%乙醇提取物(CMP40)、CMP 50%乙醇提取物(CMP50)分别与ConA加入到鸡脾淋巴细胞的培养体系中,培养24 h后收集细胞培养上清液,测定白细胞介素-2(IL-2)和γ-干扰素(IFN-γ)的含量。结果显示,CMP在31.25~2 000μg/mL时,CMP40+ConA组的A570值显著高于ConA对照组;CMP在31.25~500μg/mL时,CMP50+ConA组A570值显著高于ConA对照组,CMP40+LPS组、CMP50+LPS组的A570值显著高于LPS对照组;CMP40在125~1 000μg/mL时、CMP50在500μg/mL时,各多糖组的A570值显著高于细胞对照组;CMP40和CMP50在250~1 000μg/mL时,各多糖组的IL-2和IFN-γ浓度显著高于对照组。结果表明,CMP40和CMP50在合适的剂量能单独或协同ConA、LPS刺激鸡的T、B淋巴细胞增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,从而增强鸡的细胞免疫能力。  相似文献   

3.
目的:探讨芪竹汤对小鼠脾淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力的影响。方法:将黄芪、穿心莲、玉竹、香附以干重4∶3∶3∶3的比例水煎并浓缩得到芪竹汤药液。不同浓度的芪竹汤在Con A和LPS刺激下与小鼠脾淋巴细胞作用,采用CCK-8法检测各处理组的OD值;不同浓度的芪竹汤与小鼠巨噬细胞共同孵育,采用中性红染色法检测巨噬细胞的吞噬能力。结果:5 ng/mL、1 ng/mL、0.2 ng/mL的芪竹汤对小鼠脾T淋巴细胞的增殖有极显著促进作用(P0.01);5 ng/mL、0.2 ng/mL的芪竹汤对B淋巴细胞的增殖有显著促进作用(P0.05);5 ng/mL、1 ng/mL的芪竹汤对小鼠巨噬细胞的吞噬功能也有正向调节作用(P0.05)。结论:芪竹汤可以促进小鼠脾淋巴细胞的增殖和巨噬细胞的吞噬功能。  相似文献   

4.
为进一步阐明胸腺素α1(Tα1)的作用机制,采用MTT比色法、RT-PCR相对半定量法和RIA法研究了不同浓度的Tα1对离体培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2基因表达及其分泌的影响。结果表明,10μg/mL和1μg/mL Tα1处理鸡脾脏淋巴细胞能显著提高由ConA诱导的淋巴细胞增殖转化率(P<0.05),显著提高鸡脾脏淋巴细胞IL-2基因表达水平以及细胞培养上清液中的IL-2含量(P<0.05),且以10μg/mL浓度的效果最佳。0.1μg/mL的Tα1对脾脏淋巴细胞增殖转化和IL-2基因表达与分泌无显著作用(P>0.05)。提示,Tα1对鸡免疫功能的调节同其剂量有关,并可能在基因转录水平上调节IL-2的分泌。  相似文献   

5.
研究三七皂苷S-6的溶血性及体外免疫活性。常规方法提取PNS,大孔树脂柱层析分离纯化得S-6。溶血试验测定红细胞溶血率。脾淋巴细胞毒性试验确定S-6的安全剂量范围,体外脾淋巴细胞增殖反应和IL-2的诱生及含量测定检测S-6的体外免疫活性。S-6溶血性较小,2 mg/mL浓度以下无溶血性;S-6(0.1μg/mL、1μg/mL)显著促进了ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应,且与PNS和APS组相比,差异不显著;S-6(1μg/mL)极显著地促进了LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应,且与PNS相比,S-6(1μg/mL)差异显著,其余各个剂量与PNS和APS组相比,差异不显著;S-6(12.5μg/mL、25μg/mL、50μg/mL)显著或极显著地提高了IL-2的含量,且与PNS和APS组相比,差异不显著。S-6安全性好,体外具有较好的细胞免疫活性和诱生细胞因子的能力。  相似文献   

6.
为了探究不同浓度的银杏叶复方在脂多糖(LPS)或植物血凝集素(PHA)刺激下对脾虚小鼠小肠淋巴细胞体外增殖的影响,试验用不同浓度的银杏叶复方(200μg/mL、100μg/mL、10μg/mL、1μg/mL、0.1μg/mL)同LPS或PHA刺激小肠淋巴细胞分裂增殖的方法研究对小鼠淋巴细胞体外增殖的影响。结果表明:对于脾虚小鼠小肠B淋巴细胞,以200μg/mL、100μg/mL的浓度刺激效果最佳(P0.05);相比于1μg/mL、0.1μg/mL浓度,浓度为200μg/mL时更有利于正常小鼠小肠B淋巴细胞增殖(P0.05);对于脾虚小鼠小肠T淋巴细胞,以100μg/mL浓度最佳(P0.05),浓度为200μg/mL和100μg/mL时对正常小鼠小肠T淋巴细胞的刺激增殖效果显著(P0.05)。说明银杏叶复方浓度为200μg/mL、100μg/mL时能有效刺激正常和脾虚小鼠的小肠淋巴细胞分裂增殖。  相似文献   

