猪胸膜肺炎放线杆菌转铁结合蛋白B F190A突变及免疫原性     

时间  朱玉红  甘玲  黄与何  马康闯  周进  闫智豪  刘娟  郭建华 《中国兽医学报》2024,(3):458-464

猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)是造成猪肺炎和胸膜炎的重要病原菌之一,其病死率高达80%～100%。为了寻找APP转铁结合蛋白B(transferrin binding protein B,TbpB)与猪转铁蛋白(transferrin, Tf)相互作用的关键氨基酸,以达到为APP铁摄取机制研究及相关疫苗开发奠定基础的目的,本研究在对野生型TbpB进行序列分析、三维结构建模、克隆的基础上,通过GRAMM-X分子对接软件在线预测APP TbpB与猪Tf结合的关键氨基酸,利用重叠延伸PCR(SOE PCR)技术构建突变质粒,ZYM-5052半乳糖自诱导培养基诱导大肠杆菌表达该突变蛋白后与猪Tf进行斑点结合试验,野生型TbpB、突变TbpB以及PBS分别免疫小鼠,采用间接ELISA法检测不同阶段小鼠血清中特异性抗体的水平。分子对接结果显示,预测的关键氨基酸为第190位苯丙氨酸,质粒测序结果显示,已成功将编码190位苯丙氨酸的密码子突变为编码丙氨酸的密码子;斑点结合试验结果显示,突变TbpB与猪Tf不再发生结合反应;小鼠免疫试验结果表...  相似文献   

1株山羊源海藻糖比伯斯坦杆菌的分离鉴定及药敏试验     

任绍科  何深宏  李小燕  刘威  周作勇  曹立亭  郭建华  程方俊 《中国兽医学报》2019,(10):1953-1958

为确定引起山羊肺炎的病原,本研究从病死山羊肺脏中分离纯化获得1株细菌,通过生化试验和分子生物学方法鉴定为海藻糖比伯斯坦杆菌。利用生物信息学软件MEGA6.0对巴氏杆菌科5个属细菌的白细胞毒素基因(lktA)和RNA聚合酶β亚基基因(rpoB)分别构建遗传系统发育树,可知分离株与海藻糖比伯斯坦杆菌(AF314526.2、CP003745.1、CP006955.1等)的lktA基因相似性最高,位于同一簇内;分离株和海藻糖比伯斯坦杆菌(CP006956.1、JACI01000002.1、CP003745.1等)的rpoB基因聚类为一簇,相似性最高;而与和葡萄糖苷曼氏杆菌(KU986490.1)的rpoB基因相似性最低。药敏试验显示,该菌对头孢噻肟、头孢他啶和环丙沙星等抗菌药物最敏感,对多西环素、阿莫西林和林可霉素等耐药。本研究为该菌致病机理的研究与疫苗的研发奠定了基础,也为临床用药提供了参考依据。  相似文献   

波尔山羊伪鼻疽伯氏菌感染的诊治     

陶立  彭昊  韦志锋  兰美益  李军  秦若甫  周彦明  陈泽祥  杨威 《中国兽医杂志》2011,47(2)

伪鼻疽伯氏菌(B.pseudomallei)又名类鼻疽假单胞菌或伪鼻疽杆菌,是人和动物类鼻疽病的病原。自然情况下不但可感染绵羊、山羊、猪、牛、马、驴、骡、犬、猫、兔等多种家畜,家鼠及野生啮齿动物,人  相似文献   

1株黄牛源多源曼氏杆菌的分离鉴定与转铁结合蛋白B结构预测     

朱玉红  张疏桐  李志玲  徐雨蓓  杨雪赢  张贵东  韦国山  甘玲  郭建华 《中国兽医学报》2023,(4):706-712

为确定引起肺炎病死黄牛的病原，从牛鼻拭子中分离纯化得到1株细菌，经生化试验和分子生物学方法鉴定为多源曼氏杆菌。利用生物信息学软件MEGA7.0对巴氏杆菌科细菌的16S rDNA和巴氏杆菌科、奈瑟菌科细菌的转铁结合蛋白B(TbpB)进行系统进化分析，并对TbpB进行了结构预测。结果显示，分离株16S rDNA基因序列与牛曼氏杆菌ZY190616株、肉芽肿曼氏杆菌ATCC49244株、多源曼氏杆菌10299株相似性最高，位于同一簇内，相似性超过97%;分离株TbpB序列与溶血曼氏杆菌、多源曼氏杆菌相似性较高，位于同一簇内，但与其他菌的TbpB序列相似性较低；TbpB结构模拟显示其序列与已经测定结构的溶血曼氏杆菌TbpB序列相似性较高。药敏试验显示该菌氨基糖苷类、β-内酰胺类抗生素有较强的耐药性，对头孢哌酮和氟喹诺酮类药物敏感小鼠致病性试验证实该分离菌株致死量约为2×10⁹CFU。结果表明，该分离株为多源曼氏杆菌，其TbpB序列与溶血曼氏杆菌和多源曼氏杆菌相似性较高。本研究为后续毒力基因相关研究和疫苗开发提供了理论基础。  相似文献   

山羊巴氏杆菌病的诊治     

郑宏伟  马育兵 《中兽医医药杂志》2004,23(2):43-44

猪、牛、禽巴氏杆菌病主要由多杀性巴氏杆菌引起,羊由溶血性巴氏杆菌引起.本病多发生于绵羊,其次为山羊.  相似文献   

鸡李斯特杆菌病的病理学诊断   总被引：1，自引：1，他引：0  

顾玉芳  张莹  梁雄雁  刘超  钟蓓 《中国家禽》2008,30(17)

