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聚丙烯酰胺凝胶电泳检测致病疫霉菌SSR标记方法改良 总被引：2，自引：1，他引：1
[目的]改进聚丙烯酰胺凝胶电泳检测致病疫霉菌SSR标记方法。[方法]以2009年在宁夏固原地区采集的马铃薯晚疫病样为试验材料,提取其DNA,PCR扩增,并将其产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]采用12%聚丙烯凝胶电泳检测引物D13、G11,8%聚丙烯凝胶电泳检测引物PI4B、PI63、SSR4,最后采用0.1%硝酸银染色,取得了比较理想的电泳及染色效果。[结论]该研究建立的适用于致病疫霉菌SSR标记的电泳和染色技术方法具有检测灵敏度高、操作简单、获得的条带清晰等特点,是一种行之有效、简便快捷的检测方法。 相似文献
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柑橘苗期SSR鉴定分析体系的优化及初步应用 总被引：4，自引：0，他引：4
本文以柑橘幼苗微量叶片(3～5 mg)为材料,改进柑橘基因组DNA提取方法,并对3种PAGE凝胶浓度和3种银染色方法进行了筛选和优化,建立了一种经济,高效的柑橘苗期SSR分析体系.试验结果表明:该微量叶片提取方法需材少,用时短,所提取基因组DNA质量好、纯度高,完全适用于SSR-PCR扩增反应.9%的PAGE凝胶浓度最适合柑橘SSR标记的电泳检测,扩增出的条带清晰,分散良好.改进的两种快速银染方法相对于传统的染色方法染色效果较好,且更加经济.初步对两个柑橘杂交幼苗群体进行了遗传鉴定和分析,2对引物从24株沙田柚与强德勒柚杂交幼苗中鉴定出17株杂种,4对引物在沙田柚与红江橙杂交群体中扩增出14条多态性条带,占总条带数的70.0%.表明所建立的SSR优化体系可为柑橘分子辅助育种提供技术参考. 相似文献
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用两个微卫星标记分析云南马铃薯晚疫病菌的遗传多样性 总被引：3，自引：0，他引：3
【目的】检测不同马铃薯产区晚疫病菌基因型的特征,揭示马铃薯晚疫病菌群体的进化潜能和演替。【方法】用已开发出来的微卫星标记（SSR）对云南省23个马铃薯产区的晚疫病菌群体的遗传结构进行研究。【结果】在两个SSR位点Pi4B和Pi4G上共检测到8个等位基因,占优势的等位基因是218和161,基因频率分别为84.02%、32.52%。在分析的235个云南晚疫病菌菌株中,检测到18个不同的SSR基因型,其中8个新的SSR基因型谱系H-03、H-04、H-05、H-06、H-07、I-01、J-01和 K-01被首次检测到;SSR基因型D-03、D-05、H-01和H-05是云南马铃薯晚疫病菌群体的优势谱系,在云南的群体中所占的比例分别为20.85%、22.98%、15.32%和19.57%,分布于云南的大部分马铃薯产区。【结论】云南马铃薯晚疫病菌群体遗传多样性在地理分布上差异明显,滇中多季作种植区晚疫病菌群体显示了较高的遗传多样性,滇南冬播作一季种植区群体结构单一。有证据表明中国云南晚疫病菌群体与其它国家20世纪80年代后出现的晚疫病菌群体在遗传上存在关联。 相似文献
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凝胶电泳蛋白质染色方法研究进展 总被引：4，自引：0，他引：4
蛋白质条带染色是蛋白质凝胶电泳中一个重要的步骤。目前的方法主要有考马斯亮兰染色、银染、荧光染色、负染等。将考马斯亮兰与BBR相结合进行染色，可以减少染色／脱色的次数，能够提高考马斯亮兰在蛋白质条带上的染色效果。Gallyas Intensifying方法与银染相结合，能提高用银染已经检测到的蛋白质条带的亮度，使蛋白质点之间及其与背景之间更容易区分。将银染与考马斯亮兰结合起来进行染色可以提高同一块胶上微量蛋白质检测灵敏度。目前，对染色方法改进主要集中在如何提高蛋白质染色的灵敏度，操作方便与否，费用是否昂贵等方面。如何在保持银染方法高灵敏度的同时，又能够有效地降低染色背景，用无毒的化学物质去替换现在凝胶电泳中常用的有毒物质，克服荧光染色使蛋白质化学性质改变的缺点，在保持负染不修饰蛋白质条带化学性质优势的同时，对蛋白质条带染色结果加以改善等，可能代表了蛋白质条带染色的未来发展方向。 相似文献
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为研究蜡状芽孢杆菌BC98-Ⅰ（Bacillus cereus，T1）和枯草芽孢杆菌B96-Ⅱ（Bacillus subtilis，T2）发酵液对马铃薯晚疫病的防治效果，采用平皿培养法研究T2及T1+T2对马铃薯晚疫病菌的抑制作用，通过盆栽试验和大田试验研究T2及T1+T2对马铃薯的防病促生作用，探究发酵液T2及T1+T2大田灌根后对马铃薯病害的持续防治效果。结果表明，2种发酵液均能显著抑制马铃薯晚疫病病菌的菌丝生长；在盆栽和大田试验中，2种发酵液都能显著促进马铃薯植株的生长、提高马铃薯产量，植株最高促生率达54.74%，马铃薯最高增产率达35.51%；2种发酵液对马铃薯晚疫病有较好的防治效果，最高防治效率达78.98%。另外，2种发酵液还能显著提高土壤中过氧化物酶、脲酶、磷酸酶和蔗糖酶活性。综上所述，发酵液T2及T1+T2不仅能提高马铃薯产量，还对马铃薯晚疫病具有较好的防治作用，具有开发成抗马铃薯晚疫病生物农药的潜在价值，为山西地区马铃薯晚疫病的高效防治提供理论和技术支撑。 相似文献
