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禽流感血凝-血凝抑制试验的质量控制 总被引：1，自引：0，他引：1
禽流感血凝-血凝抑制试验是目前我国各地动物防疫监督机构、出入境检验检疫部门和养殖场对禽鸟进行禽流感疫苗抗体水平监测广泛采用的试验方法. 相似文献
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血凝和血凝抑制试验是目前较为广泛使用的监测禽流感抗体水平的一种试验方法.对血凝和血凝抑制试验中的影响因素及对策进行了阐述. 相似文献
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目前禽流感抗体水平监测采用GBT18936-2003的方法,此方法中要求采用1%鸡红细胞来进行血凝和血凝抑制试验,以测定禽流感的抗体水平,此方法较适用于免疫鸡相应抗体水平的测定[1-3],用于鹅抗体检测时常出现非特异凝集现象,试验结果很难判定。鉴于此,在利用血凝抑制试验进行血清抗体检测之前,有必要对血清中非特异性血凝抑制因子与非特异性凝集因子(非病毒性凝集因子)加以祛除。本试验对免疫后的鹅血清HI抗体检测方法进行探讨,寻求适合鹅血清HI抗体检测的方法。 相似文献
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禽流感血凝抑制试验（HI试验）的原理是禽流感病毒在适宜的条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,利用这种特性检测血清中禽流感抗体的试验就叫禽流感血凝抑制试验。禽流感血凝抑制试验的方法是将受检血清与标定好的抗原发生充分反应,再加入红细胞作用,因为其快捷、成本较低、便于操作、能够处理大量的样品,所以成为基层动物疫病实验室对禽流感诊断及免疫状态监测的重要手段,但禽流感血凝抑制试验能否成功,影响因素很多,如果不加强质量控制,极易造成试验结果偏差,甚至误判,给禽流感的防止工作带来不便。笔者在长期的实验室检测中积累了一些经验,愿与大家分享探讨。
1试验器材的质量控制 相似文献
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自主活动鸟类禽流感及新城疫的生态学与流行病学调查分析 总被引：6，自引：1，他引：6
在2004年初H5亚型禽流感在中国内地引起暴发前后，于湖北、广西二疫区市县的生态系中，自健康的鹰、鸽子、野鸭和鹌鹑中采集了54份血清，应用血凝抑制试验（HI）对其进行了血清学检测，并将获得的血清学检测数据进行了统计学分析。分析结果显示，在总共采集的54份血清样品中，抗新城疫病毒（NDV）抗体、抗It6亚型禽流感病毒（H6）抗体、抗H9亚型禽流感病毒（H9）抗体、抗H5亚型禽流感病毒（H5）抗体阳性率分别为64．8％、64．8％、75．9％、29．6％。推断这一时期新城疫病毒（NDV）、H6亚型禽流感病毒（H6）、H9亚型禽流感病毒（H9）和H5亚型禽流感病毒（H5）共循环于该生态系中，其中新城疫病毒、H9、H6亚型禽流感病毒长期、稳定循环于该生态系中，为该生态系主要流行血清型。血凝抑制试验检测结果发现，抗H5亚型禽流感病毒抗体效价较低，最高仅为640，其阳性率为29．6％，推断其可能为新近传入的病毒或新近重组变异出现的新病毒、与该次流感暴发相关的新病毒，这一推断还有待于通过对病毒基因序列的分析而做进一步验证：另外，新城疫病毒在该生态系中的稳定循环，构成了对家禽持久、潜在的威胁。对于自1994年以来，长期稳定循环于我国生态系及家禽中的H9亚型禽流感病毒则仍然是以G9-like为优势亚组。本研究结果还提示我们，对我国自主活动鸟类的生态系中抗禽流感病毒抗体的监测是预警、预报我国家禽流感暴发的有效途径，也是十分必要的，同时，血清学的检测结果为我们进一步的分子水平的分析研究提供了明确的靶向。 相似文献
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禽流感严重危害我国的养禽业,疫苗免疫是目前预防和控制禽流感发生的最有效手段,免疫后抗体水平的高低直接关系到实际的免疫效果,因而免疫抗体监测操作技术的准确性、有效性、可靠性对禽流感防控工作起着不可忽视的作用。禽流感免疫抗体水平监测一般采用血凝和血凝抑制试验(HA-HI试验),经济、操作简便和容易量化是该试验方法的优点,但影响试验结果的因素也较多,导致HA-HI试验结果失真,下面将就禽流感血凝和血凝抑制试验的影响因素浅析如下。 相似文献
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在扬州科农扬州鹅发展有限公司种鹅场和菱塘回族乡夏桥养殖小区随机抽取170份免疫血清样品（种鹅7批140份血清,苗鹅3批30份血清）,按照国家标准采用血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验检测免疫抗体水平。结果表明：扬州科农扬州鹅发展有限公司种鹅场和菱塘回族乡夏桥养殖小区的种鹅免疫抗体合格率平均为87．8％、苗鹅免疫抗体合格率平均为26．7％。说明基础免疫后加强免疫可保证种鹅的禽流感抗体保持较高水平;其存栏禽群免疫抗体合格率达到农业部规定的70％以上的要求;苗鹅母源抗体水平较低,应在10～14日龄进行高致病性禽流感首免,使得苗鹅的禽流感抗体达到保护率水平。 相似文献
