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1.
不同培养液及血清浓度对绵羊孤雌生殖胚胎发育的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
体外成熟的绵羊卵母细胞，经5 μmol/L A23187 5 min和2 mmol/L 6-DMAP 4 h激活后，分别在SOFaa、M-199两种培养液中进行培养，试验比较了SOFaa、M-199液分别添加BSA和不同浓度（10%、20%）胎牛血清对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。M-199+FCS组的卵裂率显著低于SOFaa+BSA和SOFaa+FCS组（P<0.05），SOFaa+BSA组的囊胚率显著低于M-199+BSA、SOFaa+FCS、M-199+FCS三组（P<0.05）；SOFaa+10% FCS与SOFaa+20% FCS组的卵裂率及囊胚率均无显著差异，M-199+10% FCS和M-199+20% FCS组的卵裂率及囊胚率间均无显著差异。结果表明：SOFaa比M-199更适合绵羊孤雌生殖胚体外发育，此外添加10%的FCS即可达到较好的培养效果。 相似文献
2.
本研究探讨了生长激素(STH)和胰岛素对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后卵裂的影响。结果表明:在mNCSU-23液中,添加0.15μg/mLSTH组的成熟率(73.83%)和卵裂率(64.76%)显著高于对照组和添加0.01、0.05、0.1、0.2μg/mLSTH组(P<0.05);添加5μg/mL和8μg/mL胰岛素组的成熟率(66.25%、60.64%)显著高于添加0、0.5、2μg/mL及10μg/mL组(P<0.05);添加5μg/mL胰岛素组的卵裂率(61.63%)显著高于添加0、0.5、2、8、10μg/mL组(P<0.05);最佳的联合添加组为0.15μg/mLSTH+2μg/mL胰岛素,其体外成熟率为79.37%、卵裂率为72.31%。 相似文献
3.
探讨了两种不同成分成熟液配方(I:含PMSG、hCG、pFF与II:含FSH、LH)对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活发育能力的影响。结果表明:当卵母细胞分别在I和II液中成熟培养42 h后,卵母细胞存活率差异不显著(82.66%∶83.5%)(P>0.05)。对成熟卵母细胞孤雌激活后体外培养结果表明:I成熟培养组的卵母细胞卵裂率低于II成熟培养组(69.44%∶78.38%)(P<0.05)。但两组卵母细胞经144 h培养后囊胚发育率差异不显著(35.0%∶32.04%,P>0.05)。由此可知:采用不含pFF、化学成分已知的成熟液可以满足猪卵母细胞体外成熟和卵母细胞孤雌激活后的正常发育。 相似文献
4.
5.
为了探讨瘦素(Leptin)对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后胚胎早期发育的影响,研究选择在Earle's盐缓冲的TCM199中添加10IU/mLeCG,10IU/mLhCG,10ng/mLEGF配制成化学限定的基础液,以添加不同浓度Leptin设定各试验组,对猪卵母细胞进行体外成熟培养。以未添加Leptin的基础液为对照组1,而添加5%的胎牛血清(FBS)、10%猪卵泡液为对照组2。比较分析各组卵母细胞核成熟效率,孤雌激活后胚胎的卵裂率,囊胚发育率。结果表明:各添加组卵母细胞成熟率与对照组之间无显著差异(P>0.05);孤雌激活后,各组间的卵裂率和囊胚发育率也无明显差异。同时,在化学限定的猪卵母细胞体外成熟液中添加Leptin对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后早期胚胎的发育无显著效果。 相似文献
6.
《当代畜牧》2008,(5)
研究了生长激素(somatotropin,STH)、胰岛素(Insulin)单独或者协同作用对猪卵母细胞成熟及电激活后卵裂的影响。结果表明,STH、Insulin对卵母细胞的成熟和激活后卵裂呈现双重效应。在NCSU-23基础液中添加0.15μg/mLSTH组的成熟率(73.83±1.80%)和卵裂率(64.76±2.54%)显著高于对照组及0.01、0.05、0.1、2.0μg/mLSTH组(P<0.05);添加5μg/mLInsulin的成熟率(65.05±1.34%)和8μg/mLInsulin组的成熟率(60.24±1.34%)显著高于对照组及0.5、2、10μg/mLInsulin组;添加5μg/mLInsulin组的卵裂率(61.33±2.62%)显著高于对照组及0.5、2、8、10μg/mLInsulin组(P<0.05);0.15μg/mLSTH与2μg/mLInsulin联合添加组成熟率和卵裂率最高,达到79.35±2.04%和72.31±1.19%,同其它组相比,差异显著(P<0.05),在本试验中为猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。 相似文献
7.