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马铃薯晚疫病是由疫霉引起的一种世界性的流行性和毁灭性病害,每年造成巨大的产量损失.抗性品种培育一直是育种学家追求的目标.常规育种方法具有耗时费力等特点,目前分子植物育种在马铃薯晚疫病抗性育种中被应用或作为辅助应用.综述了马铃薯晚疫病的发生及防治,分子标记技术在马铃薯晚疫病抗性和晚疫病抗性育种中的研究进展,以及马铃薯晚疫病抗性基因定位、基因工程、转录组分析和全基因组关联分析等方面的研究进展,并对未来马铃薯育种策略进行了展望,以期为马铃薯晚疫病抗性分子育种提供理论参考. 相似文献
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小麦基因组DNA快速提取及SSR标记PAGE的银染检测 总被引：4，自引：3，他引：1
为了提高SSR-PCR速率,降低试验成本,以8份抗条锈小麦幼苗为材料,比较分析了两种DNA提取方法(CTAB法和SDS法)以及两种SSR标记PAGE银染法(Sanguinetti银染法和Bassam银染法).结果表明:用CTAB法和SDS法均可获得质量较好的DNA,但CTAB法花费的时间较长,提取效率低(在相同条件下SDS法提取速度约为CTAB法的2倍);Sanguinetti银染法染色背景较浅、条带清晰、分辨率高、具有较高的多态性检出率,并且在速度上优于Bassam法,仅需30多min,而Bassam银染法染色步骤烦琐,对试剂质量和水质要求均较高,且未能染色成功. 相似文献
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两种聚丙烯酰胺凝胶银染方法的比较 总被引：20，自引：0，他引：20
比较了两种聚丙烯酰胺凝胶的DNA染色方法。对小麦SSR扩增产物的染色结果显示,改进的Bassam银染法颜色背景浅,灵敏度较高,能够看到副带染色。改进的Sanguinetti方法对条带的鉴别力稍差,但因省时省力,成本较低可用于大规模引物筛选时的染色。 相似文献
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小鼠单个冷冻胚胎银染mRNA差异显示方法的建立 总被引：7，自引：2，他引：7
为建立单个冷冻胚胎银染mRNA差异显示方法,用小鼠单个4C鲜胚和冻胚RT—PCR产物,验证了冻胚和鲜胚实验结果的一致性。并从小鼠4C和8C冻胚的银染聚丙烯酰胺凝胶中回收了8C期的特异条带,通过再扩增、同收、克隆及酶切鉴定,克隆到了小鼠8C期胚胎差异表达的小鼠RP23—20A6基因。结果表明,所研究建立的单个冻胚银染mRNA差异显示方法具有可行性和有效性,可以用于动物早期胚胎基因表达的研究。 相似文献
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TIAN Yuan WANG Chao 《东北农业大学学报(英文版)》2007,14(3):202-205
SSR analysis on genetic diversity of 30 samples was carried out.Five primers selected from 36 primers were used to amplify 30 samples in this experiment,PCR products were separated by 6% polyacrylamide gel electrophoresis,silver staining and photographed.The results of SSR were analyzed by UPGMA clustering.The results showed that a total of 21 gene alleles were detected by 5 SSR primers.The number of alleles ranged from 2 to 5 with an average of 4.2.PIC range was 0.257-0.921,with an average of 0.543.The average coefficient of genetic similarity of SSR markers among materials was 0.432.Some of cabbage cultivars in the experiment were divided into four groups except cultivars which come from Japan. 相似文献
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