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1.
国内外克伦特罗ELISA检测试剂盒评价 总被引：11，自引：6，他引：5
根据B/B0-50%抑制浓度、检测范围、标准溶液浓度梯度、板内变异、板间变异、样品添加检验、实际样品检验等方面的比较结果对两种克伦特罗ELISA检测试剂盒(A: 中国兽医药品监察所研制, B: 德国 r-Biopharm公司研制)进行评价。结果表明,试剂盒A的50%抑制浓度低于1.0 ng/mL; 检测范围在0.10~3.0 ng/mL之间;标准溶液浓度梯度中包括1.0 ng/mL这一限定值;板内变异系数小于13.7%,板间变异系数小于8.8%;样品回收率在70%~110%之间;实际样品检验和试剂盒B检样的阳性符合率为95.5%。试验证明,试剂盒A与试剂盒B的水平相当。 相似文献
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为了验证ELISA方法检测猪尿中克伦特罗残留量的可行性,采用ELISA方法对试剂盒的校正曲线的线性相关关系、检测限、重复性和样品加标回收率进行了验证.结果为,试剂盒的校正曲线的线性相关系数为0.985;定性检出限为0.147ng/mL,定量检出限为0.490ng/mL;添加0.5ng/mL、1.0ng/mL、5.0ng/mL的克伦特罗标准液时,变异系数分别为2.29%、6.97%、2.73%,平均回收率分别为91.8%、102.4%、99.7%.结果表明应用ELISA方法检测猪尿中克伦特罗残留量符合实验室质量控制规范的要求,适合检测猪尿中克伦特罗残留量的初筛. 相似文献
3.
本文挑选了国内某公司和德国Biopharm公司的cL（盐酸克伦特罗）快速检测试剂盒进行实验对比,测试国内外试剂盒在性能上的差别。实验证明,采用间接竞争ELISA方法的盐酸克伦特罗国产试剂盒在猪尿液盐酸克伦特罗检测方面已经达到进口同类型产品水平,测定结果准确,方法稳定,可以作为进口试剂盒的替代品。 相似文献
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两种克伦特罗ELISA试剂盒的比对试验 总被引：1，自引：0，他引：1
应用意大利Tecna公司和德国r-B iopharm公司的克伦特罗酶联免疫(ELISA)试剂盒检测猪尿样和猪肝样品,并对两者的标准曲线线性范围、斜率和B/B0抑制浓度、板内和板间变异系数、阳性检出率、回收率等进行了比对。结果表明,当阳性判定阈值设定在1.0~5.0 ng/mL范围时,2种试剂盒均能满足分析要求,对尿样检测Tecna试剂盒比r-B iopharm试剂盒的检测时间要短;但在检测低浓度克伦特罗的尿样时,r-B iop-harm试剂盒更好,对肝样检测Tecna试剂盒有优势。 相似文献
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三种氯霉素ELISA检测试剂盒评价 总被引：7，自引：0，他引：7
本试验选择三种氯霉素检测试剂盒(分别产于美国(A)、英国(B)和德国(G))及不同的前处理方法对牛奶及鸡肝组织中的氯霉素残留进行检测。从B／Bo-50％抑制浓度、检测范围、标准溶液浓度梯度、板内变异、板间变异、样品添加试验、实际样品检测等方面对三种试剂盒及前处理方法进行对比试验，结果表明试剂盒A、B、G对缓冲液配制的药物标准液的50％抑制浓度均低于1ng／mL；三种试剂盒的检测范围分别为0．1—2．0ng／mL(A)，0．14—21．0ng／mL(B)，0．05—4．05ng／mL(G)；板内变异系数均小于11．3％，板间变异系数均小于17．4％；样品回收率在70％-120％之间。 相似文献
7.
