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绝大多数紫菜的生活史中都具有典型的世代交替现象,除了人们熟悉的叶状体(配子体)世代外,还有微小的丝状体(孢子体)世代。丝状体世代是二倍体世代,遗传性状稳定,是紫菜生产和研究中保种的重要形式[1]。由于紫菜中海藻多糖含量较高,常用的植物基因组DNA提取方法不能完全去除多糖,高纯度紫菜基因组DNA的获得比较困难。Hong等[2-4]提出并改良了用于紫菜DNA提取的LiCl法;贾建航等[5]用改进的SDS法提取紫菜丝状体基因组DNA,并进行了RAPD分析;郭宝太等[6]也对紫菜基因组DNA提取进行了报道。这些方法都需要大量的紫菜组织,实际研究中… 相似文献
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四种紫菜自由丝状体基因组DNA提取及酶切 总被引：1，自引：0，他引：1
绝大多数紫菜的生活史中都具有典型的世代交替现象,除了人们熟悉的叶状体(配子体)世代外,还有微小的丝状体(孢子体)世代。丝状体世代是二倍体世代,遗传性状稳定,是紫菜生产和研究中保种的重要形式[1]。由于紫菜中海藻多糖含量较高,常用的植物基因组DNA提取方法不能完全去除多糖,高纯度紫菜基因组DNA的获得比较困难。Hong等[2-4]提出并改良了用于紫菜DNA提取的LiCl法;贾建航等[5]用改进的SDS法提取紫菜丝状体基因组DNA,并进行了RAPD分析;郭宝太等[6]也对紫菜基因组DNA提取进行了报道。这些方法都需要大量的紫菜组织,实际研究中… 相似文献
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简单、高效的抽提DNA是进行分子生物学研究的基础。选取三种不同海藻纲中的条斑紫菜、条浒苔、钝顶螺旋藻为材料,通过采用改良的CTAB法、LiCl法及试剂盒法抽提基因组DNA并进行比较,以找出适用于各种藻类DNA提取的快速有效方法。结果表明适当提高裂解液与样品比能有效降低材料中多糖与蛋白质、酚类等杂质,提高DNA纯度和得率。经过修改后,三种方法都能有效抽提DNA,其中试剂盒法省时,所得到的DNA纯度最高,但得率较低且成本高。CTAB法与LiCl法也均能得到高质量的DNA,但LiCl法相对而言更简捷有效。此外,抽提前的材料预处理对DNA质量有明显影响。 相似文献
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简单、高效的抽提DNA是进行分子生物学研究的基础。选取三种不同海藻纲中的条斑紫菜、条浒苔、钝顶螺旋藻为材料,通过采用改良的CTAB法、LiCl法及试剂盒法抽提基因组DNA并进行比较,以找出适用于各种藻类DNA提取的快速有效方法。结果表明适当提高裂解液与样品比能有效降低材料中多糖与蛋白质、酚类等杂质,提高DNA纯度和得率。经过修改后,三种方法都能有效抽提DNA,其中试剂盒法省时,所得到的DNA纯度最高,但得率较低且成本高。CTAB法与LiCl法也均能得到高质量的DNA,但LiCl法相对而言更简捷有效。此外,抽提前的材料预处理对DNA质量有明显影响。 相似文献
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[目的]采用不同方法对大豆基因组DNA进行提取,为大豆基因组DNA的提取提供参考。[方法]采用CTAB法、SDS法和高盐低pH值法对大豆基因组DNA进行提取,对提取的DNA进行光密度、紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳和DNA限制性内切酶图谱等的检测。[结果]光密度和光谱检测结果表明,SDS法的提取量和纯度均优于CTAB法和高盐低pH值法;琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,SDS法提取的基因组DNA谱带较CTAB法和高盐低pH值法提取的基因DNA谱带粗、亮、重复性好;限制性内切酶检测结果表明,3种方法所得基因组DNA均能被胁谢Ⅲ和EcoRI酶切,但SDS法所得基因组DNA的酶切效果最好。l结论ISDS法的提取效果明显优于CTAB法和高盐低pH值法。 相似文献
