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细胞凋亡的特征及其检测方法 总被引：4，自引：1，他引：3
细胞凋亡是动物机体组织清除受损、衰老或多余细胞的一种自杀性过程,它对于保持机体各组织器官正常生长、发育、结构、功能动态平衡和维持内环境相对稳定等都具有重要意义。发生凋亡的细胞大多数是生物个体中多余或老化的细胞,有些也是发生肿瘤时的细胞或受到病毒或细菌感染的细胞。根据不同的检测方法来检测不同类型的细胞凋亡,进而来研究细胞凋亡的现象和发生机制,为揭示机体与细胞凋亡的关系和疾病与凋亡的关系提供理论依据。文章对凋亡细胞的特征、细胞凋亡各种检测方法的检测原理和结构判定,分别进行了概述。 相似文献
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乳白蛋白可以同油酸结合形成诱导肿瘤细胞凋亡的复合物，即乳白蛋白-油酸复合物（HLjm引1Alpha—LactalbuminMadeLetllaltoTumorCells，HAMLET）。研究已证实，HAMLET可以特异性地诱导肿瘤细胞凋亡，对肺、喉、肾、结肠、膀胱、前列腺、卵巢、皮肤、淋巴等组织器官的40余种肿瘤细胞均有良好的杀伤性。同时，在膀胱癌的肿瘤模型鼠及人恶性胶质瘤实验中证实，HAMLET能够在体内系死肿瘤细胞.临床上，其对膀胱癌及皮肤乳头状癌患者也有良好的治疗效果.因此，大力开展HAMLET的研究工作将为肿瘤洽疗提供一条新涂径、 相似文献
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DAPI检测黄体期绵羊生殖器官中细胞凋亡的比较研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以黄体期小尾寒羊和萨福克羊为研究对象,采用DAPI原位荧光标记技术,对高繁殖力品种小尾寒羊和低繁殖力品种萨福克羊成年母羊主要生殖器官(卵巢、输卵管、子宫)进行细胞凋亡的确认与定位。结果表明:小尾寒羊和萨福克羊卵巢中黄体细胞有凋亡现象,黄体后期萨福克羊的细胞凋亡较小尾寒羊明显;在萨福克羊黄体期输卵管各部位上皮中发现有极少数分泌细胞具有凋亡特征,而在小尾寒羊未检测到凋亡细胞,两品种羊输卵管上皮下结缔组织有少数凋亡细胞,小尾寒羊和萨福克羊子宫内膜的基质与腺体内皮中均检测到大量凋亡细胞。细胞凋亡是母羊生殖器官变化的重要调节机制,可能与造成两者繁殖力高低差异有关。 相似文献
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本文简术细胞凋亡过程中的形态特征，生化过程，分子机制及调控等问题。特别是对卵巢中存在的凋亡细胞的分布特点，检测手段，定位，与卵泡之间的关系及影响因素等问题进行了分析。 相似文献
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番鸭呼肠孤病毒诱导的细胞凋亡观察 总被引：2，自引：0，他引：2
以番鸭呼肠孤病毒人工感染10日龄健康番鸭,运用原位末端标记技术及免疫组织化学方法,对番鸭呼肠孤病毒感染后番鸭多种组织的细胞凋亡进行检测,对死亡因子FasL的表达进行研究。原位末端标记检测显示,多种组织器官中出现大量阳性细胞,表明番鸭呼肠孤感染可引起肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、胸腺、盲肠和法氏囊发生不同程度的细胞凋亡。免疫组织化学研究结果表明,感染番鸭呼肠孤病毒后,肝脏、肾脏、肺脏、胸腺、盲肠和法氏囊等多种组织中可观察到FasL表达,且各种组织FasL表达的强弱与原位末端标记检测的细胞凋亡指数高低相一致。结果表明番鸭呼肠孤病毒诱导细胞凋亡的机制与FasL的表达密切相关。 相似文献
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目的 探讨尿中7种修饰核苷M1A、ac4C、A、06-MeG、MTA、1 -MeI、1-MeG检测在膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)诊断及预测预后中的意义.方法 选取经病理证实为膀胱移行细胞癌患者45例为膀胱癌组,其中初发32例,复发13例;组织学分级:Ⅰ级22例,Ⅱ级16例,Ⅲ级7例;浸润性癌16例,非浸润癌29例.选取16例正常人为对照组.应用高效液相色谱/电喷雾-四极杆-飞行时间质谱技术(HPLC/ESI-Q-TOF-MS)检测膀胱癌组和对照组尿液中M1A、ac4C、A、06-MeG、MTA、1-MeI、1-MeG 7种修饰核苷水平(核苷含量/肌酐).结果 BTCC组尿液M1A、ac4C、06-MeG和1-MeI水平[分别为(4.61±1.82)、(0.63±0.29)、(0.46±0.35)和(12.28±9.74)],均显著高于对照组[(2.85±0.68)、(0.35±0.15)、(0.21±0.11)和(5.39±2.41),P＜0.01];诊断准确度由大到小为1-MeI＞ M1A＞ ac4C＞ 06-MeG,且1-MeI与M1A联合检测可达到对膀胱癌最高的灵敏度和特异性,分别为92.45%和87.50%.BTCC组织学分级之间以及浸润性与非浸润性之间尿液修饰核苷水平差异均无统计学意义(P＞0.05).复发患者尿液M1A和ac4C水平分别为(6.74±1.23)、(0.83±0.41),均显著性高于初发患者[(3.93±1.43)、(0.57±0.20),P＜0.05],M1A与其复发时间呈负相关(r= -0.895,P＜0.01).结论 尿液M1A联合1-MeI检测在膀胱移行细胞癌诊断中意义重大,M1A和ac4C有助于预测膀胱移行细胞癌患者预后. 相似文献