7.
试验旨在探索使较高比例的淋巴细胞富集在有丝分裂G2/M期的最佳条件。运用植物血凝素(PHA)和刀豆蛋白A(ConA)对淋巴细胞进行刺激使其增殖,培养一定时间后加秋水仙素对淋巴细胞进行同步化处理,用流式细胞仪检测G2/M期的细胞数量进行比对,观察试剂的最佳作用浓度和加秋水仙素的最佳时间。结果表明,采用PHA和ConA刺激淋巴细胞增殖的最佳作用浓度是60和5 μg/mL,且淋巴细胞经ConA刺激培养45 h再加秋水仙素处理5 h G2期的比例最高为58.38%。结果提示,就绒山羊的淋巴细胞来说,ConA刺激绒山羊淋巴细胞增殖的效果比PHA好,且摸索出细胞G2/M期的时间点至关重要。  相似文献   

8.
采用MTT比色法、相对半定量RT-PCR法和放射免疫测定(RIA)法研究了不同浓度的胸腺九肽对离体培养的鸡脾淋巴细胞增殖转化、IL-2基因表达与分泌的影响。结果表明,用10ng/mL和lng/mL胸腺九肽处理鸡脾淋巴细胞8h后,能显著增加由ConA诱导的淋巴细胞增殖转化反应,显著提高IL-2基因的表达水平以及细胞培养上清液中的IL-2含量(P〈0.05);100ng/mL的胸腺九肽虽有增强脾淋巴细胞增殖转化反应以及提高IL-2基因表达和分泌能力的趋势,但与对照组无显著差异(P〉0.05)。提示,胸腺九肽能增强鸡脾淋巴细胞的增殖转化反应,并主要在基因转录水平上促进IL-2的合成与分泌,其作用与弃3量大小有关。  相似文献   

9.
本试验旨在研究黄芪多糖(APS)、芦荟多糖(AP)、银耳多糖(TFPS)、黑木耳多糖(AAP)4种中药多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.将4种多糖体外作用于小鼠脾淋巴细胞;采用MTT法测细胞增殖活性.结果显示,与对照组相比较,4种多糖在浓度为400 μg/mL时均能促进静止态淋巴细胞增殖;多糖协同ConA或LPS作用于淋巴细胞,4种多糖表现不同程度的增殖促进作用.在静止态淋巴细胞增殖以及协同丝裂原作用于淋巴细胞的增殖试验中,芦荟多糖所表现的促进增殖作用较强于其他3种多糖.  相似文献   

10.
华莎  韩鹏  刘亚刚 《四川畜牧兽医》2004,31(4):27-27,29
为建立奶牛淋巴细胞增殖反应MTT比色法,对试验条件进行了研究。应用L16(45)正交试验,对影响MTT比色法的四个主要因素,包括ConA浓度、细胞浓度、培养液小牛血清浓度及培养时间进行了比较和探索。试验表明几个因素对其增殖反应都有显著影响(P<0.05),且最佳反应条件为:15μg/mL的ConA、1×106/mL细胞浓度、10%小牛血清及60h的培养时间;影响增殖反应的先后顺序为细胞浓度、ConA浓度、培养时间及血清浓度。  相似文献   

11.
试验旨在研究不同浓度的天门冬多糖(ASP),在ConA或LPS的协同刺激下对猪脾淋巴细胞体外增殖的影响。猪脾淋巴细胞体外培养体系中加入不同浓度的天门冬多糖使其终浓度为400、200、100、50、25、12.5μg/ml,在ConA(5μg/ml)或者LPS(10μg/ml)的协同刺激作用下,细胞培养24、48、72 h时,观察猪脾淋巴细胞增殖情况。结果表明,天门冬多糖及其协同ConA或LPS能显著或极显著的促进猪脾淋巴细胞体外增殖(P<0.05或P<0.01)。  相似文献   