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研究了我国主要经济红藻之一条斑紫菜藻红蛋白各种粗提方法。采用"溶胀+组织捣碎"法破碎条斑紫菜叶状体细胞,依次研究活性炭、利凡诺等化学试剂和等电点、溶液浓度、pH、温度、差速离心等物理条件对条斑紫菜破碎液中藻红蛋白纯度和产率的影响。结果显示:小量活性碳与利凡诺的结合使用不能提高藻红蛋白纯度,单独使用活性碳,随用量提高,其纯度上升,在活性碳用量是紫菜用量的1/10时提纯效果最佳。藻红蛋白等电点沉淀后纯度反而下降,但pH调节与硫酸铵沉淀结合可显著提升纯度,且与原溶液浓度成正比,藻红蛋白纯度最高达到1.35。此外,盐析过程中差速离心还可继续提升纯度,达到1.42,而通过控制温度来变性蛋白的方法不能达到提纯的效果。实验为进一步改进优化条斑紫菜藻红蛋白粗提做了铺垫。 相似文献
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甜菜总DNA不同提取方法的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
采用CTAB法、SDS法、改进CTAB法和改进SDS法提取甜菜总DNA,并对提取得到的DNA进行质量鉴定和PCR扩增效果检测.结果表明：用改进的CTAB法提取的甜菜总DNA OD260/OD280在1.8左右,DNA纯度好,产率高,CTAB法和改进的SDS法产率次之,SDS法最低.同时对改进的CTAB法的提取条件进行优化,即用5.0 mL细胞提取液,0.8 mL无水乙醇, 0.6倍体积的异丙醇,可从1.0 g甜菜叶片中提取到高质量高纯度的DNA 764 μg/g. 相似文献
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氮磷浓度对条斑紫菜细胞培养的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
氮和磷对紫菜的细胞生长和发育有很大的影响，本文讨论了不同氮源、不同氮和磷的浓度和不同细胞密度笃条斑紫菜细胞培养的存活率和细胞生长的影响。试验结果显示，对于细胞生长用ＮＯ３－Ｎ作为氮源估于用ＮＨ４－Ｎ的。前３天培养的细胞对Ｎ／Ｐ浓度的变化有一些忍耐性，３天后Ｎ／Ｐ的浓度对细胞存活率有影响，当Ｎ／Ｐ浓度为１８－２０／１．８－２．０ｍｇｌ＾－１时细胞存活率最高，第６天时，可达到７７－８０％，细胞分裂速度 相似文献
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氮和磷对紫菜的细胞生长和发育有很大的影响，本文讨论了不同氮源、不同氮和磷的浓度和不同细胞密度笃条斑紫菜细胞培养的存活率和细胞生长的影响。试验结果显示，对于细胞生长用ＮＯ３－Ｎ作为氮源估于用ＮＨ４－Ｎ的。前３天培养的细胞对Ｎ／Ｐ浓度的变化有一些忍耐性，３天后Ｎ／Ｐ的浓度对细胞存活率有影响，当Ｎ／Ｐ浓度为１８－２０／１．８－２．０ｍｇｌ＾－１时细胞存活率最高，第６天时，可达到７７－８０％，细胞分裂速度 相似文献
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以日本血吸虫的惟一中间宿主钉螺为对象,研究不同方法对其总DNA提取效果的影响.结果表明,SDS法和CTAB法可以快速、简便地从新鲜钉螺和钉螺的乙醇固定标本中提取总DNA.以该DNA为模板.通过相应引物成功扩增出线粒体CO1基因片段.提取DNA前钉螺标本用TE和PBS做预处理,提高了产品DNA的质量. 相似文献