细胞因子与激素对山羊卵母细胞体外成熟及卵裂的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
本试验研究了在培养液中添加不同浓度的GDNF、LIF、SCF及其不同组合对山羊卵母细胞体外成熟与卵裂的影响。结果表明:GDNF、LIF、SCF对山羊卵母细胞体外成熟有极显著影响(P<0.01),不同浓度间无显著影响(P>0.05),添加LIF卵母细胞体外成熟率极显著高于GDNF、SCF(P<0.01),添加GDNF、LIF对卵裂率有显著影响(P<0.05),添加SCF对卵裂率无影响(P>0.05);GDN+LIF+SCF组和GD-NF+LIF组卵母细胞成熟率极显著高于LIF+SCF和GDNF+SCF组(P<0.01),添加GDNF+SCF和LIF+SCF对卵母细胞体外成熟率无显著差异,可见,LIF和GDNF对山羊卵母细胞体外成熟有协同作用。胚胎的早期发育上GDNF+LIF+SCF组优于GDNF+LIF组优于LIF+SCF也优于GDNF+SCF,均能显著提高卵裂率。 相似文献
8.
本试验旨在探讨不同外源激素组合的添加、胰岛素—转铁蛋白—亚硒酸钠(ITS)的添加、不同培养皿、石蜡油的添加对卵母细胞体外成熟培养(IVM)的影响。结果显示:①孕马血清促性腺激素+人绒毛膜促性腺激素+促卵泡素(PMSG+HCG+FSH)组高于促卵泡素+促黄体素(FSH+LH)组和尿促性腺激素(hMG)组,相互之间差异显著(80.1%、68.3%、53.3%,P<0.05);②添加1% ITS到猪卵母细胞培养液中对卵母细胞成熟率无显著提高(P>0.05),但显著提高了孤雌激活后孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率(63.3%、55.1%,18.7%、12.1%,P<0.05);③凹槽皿组猪卵母细胞成熟率显著高于四孔板和30 mm塑料皿组(73.3%、68.0%、68.3%,P<0.05);④石蜡油的添加对卵丘细胞扩展和卵母细胞体外成熟率均有显著提高(84.8%、69.9%,P<0.05)。结果表明培养液中添加PMSG+HCG+FSH和ITS及选用凹槽皿、成熟培养液上覆石蜡油可提高猪卵母细胞IVM效果。 相似文献
9.
试验旨在研究没食子酸（gallic acid，GA）对黄牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响，进一步优化黄牛卵母细胞体外成熟体系。在卵母细胞体外成熟液（M液）中添加不同浓度没食子酸（0、10、30、50、100 μmol/L），成熟22~24 h后，统计卵丘扩展情况及卵母细胞成熟率；同时，对成熟的卵母细胞进行正常体外受精（IVF），统计早期胚胎的分裂率、囊胚率、囊胚卵裂球数及卵裂球细胞凋亡率。根据试验结果，选择最优浓度，使卵母细胞在含该浓度没食子酸的成熟液中成熟24 h后，检测其细胞内的活性氧水平（ROS）和总谷胱甘肽（TGSH）含量。结果显示，M液中添加30 μmol/L没食子酸组卵丘扩展分值和成熟率显著高于对照组（0 μmol/L）（P<0.05），其他处理组与对照组无显著差异（P>0.05）；成熟的卵母细胞体外受精后进行后续胚胎培养，其中10和30 μmol/L组的分裂率均显著高于对照组和100 μmol/L组（P<0.05），50和100 μmol/L组分裂率较对照组也有所提高，但差异不显著（P>0.05）；早期囊胚率统计发现，与对照组相比，30和100 μmol/L能够显著提高囊胚发育率（P<0.05），10和50 μmol/L浓度组则无显著差异（P>0.05）；与对照组相比，30、100 μmol/L没食子酸均能显著提高IVF胚胎的早期囊胚卵裂球数（P<0.05）；但囊胚卵裂球凋亡率与对照组无显著差异（P>0.05）；对卵母细胞内活性氧和总谷胱甘肽含量检测时，发现30 μmol/L没食子酸可显著降低细胞内活性氧水平（P<0.05），且显著提高总谷胱甘肽含量（P<0.05）。综上所述，在黄牛卵母细胞体外成熟液中添加适量的没食子酸能有效降低卵母细胞内活性氧水平，提高总谷胱甘肽含量，进而提高卵母细胞成熟的质量及其后续IVF胚胎发育能力。 相似文献
10.