12.
为了检测感染免疫抑制病毒后鸡群的细胞免疫变化,以建立的3H-TdR掺入法观察了外周血、脾脏、胸腺、法氏囊中淋巴细胞的增殖反应,对影响该方法的细胞密度、丝裂原浓度(ConA或LPS)、犊牛血清(FCS)浓度等条件进行优化.结果表明,外周血淋巴细胞增殖试验的最佳条件细胞105~106/mL,ConA 5 mg/L,FCS 10%;脾脏中淋巴细胞最佳条件细胞5×106/mL,ConA 10 mg/L,FCS 10%;胸腺中淋巴细胞最佳条件细胞106/mL,ConA 40 mg/L,FCS 10%;法氏囊中淋巴细胞最佳条件细胞5×106/mL,LPS 40 mg/L,FCS 10%.  相似文献   

13.
采用MTT法、细胞因子ELISA法来分析玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)对离体培养的小鼠淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响。结果表明,不同浓度ZEN对LPS、ConA活化的脾脏T/B淋巴细胞的增殖均具有极显著的抑制作用(P<0.01),且这种增殖抑制表现出剂量依赖性;低浓度ZEN(1 μg/mL)能显著促进脾脏淋巴细胞分泌IL-10(P<0.05),而高浓度ZEN(10、25 μg/mL)均能极显著抑制脾脏淋巴细胞分泌IL-10(P<0.01),并表现出剂量依赖性;不同浓度ZEN(1、10、25 μg/mL)均能显著或极显著抑制脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ(P<0.05或P<0.01),并表现出剂量依赖性。  相似文献   

14.
【目的】试验旨在揭示茶树菇多糖(Agrocybe aegerita polysaccharid, AAP)对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节的影响,为阐明AAP的作用机制及其临床应用提供依据。【方法】以小鼠脾脏淋巴细胞为研究对象,用噻唑蓝(MTT)比色法测定AAP对淋巴细胞的安全浓度,以安全浓度进行后续试验;用MTT法检测不同浓度AAP对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响,同时设置细胞、脂多糖(LPS)和植物血凝素(PHA)3个对照组,筛选出对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力较强的浓度,用流式细胞仪检测其对T淋巴细胞亚型CD4+/CD3+和CD8+/CD3+比值的影响,利用ELISA法检测其对淋巴细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)含量的影响。【结果】低于1 000μg/mL AAP对小鼠脾脏淋巴细胞不产生毒性作用。与对照组相比,不同浓度AAP均可极显著协同LPS和PHA刺激淋巴细胞增殖(P<0.01);125和250μg/mL AAP可极显著提高...  相似文献   

15.
为了研究靛玉红对羊传染性脓疱病毒(Ovine contagious pustular dermatitis virus, ORFV)感染淋巴细胞的增殖、细胞因子质量浓度及CD分子表达量的影响,在靛玉红对ORFV感染淋巴细胞增殖的影响试验中,分为对照组、ORFV感染组、靛玉红(0.2μg/mL)+ORFV组、靛玉红(0.2μg/mL)组,采用CCK-8法检测靛玉红对ORFV感染淋巴细胞增殖的影响。另外,在靛玉红对ORFV感染细胞上清液中细胞因子质量浓度及CD分子表达量的影响试验中,分为高浓度靛玉红(0.2μg/mL)+ORFV组、中浓度靛玉红(0.1μg/mL)+ORFV组、低浓度靛玉红(0.05μg/mL)+ORFV组,于96孔培养板中,每孔加入淋巴细胞悬液100μL,之后加ORFV病毒悬液100μL,吸附2 h,弃病毒液,分别加入终浓度为0.2,0.1,0.05μg/mL的靛玉红溶液100μL,作用0,2,4,8,12 h,另设ORFV感染组(只加ORFV病毒悬液和RDMI-1640完全培养基)、对照组(只加RPMI-1640完全培养基),采用ELISA方法检测细胞上清液中IFN-γ...  相似文献   

16.
左旋咪唑对鸡离体外周血淋巴细胞的作用   总被引:3,自引:0,他引:3  
本文报道了左旋咪唑对鸡离体外周血淋巴细胞(PBL)增殖及伴刀豆球蛋白A(ConA)诱导细胞(CIC)活性的作用;左旋咪唑以剂量依赖性方式促进鸡PBL的增殖;与ConA对促进鸡PBL增殖呈现协同作用;对脂多糖(LPS)激活鸡PBL具有明显促增殖作用;可逆转磷酸组胺和肾上腺素对ConA和LPS激活鸡PBL增殖的抑制作用;低浓度左旋咪唑不能逆转氢化可的松对ConA激活鸡PBL增殖的抑制作用,但高浓度(100-400μg/ml)可明显逆转氢化可的松的抑制作用;左旋咪唑可明显逆转氢化可的松的对LPS激活鸡PBL增殖的抑制作用;可促进CD4^ 细胞增殖,抑制CD8^ 细胞增殖,使CD4^ /CD8^ 细胞比值升高,CIC活性增强。  相似文献   