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人工感染鸡包涵体肝炎病毒雏鸡胸腺细胞凋亡的检测 总被引：1，自引：0，他引：1
应用原位末端标记方法对人工感染鸡包涵体肝炎病毒雏鸡的胸腺细胞的凋亡进行检测，结果表明，鸡包涵体肝炎可引发胸腺细胞的凋亡，多数凋亡阳性细胞核结构完整，核内有数量不等的阳性颗粒，少部分凋亡阳性细胞核破碎或核浓缩；HE染色光学显微镜下观察，多数坏死的胸腺细胞属细胞凋亡。采用原位末端标记法可检测到早期的凋亡细胞。 相似文献
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研究通过HE染色镜检发现,鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株(DEV-CHv)可致鸭胚成纤维细胞(DEF)出现染色质颗粒化、细胞核变形等显著凋亡特征;TUNEL试验显示,接毒组细胞核内有多量棕黄色DAB显色颗粒,表明细胞出现了凋亡现象;DNA Ladder检测表明,接毒组细胞具有分子量分别为180～200bp及其整数倍的凋亡梯带电泳图谱特征;电镜观察发现,接毒组细胞具有染色质浓缩、边移,胞浆严重空泡化,细胞核严重变形,形成凋亡小体等典型凋亡特征.上述研究结果表明鸭病毒性肠炎病毒具有显著的致鸭胚成纤维细胞发生凋亡的作用. 相似文献
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内质网应激(ERS)在颗粒细胞的凋亡中起重要作用,颗粒细胞的凋亡又是诱发卵泡闭锁的关键因素。槲皮素(QC)做为一种植物源性黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎等生物活性。研究表明QC可通过内质网应激保护细胞。为了解QC对水牛颗粒细胞的保护作用,初步阐明QC通过内质网应激缓解水牛颗粒细胞的凋亡机制。分析QC对细胞活力的影响,利用CCK-8试剂检测细胞活力,发现低质量浓度(1.0～2.5 mg/L)的QC能够增加细胞活力;使用内质网应激诱导剂衣霉素,在体外构建内质网应激模型,利用流式细胞术检测细胞凋亡情况,q-PCR检测内质网应激相关基因表达量情况,发现2.5 mg/L的衣霉素可促使内质网应激相关基因表达显著上升,细胞凋亡也显著增加;随后,探究QC对内质网应激条件下水牛颗粒细胞的保护作用,通过流式细胞术检测细胞凋亡情况,q-PCR和Western blot检测内质网应激以及细胞凋亡相关基因和蛋白的表达情况,发现QC预处理后,内质网应激相关基因的表达显著降低,细胞凋亡情况也得到缓解。综上,QC能缓解内质网应激诱导的细胞凋亡。 相似文献
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试验利用口蹄疫病毒感染BHK-21细胞,通过MTT法、Hoechst 33258染色、原位末端标记技术(TUNEL)、流式细胞术和链特异性荧光定量RT-PCR,分别就口蹄疫病毒对BHK-21细胞生长的抑制作用、凋亡细胞的形态学和分子生物学特征、凋亡峰的出现和细胞周期的变化以及口蹄疫病毒基因组在BHK-21细胞内的复制情况进行了检测。结果表明:口蹄疫病毒可抑制BHK-21细胞的生长并诱导其产生凋亡,呈现典型的凋亡细胞特征,出现细胞凋亡峰并且细胞周期明显被阻滞在G1/G0期,同时对凋亡率和口蹄疫病毒基因组复制的关系做了初步研究。 相似文献
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【目的】 探讨microRNA-188-5p （miR-188）在乳腺癌细胞增殖、迁移和凋亡过程中的调控作用，以期为乳腺癌相关治疗药物的研发提供理论依据。【方法】 培养小鼠乳腺癌细胞（4T1），建立4T1细胞小鼠移植瘤模型，分离肿瘤组织和瘤旁组织，用实时荧光定量PCR法检测miR-188的表达情况；在4T1细胞中分别转染miR-188的模拟物（miR-188 mimics）、模拟物对照（mimics-NC）、miR-188抑制物（miR-188 inhibitor）及抑制物对照（inhibitor-NC），不转染的细胞为空白对照（Con），用实时荧光定量PCR法检测各组细胞miR-188的表达水平，CCK-8法检测细胞增殖能力，细胞划痕试验检测细胞的迁移率，流式细胞术检测细胞的凋亡率，Western blotting检测细胞相关凋亡蛋白的表达情况。【结果】 瘤旁组织中miR-188的相对表达量显著高于肿瘤组织（P<0.05）；细胞转染结果表明，与Con组相比，miR-188 mimics组miR-188的相对表达量显著上调（P<0.05），而miR-188 inhibitor组显著下调（P<0.05），mimics-NC、inhibitor-NC组均无显著差异（P>0.05），因此后续试验分别以mimics-NC、inhibitor-NC为miR-188 mimics、miR-188 inhibitor的对照进行分析。