将收集的猪COCs置于添加不同浓度(0.0,0.3,0.6,1.2μmol/L)甘草酸单铵盐(monoammonium glycyrrhizinate, MAG)的卵母细胞体外成熟培养液中培养46 h,统计成熟率，通过免疫荧光染色检测成熟卵母细胞ROS表达水平；对成熟卵母细胞体外受精，于胚胎培养液内体外培养48,120 h,分别统计体外受精胚胎卵裂率、囊胚率，并用Hochest荧光染色检测囊胚总细胞数；结合成熟率及IVF胚胎发育囊胚率选定最佳添加浓度，在体外成熟培养液中添加最适浓度MAG,以0μmol/L MAG为对照组，体外培养46 h后，利用免疫荧光染色检测猪成熟卵母细胞的线粒体膜电位水平和细胞凋亡水平。结果显示，与对照组相比，不同浓度MAG处理组猪卵母细胞体外成熟率均有所提高，但差异均不显著(P>0.05);不同浓度MAG添加均可降低猪卵母细胞ROS水平，与对照组相比，0.3,0.6μmol/L组差异显著(P<0.05),1.2μmol/L组差异极显著(P<0.01)。0.3μmol/L添加组显著提高了猪体外受精囊胚率(P<0.05),但不同MAG添加组对... 相似文献
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生长激素对体外培养猪COCs影响的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
研究了生长激素对猪COCs体外成熟过程中卵丘细胞扩展、卵丘细胞凋亡、卵母成熟及孤雌激活后卵裂的影响。结果表明:生长激素(STH)能够促进卵丘细胞扩展,抑制卵丘细胞凋亡,对卵母细胞的成熟和激活后卵裂呈现双重效应。在猪COCs培养液中添加0.15μg/mL STH成熟率(73.83%±1.80%)和卵裂率(64.76%±2.84%)显著高于对照组(mNCSU-23+PMSG(10IU/mL)+hCG(10 IU/mL))及添加0.01、0.05、0.1、2μg/mL STH组(P<0.05),在本实验中为猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。 相似文献
13.
《中国奶牛》2007,(Z1)
利用屠宰场采集的牛卵巢,研究了培养时间和不同激素组合对卵母细胞体外成熟的影响,结果表明:在成熟培养液中添加10μg/mLFSH、1μg/mLE_2的Ⅰ组(成熟率77.78%、卵裂率64.37%)和同时添加10μg/mLFSH、10μg/ mLLH、1μg/mLE_2的Ⅱ组(成熟率82.76%、卵裂率67.26%)与对照组(成熟率45.46%、卵裂率52.29%)相比,卵母细胞成熟率和卵裂率差异极显著(P<0.01),Ⅰ、Ⅱ两组之间,卵母细胞抽检成熟率、卵裂率虽无显著差异(P>0.05),但Ⅱ组卵母细胞成熟率、卵裂率分别比Ⅰ组提高了5.02%和2.89%。卵母细胞培养<20h、20h、24h、28h,成熟率分别为53.33%、77.77%、78.57%和71.43%,卵母细胞成熟率20h、24h、28h组与<20h组相比差异显著(P<0.05)。卵裂率20h、24h组(51.79%、58.16%)明显高于<20h组(38.24%)、28h组(36.98%)(P<0.05),但20h、24h组卵裂率差异不显著(P>0.05)。 相似文献
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为探讨抗氧化剂褪黑素(MLT)对牛卵母细胞体外成熟及胞浆单精子注射(ICSI)显微操作后早期胚胎体外发育的影响。在牛卵母细胞体外成熟培养液中,分别添加0 M、10~(-10) M、10~(-9) M、10~(-8) M MLT,通过统计核成熟率,评估不同浓度的MLT对牛卵母细胞体外成熟的影响。于24h后收集核成熟的牛卵母细胞进行显微操作,同时在显微操作液中分别添加0 M、10~(-10) M、10~(-9) M、10~(-8) M MLT,经体外培养后评估MLT对ICSI处理后胚胎体外发育的影响。结果表明:与对照组相比,在成熟液中添加10~(-9) M MLT(73.8%vs 81.3%)(P0.05)可显著提高牛卵母细胞成熟率;同时在显微操作液中添加10~(-9) M MLT,与对照组相比,牛卵母细胞ICSI后胚胎体外发育的卵裂率(81.3%vs 85.5%)差异不显著(P0.05),但囊胚率(14.3%vs 22.6%)显著提高(P0.05)。因此,添加10~(-9) M MLT有助于优化ICSI技术体系,提高显微授精后胚胎体外生产效率。 相似文献
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16.