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血凝抑制(HI)抗体水平监测准确性的体会 总被引：1，自引：0，他引：1
禽流感（AI）、新城疫（ND）是威胁养鸡业发展较为严重的一种疾病。该病在全国范围内普遍存在。血凝抑制（HI）试验是监测AI、ND免疫状态的一种简便、快速的血清学方法。本人从事此项工作十余年，为了提高鸡禽流感、新城疫HI抗体测定的准确性，对其若干影响因素作了分析和试验，提出几点体会供参考。 相似文献
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家禽对禽流感疫苗免疫效果的研究多有报道,但现有的禽流感疫苗对野生禽类的有效性尚所知甚少。本文以白冠长尾雉、蓝鹇、红腹锦鸡、白腹锦鸡4组野生雉鸡类为研究对象,以家鸡为对照,进行禽流感H5N1亚型疫苗免疫。利用血凝（HA）及血凝抑制（HI）实验,分别在首免日、免后10 d、20 d、40 d、60 d、90 d及120 d监测禽类免疫后抗体水平变化。结果显示,4组野生雉鸡类均在疫苗接种后产生禽流感抗体,且达到具保护力的抗体水平。通过免疫后抗体水平的跟踪研究,证明商品化禽流感疫苗对野生雉鸡类动物有效。 相似文献
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使用重组禽流感病毒灭活疫苗和禽流感-新城疫重组二联活疫苗对鸡禽流感进行免疫攻毒试验,通过血凝和血凝抑制(HI)试验技术检测机体内两种不同剂型疫苗的禽流感抗体水平,从中选出最佳免疫效果的疫苗。结果显示,禽流感病毒灭活疫苗优于禽流感-新城疫重组二联活疫苗,建议在防控禽流感时使用前者。 相似文献
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检测禽流感病毒抗体的重组核蛋白间接ELISA方法的建立 总被引：9，自引：3，他引：9
以大肠杆菌系统表达的H9N2亚型禽流感病毒（AIV）核蛋白（NP）为抗原，建立了禽流感间接酶联免疫吸附试验抗体检测技术（NP—ELISA）。对263份待检血清（包括临床收集的243份血清和20份H9N2亚型AIV免疫鸡阳性血清）进行检测，NP—ELISA与琼脂免疫扩散试验（AGP）的总符合率为83．3％，与血凝抑制试验（HI）的总符合率为92％。特异性试验表明，NP—ELISA方法可以检测H5、H7和H9亚型AIV特异性抗体，检测为阳性的血清样品能够被阳性鸡胚尿囊液阻断。敏感性试验证实，NP—ELISA最早可以检测鸡感染后7d的血清样品，并于感染后10d确定100％血清阳性，而AGP检测直到首免后21～28d才出现部分血清阳性，HI检测直到10～14d才出现部分血清阳性，并且NP-ELISA要比HI敏感4～40倍。试验证明，NP—ELISA是检测AIV血清型特异性抗体的一种特异、敏感、快速、经济的血清学检测技术。 相似文献
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禽流感（Avian Influenza,AI）是由A型流感病毒引起的禽类的一种急性高度致死性的传染病,尤其是高致病性禽流感（HPAI）,严重威胁着养禽业的生产。实行强制免疫是我国防控H5亚型禽流感的一项重要措施,血凝抑制试验（HI）检测禽流感抗体是对免疫效果进行评价的主要手段。随着H5亚型禽流感疫苗种毒株的不断更新, 相似文献
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对40~45日龄鸽群实施新城疫低等毒力活疫苗（La系）免疫与新城疫低等毒力活疫苗（La系）加H5N2亚型禽流感灭活疫苗免疫效果的对比试验，首免后21 d进行二次免疫，并采用血凝抑制试验对80份血清进行ND和AIV H5血清抗体跟踪检测。结果表明，使用新城疫低等毒力活疫苗（La系）免疫的鸽群首免后7~21 d，ND免疫抗体随着日龄的增加而升高，但不能达到有效保护水平；首免后21 d进行二次免疫，跟踪监测到二免后35 d，ND免疫抗体呈波浪式上升；使用新城疫低等毒力活疫苗（La系）加H5N2亚型禽流感灭活疫苗免疫的鸽群抗体水平总体趋势基本相同，但ND免疫抗体水平波动较大，是否与同时免疫AIV H5有关则需要进一步试验探讨。 相似文献
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按照国家一级标准物质要求和禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程规定的抗原制备方法,研制了一批禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原国家参考品,用于检测禽流感病毒（H5亚型）制品生物效价和血凝抑制操作过程中的校验。该批抗原经过8家单位对其协作标定后对结果进行统计学分析,确定该批禽流感抗原的血凝效价为1：80。另对所研制的禽流感抗原均一性、稳定性、无菌检验、剩余水分测定、真空度测定等各项指标进行检测,结果均符合禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程和国家一级标准物质要求。说明该禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原可以作为国家参考品。 相似文献