用混合酸酐法将莱克多巴胺(Rac)与匙孔蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)偶联,经紫外光谱扫描确定偶联成功,测得偶联物Rac-KLH浓度为3.6 mg/mL,Rac-BSA浓度为6.2 mg/mL。以偶联物Rac-KLH作为免疫原,免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/O-Ag-14进行融合。以Rac-BSA作为包被抗原,经间接ELISA筛选出阳性细胞株,再用有限稀释法进行多次亚克隆,获得稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株1D9、1F3、2C11、5C3、3A10、4A8、6B7、6D5、7C11、7D3。其中单克隆抗体5C3和3A10间接ELISA效价1∶500 000,对莱克多巴胺的半数阻断浓度(IC50)均为3.98 ng/mL,对盐酸克伦特罗和沙丁醇胺的IC50均大于2 000 ng/mL;对盐酸克伦特罗和沙丁醇胺的交叉反应率均小于0.2%。间接竞争ELISA检测莱克多巴胺在0.5～100 ng/mL范围内为线性分布,确定的最低检测限为0.5 ng/mL。 相似文献
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阳一兰 《畜牧兽医科技信息》2019,(7)
本试验采用农业部1025号公告-16-2008方法制备出空白猪尿基质,添加一定量标样进行衍生化,使得上气相质谱分析的盐酸克伦特罗浓度分别为20ng/mL,50ng/mL,100ng/mL,200ng/mL,500ng/mL。同时,直接添加同样量的盐酸克伦特罗溶液直接衍生化,使得上机浓度与前述4个浓度保持一致。用出峰时间定性,峰面积响应值定量。并用相关公式计算得到基质效应系数。结果表明:气相质谱法测定猪尿中的盐酸克伦特罗存在一定的基质效应。在试验中的5个浓度范围内,基质效应值在3.67～4.18。疑似常数。 相似文献
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猪肝和猪尿中沙丁胺醇和克伦特罗残留的酶联免疫吸附检测法研究 总被引：18，自引：1，他引：18
采用混合酸酐法将沙丁胺醇与牛血清白蛋白偶联，并免疫家兔制备抗沙丁胺醇抗血清。以间接ELISA法测定血清效价，测得抗血清最佳工作浓度为1：6400，该抗沙丁胺醇抗血清对克伦特罗有110％的交叉反应性。建立了能够同时检测SAL和CL的间接竞争ELISA方法，该方法对沙丁胺醇的检测范围为0．48ng／mL～8．0μg／mL，对克伦特罗的检测范围为0．43ng／mL～7．3μg／mL，对沙丁胺醇的检测灵敏度为o．48ng／mL，对克伦特罗的检测灵敏度为0．43ng／mL。在猪肝和猪尿中添加1～50ng／g(ng／mL)的沙丁胺醇，添加回收率为72．2％～84．8％，变异系数为4．2％～28．3％，在猪肝脏和猪尿中添加1～50ng／g(ng／mL)的克伦特罗，添加回收率为84．3％～103．4％，变异系数为O．3％～35．5％。 相似文献
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盐酸克伦特罗胶体金快速检测试纸条的研制 总被引：3，自引：2，他引：1
研制一种快速、简便的基于胶体金免疫层析法的试纸条,以用于对猪尿中盐酸克伦特罗的检测。以胶体金标记盐酸克伦特罗单克隆抗体竞争性膜层析技术制成了猪尿液中盐酸克伦特罗残留检测的快速检测试纸条。如待测尿样中无盐酸克伦特罗,则金标抗体能顺利地与固相载体结合,形成肉眼可见的红色带;如待测尿样中含有盐酸克伦特罗,则与金标抗体以同样的机会与固相载体结合,竞争性地占去了金标抗体与固相载体结合的机会,使金标抗体与固相载体的结合量减少,无法形成肉眼可见的红色带。经过试验制成了可检测出猪尿样中盐酸克伦特罗浓度为2 ng/mL的试纸条,可在8 min完成测试,肉眼即可判断;该试纸条灵敏度能够达到临床使用的要求,且无需任何仪器设备,具有敏感、特异、快速、简便的特点,适用于现场快速检测和筛选工作。 相似文献
11.