为探讨胰岛素(Insulin)和白血病抑制因子(Leukemia inhibit factor,LIF)对猪卵母细胞体外成熟(IVM)和猪孤雌激活胚胎(PAEs)的影响,在卵母细胞体外成熟或者胚胎培养基中添加Insulin和LIF,研究卵裂率和囊胚率的变化。结果:添加了5μg/mL Insulin后猪卵母细胞体外成熟效果显著提高,但成熟后孤雌激活发育能力与非添加组相近;而胚胎培养基中添加Insulin对孤雌胚的卵裂和囊胚的形成也没有明显促进作用;添加1 000 U/mL的LIF后,卵母细胞核成熟率没有明显提高,反而孤雌激活后囊胚率急剧下降,但对卵裂率以及囊胚总细胞数影响不大;在胚胎培养基中添加LIF后,孤雌胚的卵裂和囊胚形成并没有明显的提高。表明:Insulin对卵母细胞体外成熟有益,但是对孤雌胚胎的最佳处理程序还需要摸索;本文所采用的LIF处理对猪卵体外成熟以及孤雌胚胎体外发育没有帮助,还需要进一步研究其他浓度和处理程序对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活胚胎发育能力的影响。 相似文献
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实验通过外源性添加不同浓度的卵泡抑素(FST),研究FST对牛卵母细胞体外成熟和受精卵体外发育的影响。结果表明:在以TCM199为基础培养液的卵母细胞培养体系中添加5、10、20 ng/mL FST对卵母细胞的成熟率无显著影响(P>0.05),但10 ng/mL FST可显著降低囊胚胎率7.5%、5.7%、4.6%(P<0.05)。在共培养体系下的胚胎培养液中添加10、20 ng/mL FST,受精卵的30 h卵裂率和囊胚率显著高于对照组(P<0.05);5、10、20 ng/mL的FST均可以显著提高受精卵的总卵裂率(P<0.05)。 相似文献
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本研究旨在探讨褪黑素对猪卵母细胞体外成熟及多精受精的影响。在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加1 nmol/L褪黑素或1 nmol/L褪黑素+1 nmol/L Luzindole作为试验组,不添加褪黑素及Luzindole作为对照组,检测卵母细胞核成熟率、多精受精率,并观察体外受精胚胎的发育能力及与多精受精相关的细胞器分布情况。结果表明：各组间卵母细胞核成熟率及体外受精胚胎的卵裂率无显著差异;褪黑素组的猪卵母细胞多精受精发生率较其他2组降低（P<0.05）,囊胚形成率提高（P<0.05）,同时猪卵母细胞皮质颗粒及高尔基体的正常分布情况得到显著改善。结果证明,在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加1 nmol/L褪黑素可显著改善卵母细胞成熟质量,抑制多精受精的发生。 相似文献
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牛卵泡液对牛卵母细胞体外成熟及受精胚发育力的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
研究了牛卵母细胞体外成熟液和胚胎培养液中添加不同浓度的牛卵泡液对其体外成熟率和受精胚发育力的影响。结果表明:添加10%牛卵泡液的实验组,卵母细胞的成熟率与血清对照组没有显著差异(P>0.05);添加10%卵泡液的实验组与血清对照组相比,卵裂率和囊胚率没有显著差异,却显著高于添加5%和20%牛卵泡液的实验组(P<0.01),且各实验组囊胚内细胞数差异不大(P>0.05)。因此,用10%的牛卵泡液可以取代成熟液和胚胎培养液中的血清,并可降低实验成本。 相似文献
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为探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)的添加浓度及脱卵丘细胞时间对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响.试验通过在体外成熟液中添加不同浓度(0、10、15、20、30、40 ng/mL)的EGF来研究其对培养44 h的卵母细胞成熟率以及孤雌胚胎发育的影响;在培养开始后的不同时间(18、24、38、44 h)进行脱卵丘细胞处理来研究不同时间脱卵丘处理对培养44 h的卵母细胞成熟率以及孤雌胚胎发育的影响.结果表明,成熟培养基中添加10 ng/mL EGF能显著提高卵母细胞的卵裂率和囊胚率(P <0.05).共培组和独培组卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞成熟率均低于44 h,但差异不显著(P >0.05);共培组卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞的卵裂率和囊胚率显著高于培养44 h(P <0.05);独培组卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞的卵裂率与44 h无显著差异(P >0.05),但囊胚率显著高于培养44 h后脱卵丘细胞(P <0.05).添加10 ng/mL EGF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育较好;卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞可提高孤雌胚胎早期发育能力. 相似文献