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相似文献
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1.
用提纯的Ab2制成免疫制剂,在大白鼠、小白鼠可诱导特异性VSG抗体(Ab3)。免疫保护试验结果表明,Ab2制剂免疫动物对攻虫感染具有明显的保护效应。单独用抗独特型抗体免疫的小白鼠、大白鼠、豚鼠对50条同型锥虫攻击的保护率分别为60%,60~80%,80%;抗独特型抗体作为“引子”,可使小白鼠获得80~100%的保护,对大白鼠和豚鼠的保护率为100%。单独使用抗独特型抗体免疫的小白鼠对5个数量(25,50,100,200,400)锥虫攻击的保护率分别为80%,60%,20%,0%,0%,而作为“引子”免疫小白鼠对5个数量锥虫攻击的保护率分别为100%,80%,40%,20%,0%。这些结果表明,制备的兔抗独特型抗体(Ab2)含有VSG表位的内影像,具有模拟VSG的功能,在实验动物体内可诱导主动免疫,因此可作为一种潜在的疫苗制剂为家畜伊氏锥虫病的免疫预防提供一个可能的途径。  相似文献   

2.
用纯化的伊氏锥虫变异表面糖蛋白(VSG)免疫大白鼠制备出抗血清,经饱和硫酸铰盐析,DE-52纤维素离子交换层析和Sepharose4B亲和层析提取VSG特异性多克隆IgG抗体(Abl)。用Abl免疫大白鼠和家兔制备出抗独特型血清。ELISA抑制试验检测结果表明,8份大白鼠抗独特型血清的抑制率高于25%。用正常大白鼠IgG致敏的醛化绵羊红细胞吸收兔抗独特型血清除去异种抗体,采用Abl-Sepharose4B亲和层析,可从每毫升兔抗独特型血清中获得97.4微克抗独特型抗体(Ab2)。经ELISA抑制试验检测表明,提取的兔抗独特型抗体(Ab2)对Abl与VSG的结合反应可产生明显的抑制效应,能识别Abl的抗原结合部位,其配位的空间构型与VSG表位具有相似性。  相似文献   

3.
伊氏锥虫抗独特型抗体疫苗的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
用纯化的伊氏锥 虫变异表面糖蛋白(VSG)免疫大白鼠制备出抗血清,经饱和硫酸铵盐析,DE-52纤维素离子交换层析和Sepharose4B新和层析提取VSG特异性多克隆LgG抗体。用Ab1免疫大白鼠和家兔制备出抗独特型血清。ELISA抑制试验检测结果表明,8份大白鼠抗独特型血清的抑制率高于25%。用正常大白鼠IgG致敏的醛化绵羊红细胞吸收兔抗独特型血清除去异种抗体,采用Ab1-Sepharose4B  相似文献   

4.
用纯化的兔出血症病毒(rabbithaemorhagicdiseasevirus,简称,RHDV)免疫Balb/c小鼠。正如网络学说所指出的,从免疫鼠的杂交瘤细胞克隆中,不仅筛选出能分泌抗RHDV抗体(Ab1)的细胞克隆,同时也筛选出能分泌抗RHDV独特型抗体(anti-idiotypicantibodies,Ab2)的杂交瘤细胞,用抗原而不用单克隆抗体(Ab1)免疫,诱导产生抗独特型抗体(Ab2)是一种具有广阔的应用前景的新技术  相似文献   

5.
抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的制备   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文主要论述了SP2/0骨髓瘤细胞与经传染性法氏囊病病毒三次免疫后的BALB/C的小白鼠的脾细胞,在融合剂PEG(MW4000)的作用下,融合形成杂交瘤细胞,融合率可达96%,将杂交瘤细胞上清液用ELISA法检测,其阳性率可达80%,将阳性杂交瘤细胞进一步克隆化,进行抗体检测,阳性率可达99%,单克隆产生的抗体经大量生产后,为以后的抗原血清型鉴定,抗独特型抗体疫苗的制备打下了基础。  相似文献   