四种克伦特罗ELISA试剂盒比对试验 总被引：1，自引：0，他引：1
近年来,非法使用克伦特罗的现象已大为改观,但仍有极少数故意或在不知情的情况下使用克伦特罗的情况。为严厉打击非法使用克伦特罗的行为,我们已将尿样的克伦特罗阳性水平调整至10ng／ml。如此低的检出限,对所用的ELISA试剂盒提出了较高的要求。为评价克伦特罗ELISA试剂盒检测质量,特开展本次比对试验。本次试验选用了四种不同品牌的试剂盒进行试验,分别是某进口品牌A、国产品牌B、C、D。试验方案在参考国内一些专家学者的文献后进行了适当修改。 相似文献
12.
为了对不同厂家试剂盒检测猪A型口蹄疫抗体的敏感性及与兰州兽医研究所(以下简称为兰兽研)猪A型抗体试剂盒检测的一致性进行综合比较,试验从湖南省湘潭市某猪场采集血清样本328份(其中母猪血清268份,育肥猪血清60份),使用A、B、C厂家的试剂盒,同时使用兰兽研试剂盒作为对照,按照各厂家试剂盒说明书对所有血清进行猪A型口蹄疫抗体测定及结果判定。结果显示,母猪FMD-A型抗体阳性率数值,试剂盒A试剂盒C试剂盒B兰兽研试剂盒;育肥猪FMD-A型抗体阳性率数值,试剂盒A兰兽研试剂盒试剂盒C试剂盒B;以兰兽研检测结果为参照,FMD-A型抗体阳性符合率数值试剂盒A试剂盒C试剂盒B;FMD-A型抗体阴性符合率数值试剂盒B试剂盒C试剂盒A。综合三种试剂盒的敏感性和一致性来看,试剂盒A的检测敏感性及与兰兽研的阳性一致性最高,试剂盒C次之;试剂盒B与兰兽研的阴性一致性最高,试剂盒C次之;三种试剂盒的检测敏感性及与兰兽研的一致性相差不大。 相似文献
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以人工感染弓形虫的猪阳性血清及感染前的阴性血清为样品,比较3个国产(A、B、C)和2个国外(D、E)ELISA试剂盒检测猪弓形虫病的敏感性。用这5种ELISA试剂盒,检测人工感染弓形虫的猪阳性血清42份及感染前的阴性血清45份,并参考PCR扩增结果,比较这5种ELISA试剂盒检测猪弓形虫病的敏感性。5种试剂盒中,1种国产试剂盒的检测结果与PCR结果完全一致,其余4种试剂盒的检测结果都与PCR检测结果差别较大。结果表明,国产试剂盒A的检测效果最佳,国外试剂盒与部分国内试剂盒的检测结果相当,临床选用试剂盒时,可选择检测效果最佳的试剂盒A,不必盲目选择国外试剂盒。 相似文献
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《畜牧与兽医》2020,(7)
采集新疆地区牛血清90份、羊血清76份,以英国参考实验室APHA竞争性ELISA试剂盒检测结果为确诊标准。应用A、B、C、D 4个不同国产商品化布鲁菌cELISA抗体检测试剂盒对上述样品进行对比检测。结果表明4个试剂盒检测同一批样品结果存有差异,同一厂家试剂盒检测牛、羊血清结果也有差异。C试剂盒无论检测牛或羊血清特异性都最高,敏感性也较好;A试剂盒检测牛或羊血清特异性都最低。4个试剂盒与英国参考实验室cELISA抗体检测试剂盒符合度均较好,敏感性均很高,但特异性参差不齐,最高达100%,最低仅60.53%。结果提示,要重视检测试剂盒特异性指标,降低布病的误判率,减少不必要的经济损失。 相似文献
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免疫亲和色谱-气相色谱/质谱法(IAC-GC/MS)检测猪肝中的沙丁胺醇与克伦特罗 总被引：6，自引：0，他引：6
制备出抗沙丁胺醇的抗血清，提取、纯化IgG制备免疫亲和色谱柱，针对沙丁胺醇与克伦特罗的动态柱容量分别为400ng／mL基质和416ng／mL基质。猪肝样品匀浆后用稀盐酸提取，经免疫亲和色谱柱纯化，再用GC／MS检测，即为IAC-GC／MS法。对沙丁胺醇的检测限为0．5ng／g，定量限为2ng／g，对克伦特罗的检测限为0．8ng／g，定量限为2．5ng／g。空白组织按照1、5、10、20ng／g的浓度添加药物，沙丁胺醇在空白肝中的添加回收率为78．4％～106．9％，克伦特罗的添加回收率为77．1％～102．9％。本研究建立的检测猪肝中沙丁胺醇与克伦特罗的IAC-GC／MS法乃国内首次报道。 相似文献
18.