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为从富含次生代谢物的光皮桦Betula luminifera 嫩叶中获得高质量DNA , 设计了5 种先提核再提DNA 的CTAB 法Ⅰ , CTAB 法Ⅱ , CTAB 法Ⅲ , CTAB 法Ⅳ及改进的SDS 法, 并以常规CTAB 法为对照。用不同的方法就光皮桦基因组DNA 进行了提取, 采用琼脂糖凝胶电泳检测、A260/ A280值测定、限制性内切酶处理和PCR 扩增等方法对所提的DNA 进行了比较分析。结果表明:实验设计的5 种改进方法提取的DNA 质量要比常规法的好, 但提取的效果差异较大。其中改进的CTAB 法Ⅰ是提取光皮桦基因组DNA 的最佳方法;PCR 扩增结果表明, 不同的DNA 提取方法会影响PCR 带型的变化。图3 表1 参13 相似文献
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【目的】研究木瓜蛋白酶对条斑紫菜R-藻红蛋白的抗氧化性和肿瘤增殖抑制活性的影响。【方法】采用超声波破壁法提取条斑紫菜R-藻红蛋白,用DEAE柱层析法纯化后进行木瓜蛋白酶酶解,通过正交试验设计,以还原力A700为考察指标确定酶解反应的最佳工艺参数,进一步测定获得的R-藻红蛋白及其酶解物的还原力、清除羟自由基能力和对人肉瘤细胞U2O及人肝癌细胞HepG-2的肿瘤增殖抑制活性。【结果】R-藻红蛋白的最佳酶解工艺条件为：木瓜蛋白酶添加量25 000 U•g-1,pH 7.0,温度50℃,酶解时间4 h。在此条件下,R-藻红蛋白酶解物还原力为0.573,较未酶解的R-藻红蛋白提高了2.35倍;清除羟自由基能力为51.03%,较未酶解的R-藻红蛋白活性提高了3.22倍。随着浓度的增加,R-藻红蛋白及其酶解物对人肉瘤细胞U2O和人肝癌细胞HepG-2抑制生长作用增强。R-藻红蛋白对人肉瘤细胞U2O抑制作用的IC50值为2 431.32 μg•mL-1,其酶解物IC50值降低为1 271.46 μg•mL-1。R-藻红蛋白对肝癌细胞HepG-2抑制作用的IC50值为1 593.61 μg•mL-1,其酶解物IC50值降低为512.05 μg•mL-1。【结论】经木瓜蛋白酶酶解后,R-藻红蛋白酶解物具有较强的抗氧化和抑瘤活性。酶解技术可作为进一步提高R-藻红蛋白生物活性的有效手段。 相似文献
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[目的]筛选一种适合牡丹、芍药基因组DNA的提取方法。[方法]以新鲜的牡丹、芍药叶片为材料,采用CTAB法和SDS法提取基因组DNA,通过紫外光谱分析法、琼脂糖凝胶电泳及PCR扩增等检测方法对牡丹、芍药基因组DNA的提取方法进行筛选。[结果]在牡丹、芍药基因组DNA的提取过程中,叶片内的酚类、色素、丹宁、糖类等物质与DNA结合,影响DNA的提取质量。在这两种DNA提取方法中,SDS法略好于CTAB法。SDS法DNA得率虽低,但其纯度高,去糖去蛋白等杂质比较干净,且在未加RNA酶的情况下,RNA污染较少,在进行PCR扩增时,能得到比较理想的产物。[结论]取材时间是影响DNA提取质量的关键因素之一。在提取牡丹、芍药基因组DNA时应该取完全展开的幼嫩叶片。 相似文献
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通过海区采样，运用光镜和电镜观察等实验方法，研究了条斑紫菜叶状体色落症，并对患病紫菜加工成的干品进行了初步的品质分析。光镜检查结果表明，患病藻体细胞的液泡很大，色素体萎缩或是挤向细胞边缘，藻体基部死亡细胞较多；电镜下患病藻体细胞的红藻淀粉颗粒增多。品质分析显示，患色落症干紫菜的总糖含量明显高于正常干紫菜，粗蛋白、脂肪、色素和游离氨基酸等指标均比正常干紫菜低，尤其是三种呈味氨基酸（Asp，Glu和Ala）所占比例非常低，由此造成紫菜品质低劣，对紫菜质量的影响较大。对健康藻体和患病藻体进行红外线活体吸收光谱的测定结果也表明，患色落症的藻体色素含量极低。用添加营养盐的海水对患色落症的藻体进行培养，发现6d后藻体色泽均有不同程度的恢复，藻体细胞也逐渐恢复到正常。 相似文献