李斯特杆菌病是一种散发性人畜共患的传染,其病原李斯特杆菌除感染牛以外,还见于猪、绵羊、山羊等多种动物,鸡发病较少发现,其病理学变化少有报道.笔者最近在湖北荆州市某一个体饲养七彩山鸡的种鸡场发现22日龄左右的雏鸡陆续死亡,经确诊为李斯特杆菌病.  相似文献   

麦洼牦牛SRY基因克隆及序列分析     

刘仲娜  钟金城  柴志欣  马志杰  曾贤彬  宋乔乔 《中国畜牧兽医》2013,40(12):5-11

SRY是Y染色体上具体决定生物雄性性别的基因片段,是多数哺乳动物性别决定基因之一。本试验采用克隆测序SRY基因并结合生物信息学对其序列进行分析,利用软件Codon W分析麦洼牦牛、普通牛、绵羊、山羊、猪、小鼠、鸡和人该基因编码区的密码子偏好性。克隆测序得到SRY基因序列含1个690 bp的开放阅读框,共编码229个氨基酸;其编码区核苷酸序列与普通牛、绵羊、山羊、猪、小鼠、鸡、人相应序列间的一致性分别为99.9%、93.9%、91.2%、76.5%、43.3%、21.4%、69.1%。经聚类分析,麦洼牦牛首先与普通牛聚在一起,绵羊与山羊聚为一类,这两类相聚后再依次与猪、人、小鼠相聚,最后与鸡聚为一类,其结果与以往的生物学分类结果一致。该基因编码的蛋白质分子式为C₁₁₅₅H₁₈₂₇N₃₅₁O₃₄₈S₁₁,相对分子质量为2655.0,理论等电点PI为9.55,亲水性平均数为-0.855。其密码子偏好性分析显示,T3_s为0.2905、C3_s为0.3240、A3_s为0.3728、G3_s为0.2963,第3位碱基中出现G和C占第3位碱基总量的48%,同义密码子数为61。上述数据表明麦洼牦牛SRY基因编码序列与普通牛、绵羊、山羊、猪、人具有较高的一致性,在物种进化过程中较为保守。该基因对含A的密码子有较高的偏爱性,尽量避开以G结尾的密码子,且其所编码的蛋白质为亲水性蛋白。  相似文献   

蛋白A/G在PPR H蛋白ELISA中的应用研究     

张喜悦  王志亮  刘春菊  赵昆  宁浩然  张志东  范伟兴  何昭阳 《中国动物检疫》2008,25(3):32-33

分别以山羊、绵羊和牛的阳性血清和阴性血清作为待检血清,分别以酶标蛋白A/G、酶标兔抗山羊抗体、酶标兔抗绵羊抗体和酶标兔抗牛抗体作为酶标二抗,进行以小反刍兽疫(PPR)裂解蛋白为抗原和基于抗血凝素(H)蛋白的单克隆抗体的PPRH蛋白酶联免疫吸附(ELISA)试验。结果四种酶标抗体均分别能使山羊、绵羊和牛阳性血清的百分抑制率达到100。在阳性血清百分抑制率为100时,检测山羊时酶标蛋白A/G、酶标兔抗山羊抗体的百分抑制率分别为17、12,检测绵羊时酶标蛋白A/G、酶标兔抗绵羊山羊抗体的百分抑制率分别为20、16,检测牛时酶标蛋白A/G、酶标兔抗牛抗体的百分抑制率分别为14、13。结果认为,酶标蛋白A/G而且与酶标抗抗体相比,具有本底低的优点,在PPRH蛋白ELISA试验中可以同时应用于检测山羊、绵羊和牛血清并具有较好效果。  相似文献   

乳胶凝集试验快速检测副猪嗜血杆菌   总被引：1，自引：0，他引：1  

曹芸  陈品  何启盖  张坤  李文洁  柴艳东 《动物医学进展》2009,30(12):8-13

利用原核表达并经过纯化的副猪嗜血杆菌TbpB N端蛋白及人工合成的特异性多肽制备单克隆抗体,经碳化二亚胺(EDC)将纯化后的单克隆抗体IgG与羧化乳胶共价偶联,并对偶联乳胶的IgG含量及偶联时间等条件进行合理选择,建立了快速检测副猪嗜血杆菌的乳胶凝集试验方法.利用LAT方法检测148株副猪嗜血杆菌疑似菌株,参考16 S rRNA-PCR方法的结果,符合率为83.1%,且致敏乳胶不与临床常见菌株发生凝集反应.结果表明,此检测方法具有操作简便、快速、特异性高的特点,便于在基层推广使用,为副猪嗜血杆菌的诊断和有效防治提供了参考和依据.  相似文献   

布氏杆菌病活疫苗(S2)不同接种方法免疫效果观察     

张岩  史秀丽  张磊 《畜牧与兽医》2013,45(9)

布氏杆菌病活疫苗(S2株)系用猪种布氏杆菌S2株(CVCC 70502)接种适宜培养基培养,收获培养物,加适宜稳定剂,经冷冻真空干燥制成.它作为活菌苗具有使用范围广和使用方便的特点.可供猪、牛、山羊和绵羊等多种动物免疫使用,可以使用皮下或肌肉注射、口服免疫多种方法接种.为了测试布氏杆菌病活疫苗(S2)不同接种方法的实际免疫效果,特以绵羊为例进行了临床试验观察,现报告如下.  相似文献