在筛选盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上，首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒，本研究通过对几种包被抗原种类和包被浓度进行筛选，并对单抗和二抗最佳工作效价进行严格的筛选和研究。本试剂盒的最低检测限为0．1ng／m1，检测范围在0．1～10ng／ml，通过对24份阳性样品检测并与德国r—b1opharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验，阳性符合率95．8%。 相似文献
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[目的]本试验通过研究胶体金法与ELISA法在检测猪尿中盐酸克伦特罗的应用，得出两种方法在目前盐酸克伦特罗快速检测中结合使用的可能，从而在保证检测灵敏度和特异性的前提下，大大提高检测速度，并以此为基础建立一个不同于以前的监管模式。[方法]采用胶体金法和酶联免疫法(ELISA)进行比较。[结果]快速检测试纸条的灵敏度为5ng／nd，共检测442份猪尿样品，ELISA阳性7份，阳性率1．6％，胶体金阳性9例，阳性率2％；假阳性率为O．5％，符合率为99．5％；并可应用在宰后猪尿、猪肝检测中。【结论】胶体金法检测盐酸克伦特罗，具有操作简便、观察直观、快速、省时，其特异性、敏感性均达到ELISA水平；可作为饲养场、生猪中转站、屠宰场、菜市场筛查盐酸克伦特罗的重要手段，具有重要意义。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2020,(16)
为了筛选出高效、低成本、用时短的RNA核酸提取试剂盒,为各级实验室开展动物疫病监测提供参考,试验选择3种常用磁珠法核酸提取试剂盒(病毒DNA/RNA提取试剂盒A、病毒RNA提取试剂盒B及病毒总核酸提取试剂盒C)对临床粪便样品提取猪流行性腹泻病毒RNA、临床组织病料样品提取猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA,通过实时荧光定量反转录(RT)-PCR方法进行检测,以Ct值评价分析提取效率及重复性,同时对不同试剂盒提取时间及价格进行综合比较分析。结果表明:对于粪便样品,B、C试剂盒的RNA提取效率要高于A;3种试剂盒对PRRSV浓度较高的组织样品均具有较好的提取效果,A、B试剂盒的RNA提取效率高于C试剂盒,但B、C试剂盒的重复性优于A试剂盒。其中A试剂盒对于组织样品中高浓度病毒样品提取效率较高,时间最短;B试剂盒对于粪便样品中低浓度RNA病毒提取效率最高,但价格最贵,且时间最长;C试剂盒对粪便中低浓度样品RNA提取效率高于A试剂盒,价格最低。综合提取效率、时间及成本等因素分析认为,试剂盒C性价比较高,可用于大批量临床样品检测。说明不同试剂盒对不同种类样品提取后,提取效率存在差异,实验室可根据实际情况进行选择。 相似文献