6.
猪水泡病病毒抗独特型抗体的研究—Ab2的制备与鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
用猪水泡病病毒中和单抗2B6和4H9免疫家兔,制备出SVDV兔抗独特型抗体。经亲和层析纯化,用ELISA鉴定性质,结果表明,所制备的Ab2能竞争抑制Ab1与SVDV抗原结合,同时,Ab2与Ab1的结合可被病毒抗原阻断,表明所制备的Ab2具有SVDV抗原内影像关系。  相似文献   

7.
兔源抗IBDV独特型抗体疫苗的制备   总被引:3,自引:0,他引:3  
用纯化的抗鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)抗体免疫家兔,将所获效从较高(1:16)的兔源抗IBDV独特型抗体分别与福氏完全和福氏不完全佐剂按1:1比例乳化制备成抗IBDV独特型抗体疫苗,用该疫轩免疫迪卡公雏鸡和SPF组鸡,经用IBDV强毒株以点眼和滴鼻方式攻击,试验组的保护率分别为98/98,100/100,49/49,大群免疫接种的应答率为100%。  相似文献   

8.
体外培育抗苏拉灭伊氏锥虫克隆   总被引:1,自引:1,他引:0  
将3个苏拉灭敏感的伊氏锥虫原种的克隆连续培养于改良Baltz无细胞培养系统中,通过逐步提高培养基中苏拉灭的含量,培育了3个抗苏拉灭的伊氏锥虫克隆─JGc1-160、JX-1c1-160和ZJc1-140。它们体外药敏试验的IC50依次为358.5、412.3和246.4μg/mL,是各自亲本克隆的1292.5、1874.1和1760.o倍;小鼠治疗试验的CD100,对免疫功能正常小鼠依次为80、120和30mg/kg,为各自亲本克隆的5.3、8.0和3.0倍,对免疫抑制小鼠为250、300和100mg/kg,分别是相应免疫正常小鼠的3.1、2.5和3.3倍。试验结果表明,抗锥虫药治疗剂量不足和宿主免疫功能不全是导致产生抗药虫株的重要因素,各自既可单独发挥作用,又可相互协同。本文报道了体外培育伊氏锥虫抗药虫株的方法,这一方法对研究锥虫抗药性具有重要作用。  相似文献   

9.
抗IBDV独特型抗体疫苗的制备与应用   总被引:1,自引:1,他引:0  
应用提取纯化的抗IBDVIgG免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞在PEG作用下融合,应用ELISA法检测筛选,经有限稀释法克隆2次,获得2株(2B6株,5F4株)分泌抗IBDV独特型抗体的杂交瘤细胞株,其能诱生BALB/c小鼠产生高效价的含抗IBDV独特型抗体的腹水。用此独特型抗体分别与福氏完全佐剂、福氏不完全佐剂按1∶1比例乳化制备成抗IBDV独特型抗体疫苗,免疫接种SPF鸡和普通京白公鸡,然后用IBDV野毒株经点眼和滴鼻方式攻毒,保护率分别为8/8、14/14,从而证实抗独特型抗体疫苗有潜在的研究和应用价值。  相似文献   

10.
抗H9亚型禽流感病毒独特型抗体的制备与应用   总被引:3,自引:0,他引:3  
用纯化的鸡抗H9亚型禽流感病毒(AIV)免疫球蛋白G(IgG)作为抗原免疫家兔,制备兔源多克隆抗独特型抗体(Pab2),同时免疫小鼠,应用细胞融合技术建立了分泌抗AIV独特型单克隆抗体(Mab2)的杂交瘤细胞系。经鉴定,2类抗独特型抗体均能竞争性地抑制鸡抗AIVIgG与AIV的结合。保护试验证实,兔源多克隆抗独特型抗体疫苗较单克隆抗独特型抗体疫苗具有更高的保护作用。  相似文献   