17.
为研究淫羊藿多糖(EPS)体外增强免疫活性,采用酶学检测法测定淫羊藿多糖活性及对鸡脾脏淋巴细胞的增殖作用。根据活性检测结果,选择用50%的乙醇醇沉的淫羊藿多糖进行安全浓度试验;根据安全浓度检测结果,选择2 500.00μg/mL、1 250.00μg/mL、625.00μg/mL、312.50μg/mL、156.25μg/mL 5个浓度,用MTT法测定淫羊藿多糖单独和协同LPS刺激对鸡脾脏淋巴细胞增殖率的影响。结果显示:不同浓度乙醇醇沉的淫羊藿多糖均具有良好的活性,但乙醇浓度为50%醇沉的淫羊藿多糖活性最佳。淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞的安全浓度为2 500.00μg/mL。淫羊藿多糖无论是单独还是协同LPS刺激脾脏淋巴细胞,均显示出不同程度增强脾脏淋巴细胞的活性,且均在浓度为1 250.00μg/mL时显示出较强的体外增强鸡脾脏淋巴细胞增殖的能力,说明淫羊藿多糖在安全浓度范围内可刺激鸡脾脏淋巴细胞增殖,从而实现调节免疫功能的作用。  相似文献   

18.
为了探究不同浓度的铁皮石斛对环磷酰胺(Cyclophosphamide,Cy)所致免疫抑制模型小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响,选取6周龄清洁级KM小鼠50只,体重18~22 g,全为雌性,随机分为对照组、免疫抑制组。每组各设5个重复,每个重复5只小鼠。免疫抑制组给予腹腔注射环磷酰胺(100 mg/kg·bw),对照组给予腹腔注射等量的生理盐水。1日1次,隔天注射,连续15 d。结果:铁皮石斛在终质量浓度5~135μg/mL范围内促进效果显著,其中作用48 h增殖幅度明显。对于小鼠脾脏T淋巴细胞而言,铁皮石斛浓度为20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL均能促进免疫抑制小鼠T淋巴细胞的增殖(P0.05),尤以浓度为20μg/mL时最佳。铁皮石斛浓度为80μg/mL时对于正常小鼠脾脏T淋巴细胞分裂增殖显著(P0.05)。对于小鼠脾脏B淋巴细胞而言,铁皮石斛浓度为40μg/mL时对免疫抑制小鼠脾脏B淋巴细胞增殖效果最佳。各浓度铁皮石斛OD值均高于单纯LPS刺激,且细胞增殖情况差异显著(P0.05),但对照组中3个铁皮石斛浓度差异不显著(P0.05)。结论:铁皮石斛浓度在40μg/mL、80μg/mL时能有效协同Con A、LPS刺激小鼠脾脏T、B淋巴细胞的增殖。  相似文献   

19.
本文报道了左旋咪唑对鸡离体外周血淋巴细胞穴PBL雪增殖及伴刀豆球蛋白A穴ConA雪诱导细胞穴CIC雪活性的作用:左旋咪唑以剂量依赖性方式促进鸡PBL的增殖;与ConA对促进鸡PBL增殖呈现协同作用;对脂多糖穴LPS雪激活鸡PBL具有明显促增殖作用;可逆转磷酸组胺和肾上腺素对ConA和LPS激活鸡PBL增殖的抑制作用;低浓度左旋咪唑不能逆转氢化可的松对ConA激活鸡PBL增殖的抑制作用,但高浓度穴100~400μg/ml雪可明显逆转氢化可的松的抑制作用;左旋咪唑可明显逆转氢化可的松的对LPS激活鸡PBL增殖的抑制作用;可促进CD+4细胞增殖,抑制CD+8细胞增殖,使CD+4/CD+8细胞比值升高,CIC活性增强。  相似文献   

20.
无菌采集犬抗凝血,分离淋巴细胞并制备成不同浓度。应用正交试验,探讨不同浓度淋巴细胞、犊牛血清(FCS)、植物血凝素(PHA-P)对淋巴细胞增殖的影响。在此基础上,研究不同浓度猪转移因子(transferfactorTF)对犬淋巴细胞增殖的影响。结果表明:在犬淋巴细胞浓度为5×106个/mL,FCS为10%时,PHA-P为12.5μg/mL时,淋巴细胞增殖效果最佳。在最佳培养条件下,猪TF浓度在0.195~25mg/mL时,对犬淋巴细胞转化增殖均有明显促进作用,但猪TF单独或与PHA-P共同作用时对淋巴细胞增殖的最佳刺激浓度均为1.56mg/mL,且猪TF单独作用于淋巴细胞的效应优于与PHA-P的协同作用。试验结果证实,猪TF对犬淋巴细胞增殖有良好的刺激效果。  相似文献   

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