细胞增殖和划痕试验结果表明，与mimics-NC组相比，miR-188 mimics显著降低4T1细胞的增殖速率和迁移速率（P<0.05）；细胞凋亡试验结果显示，与mimics-NC组相比，miR-188 mimics显著促进4T1细胞凋亡（P<0.05）；与inhibitor-NC组相比，miR-188 inhibitor显著抑制细胞凋亡（P<0.05）；Western blotting结果表明，miR-188 mimics显著降低基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白的表达水平（P<0.05），显著提高聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP1）、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）和Bcl-2-associated X蛋白（Bax）的表达、抑制抑凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的表达（P<0.05）。【结论】 miR-188可显著抑制4T1细胞的增殖和迁移，促进4T1细胞凋亡，说明miR-188可以作为抑制乳腺癌进展和转移潜能的肿瘤调节子。 相似文献
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研究“肿瘤消”的抗肿瘤活性和作用,为临床用药提供依据。通过 MTT 法检测“肿瘤消”对多种肿瘤细胞株和正常细胞存活率的影响;采用 Hoechst 染色法和 DNA 片段化分析对“肿瘤消”诱导 MDCC-MSBl 细胞凋亡的作用进行检测;Western blot 检测“肿瘤消”诱导 MDCC-MSBl 细胞凋亡相关蛋白因子表达情况。MTT 法检测结果显示,“肿瘤消”对 MDCC-MSBl、C6、SP2／0和 A549细胞的增殖具有明显抑制作用,对293A 细胞增殖无显著影响;Hoechst 染色和 DNA 片段化分析均证实“肿瘤消”能诱导 MDCC-MSBl细胞凋亡;Western blot 检测发现“肿瘤消”诱导 MDCC-MSBl 细胞凋亡与凋亡因子 caspase 3、caspase 8和caspase 9的活化有关。证实“肿瘤消”具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。 相似文献
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动物细胞大规模培养中细胞凋亡检测方法的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
为了探讨动物细胞大规模培养中细胞凋亡的检测方法,以不同浓度氯化铵诱导BHK-21细胞凋亡,每隔12 h收集细胞,采用台盼兰形态学排染法、吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法、FITC-Annexin V/PI双染色荧光显微镜观察法、原位缺口末端标记法(TUNEL)、DNA凝胶电泳、流式细胞术(FCM)法进行细胞凋亡的检测。通过比较发现,不同方法检测结果都存在着显著性差异,但吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法是一种简单、易行、准确、全面定性细胞凋亡的较为可靠的方法,而FITC-Annexin V/PI双染色流式细胞仪能特异地、准确地检出早期凋亡的细胞,是较为理想的凋亡定量检测方法。这2种方法的联合运用更适应于动物细胞大规模培养过程中细胞凋亡的检测。 相似文献
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为探究巴泰病毒(Batai virus, BATV)在体外能否引起小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)凋亡,本试验利用BATV(NM/12)株感染N2a细胞,主要通过WST-8法检测细胞感染后的活性,IFA确定细胞内的BATV。再利用Annexin V-FITC/PI双染法分析细胞感染BATV不同时间和剂量后诱导细胞凋亡的情况。而且进一步通过Caspase-3活性检测分析BATV对细胞凋亡通路中主要调控分子的影响。WST-8试验结果显示,BATV感染可引起N2a细胞活性明显下降,IFA检测发现绿色荧光主要存在于细胞胞浆中,证明BATV可在N2a细胞中复制。流式细胞仪检测发现,BATV可诱导N2a细胞发生早期和晚期凋亡,并且凋亡程度随着病毒含量和感染时间的增加而加大。另外,Caspase-3活性检测结果显示,BATV在感染细胞过程中可活化凋亡相关因子Caspase-3,进一步证明BATV可以诱导N2a细胞凋亡。结果表明,BATV可诱导N2a细胞发生凋亡,并且能够促进细胞凋亡蛋白Caspase-3表达水平上升,为深入探究BATV调控神经细胞凋亡的分子机制及抗病毒药物的研制奠定了基础。 相似文献