11.
用绵羊肺炎支原体(MO)抗原免疫的BALB/C小鼠,取血清抗体阳性免疫鼠的脾细胞与SP2/O细胞在聚乙二醇作用下进行融合,产生杂交瘤细胞、用间接ELISA法对杂交瘤细胞生长孔上清液进行检测,筛选阳性杂交瘤细胞株.以有限稀释法克隆1~2次,得到6株分泌抗绵羊肺炎支原体抗原的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株.选择抗体分泌较高的14A6、7A27、B38进行了较详细的研究,结果表明,其核内染色体数为94~96.抗体属性是:1株为IgG2a、2株为IgG1.用间接ELISA法对3株McAb作符异性分析、该McAb只特异地与绵羊肺炎支原体抗原发生反应,而不与猪肺炎支原体、山羊无乳症支原体抗原发生反应.将杂交瘤细胞注射BALB/C小鼠诱生腹水.其抗体效价提高100倍.杂交瘤细胞在液氮中保存1~2年后复苏仍能稳定地分泌抗绵羊肺炎支原体McAb。  相似文献   

12.
从马立克氏病病毒(MDV)人工感染鸡的淋巴细胞瘤表面洗脱抗马立克氏病相关肿瘤表面抗原(MATSA)的抗体。以此作为Ab1免疫家兔,成功地制备了MATSA的内映像(Ab2β)。将纯化的Ab2β与白油佐剂乳化,给30日龄鸡肌注免疫,应用间接ELISA对免疫鸡MATSA抗体的消长进行了监测。结果表明:正常鸡的血清中无MATSA抗体的存在,而用这种Ab2β于第1次免疫后10d即可形成明显的抗体应答,ELISA的OD值(x)为0.20;至第3次免疫后10d,OD值(x)为0.33,达峰值,以后则呈下降趋势。研究结果表明,应用来自MDV感染鸡肿瘤细胞表面的抗MATSA的抗体,可以用作肿瘤表面抗原内映像的制备,从而为抗肿瘤独特型疫苗的研究提供了一种新途径  相似文献   

13.
伊氏锥虫单一或混合抗原免疫小鼠保护性试验   总被引:3,自引:1,他引:2  
采用广东克隆(广东水牛伊氏锥虫单虫克隆)、安徽克隆1(安徽水牛伊氏锥虫单虫克隆)、安徽克隆2、新疆克隆(新疆骆驼伊氏锥虫单虫克隆)作单一抗原或混合抗原免疫小鼠试验。用安徽克隆1和新疆克隆单一抗原免疫小鼠,再用相应同株克隆攻击,其保护率在80%以上,而用异株克隆攻击(安徽克隆1、新疆克隆或广东克隆),保护率低于17%,表明安徽、新疆和广东伊氏锥虫各株间免疫原性存在差异。用新疆克隆抗原和安徽克隆2抗原混合免疫,再用新疆克隆和安徽克隆2攻击,保护率在80%以上,用新疆克隆抗原和广东克隆抗原混合免疫,再用新疆克隆和广东克隆攻击,保护率亦在80%以上,且在免疫后1~2个月仍有效。对新疆克隆抗原和广东克隆抗原混合免疫小鼠脾细胞作体外增殖试验,用不同抗原按500mg/L和125mg/L高低2种剂量刺激,均产生明显增殖,表明各锥虫抗原存在免疫交叉,但在高剂量组,用同株克隆的刺激增殖效果(SI)高于异株克隆。  相似文献   

14.
家畜伊氏锥虫多因素致弱苗免疫试验研究   总被引:4,自引:1,他引:4  
用伊氏锥虫多用因素致弱免疫小白鼠30只,在免疫后30,45,60d各取10只小白鼠攻虫,保护率依次为9/10,8/10,6/10;3次空白对照小白鼠均球 注锥虫后4-7d死亡。免疫豚鼠30只,在免疫后30,60,90d各取10只豚鼠攻虫,保护率依次为10/10,9/10,8/10;3次空白对照豚鼠均于注锥诟17-23d玖民。免疫马9区,在免疫后30,60,90d各取3匹马攻虫,均获3/3保护;继续  相似文献   

15.
伊氏锥虫在我国流行面广,因而地理株众多。在进行免疫诊断时,已发现用某株锥虫制成的抗原对其他株锥虫病的诊断出现敏感性和特异性不均一的现象[’1。王祥生等用异种锥虫进行了交叉兔疫试验’‘’。有关不同株锥虫之间交叉免疫保护试验,还未见有人研究,本试验对此作了初步探讨。材料与方法】.虫株新疆骆驼株(XJCA)和安徽水牛株(AHB)均为本实验室液氮保存。2.试验动物昆明系小白鼠30只,体重20g左右,雄性。购自上海医科大学实验动物中,乙。3.抗原制备保存于液氮中锥虫取出复苏后经小白鼠继代,大白鼠扩增后,按an-ham等(1…  相似文献   

16.
采用四种方法:即①单克隆抗体检抗原的酶联免疫吸附试验(Ag-ELISA)②检测抗体的在酶联免疫吸附试验(Ab-ELISA)③表膜检查(BCE)④小白鼠接种(MI),检查了肯尼亚183头骆驼锥虫的循环抗原,BCE查出尼亚183头骆驼锥早的循环抗原,BCE查出37头阳性20%),MI60头阳性(33%),Ag-ELISA63头阳性(49%),Ab-ELISA检出出的24头中,Ag-ELISA检出18头  相似文献   

17.
用CEAE DE-52分离纯化的锥虫,经超声波粉碎后离心,上清经硫酸铵沉淀,再经Sephadex G-200分子筛层析,DEAE Cellulose ED-52离子交换层析,2’,‘ADP-Sepharose层析得到纯化。筛选到抗蠕虫药奥芬哒唑(Oxfendazole)对TR有抑制作用。但对治疗锥虫病没有作用;兔抗TR抗体与安锥赛共同注射人工感染锥虫病的小白鼠,可增加安锥赛对锥虫病的疗效。  相似文献   

18.
采用四种方法:即①单克隆抗体检测抗原的酶联免疫吸附试验(Ag-ELISA)②检测抗体的酶联免疫吸附试验(Ab-EUSA)③表膜检查(BCE)④小白鼠接种(MI),检查了肯尼亚183头骆驼锥虫的循环抗原,BCE查出37头阳性20%),MI60头阳性(33%),Ag-ELISA63头阳性(34%),Ab-ELISA检出90头阳性(49%)。其中BCE未能检出的24头中,Ag-ELISA检出18头(75%)。所有阳性头数中,Ag-ELISA检出93%,Ab-ELISA95%。根据55头的结果,阳性与阴性之间Ag-ELISAOD值差异极显著(P<0.0001),Ab-ELISAOD值差异不显著。因此,用Ag-ELISA或结合BCE诊断伊氏锥虫感染比用AB-ELISA更理想。  相似文献   

19.
李祥瑞  金红 《畜牧与兽医》1998,30(6):245-247
使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠,研究了同时注射重组牛白细胞介素-2(rBIL-2)对NK细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响。试验鼠随机分为4组:Ag组,rBIL-2组,Ag+rBIL-2组和PBS对照组。以LDH释放法和间接ELISA法分别检测脾NK细胞杀伤活性及抗体水平。结果表明,首次免疫后24d,Ag组NK细胞杀伤活性为31.6%,rBIL-2组为99.66%,Ag+rBIL-2组为98.98%,对照组为19.73%;抗体效价Ag组为24,Ag+rBIL-2组为26。说明rBIL-2可显著提高NK细胞杀伤活性及促进抗体生成,提高宿主免疫力。  相似文献   

20.
应用提取纯化的抗IBDV IgG免疫Balb/c小鼠,其脾细胞与SP2/O细胞在PEG作用下融合,应用ELISA法检测筛选,经有限稀释法克隆2次,获得了2株(2B6株、5F4株)分泌抗IBDV独特型抗体的杂交瘤细胞株,并能诱生Balb/c小鼠产生高效价的含抗IBDV独型抗体腹水。  相似文献   

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