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相似文献
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1.
采用腹腔的接种1次脾内注射禽呼肠孤病毒(ARV)蛋白免疫小鼠,经3次融合后,共筛选8株分泌抗禽呼肠孤病毒(单克隆抗体杂交瘤细胞株,这8株McAb均可与ARVS1133株,FDO株发生反应,而与IBDV,MDV,EDS-76病毒不发生反应,经亚类鉴定,AE7,AF8,BD1,DH10,EE5为IgG1;AD6,CG4为IgC2a,AG7为IgG2b。腹水效价在10^3~10^5之间。  相似文献   

2.
猪细小病毒生物学特性研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用PK-15传代细胞复制猪细小病毒(PPV)参考株NADL-2和云南分离株KM,研究得出细胞培养物半数细胞感染量分别为10^-7.9/ml和10^-6.8/ml经CsCl密度梯度离心,两种病毒颗粒其浮力密度值分别为1.33g/cm^3和1.39/cm,电镜观察病毒粒子呈圆形,直径约20nm。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,表明纯化的PPV细胞培养毒,主要含两种蛋白成分,分子量  相似文献   

3.
鸡减蛋综合征蜂胶佐剂灭活苗的试制及其免疫应答   总被引:1,自引:1,他引:0  
试制的鸡减蛋综合征峰胶佐剂灭活苗中蜂胶含量为6mg/ml。用此苗按0.5ml剂量给开产或临开产母鸡接种后15天,测免疫抗体滴度达2^-8-2^-10,60天测免疫抗体滴度达2^-9-2^-11。实验室试验结果和田间试验结果初步表明EDS峰胶苗的近期免疫效果优于EDS白油苗。  相似文献   

4.
鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定   总被引:12,自引:0,他引:12  
天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病,经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎(GIB),并分离出IBV JB9702株,HA效价为2^12,EID50为10^-6.81/0.2mL。病毒干扰试验中,IBV JB9702+NDV LsAota接种鸡胚HA效价为2^4~6,LaSota接种鸡胚HA效价为2^10~11;用IBV JB9702病毒液1:10稀释后感染经IBV H  相似文献   

5.
对我省几个暴发产蛋下降综合征的鸡群进行了流行病学调查。用9日龄的鸭胚从病鸡的输卵管和子宫内分泌到两株EDS-76病毒。该病毒对鸡红细胞的凝集作用可被EDS-76的标准阳性血清所抑制。用分离毒接种189日龄产蛋母鸡6只,6/6发病。接毒后5天,可从血中测出HI抗体,15天时达最高峰,25天后开始渐渐下降。卵黄HI抗体与血液HI抗体呈正相关,只是卵黄HI抗体价比血液的高一个滴度。接毒鸡所产的蛋,EDS  相似文献   

6.
产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA探针的制备及应用研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
用纯化的产蛋下降综合征(EDS-76)病毒(H91毒株)悬液提取的核酸,经琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量较大、背景清晰的核酸带。用BamHI酶消化产生4个片段,大小分别为17kb、10kb、4.0kb和2.0kb。将其中的2.0kb片段克隆进pUC18DNA载体中,重组质粒DNA用digoxigenin标记作为DNA探针,在dotblot中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒(MDV)DNA、鸡传染性贫血病毒(CAV)DNA、SPF鸡基因组DNA等核酸反应,只与3株EDS病毒(EDS标准毒株AV-127、EDSH91毒株和从健康鹅体中分离的EDSY81毒株)DNA呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后24h即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出EDS病毒DNA,在感染后35h仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用SPF鸡胚分离病毒,并用HA和HI试验检测分离病毒的特异性;在感染过程中,同时检测了血清中HI抗体的消长情况。结果表明,人工感染鸡排毒至少可以维持2个月左右,而且血清中HI抗体即使很高,也不能阻止感染鸡的排毒。  相似文献   

7.
具有中和活性的减蛋综合征病毒单抗的研制   总被引:1,自引:0,他引:1  
用减蛋综合征病毒毒株WPDV205纯化抗原免疫BALB/c小鼠,在最后一次免疫后第3天取脾细胞与SP2/0细胞在PEG-4000的作用下融合。用间接ELISA初步筛选出阳性克隆10株(4B1、1D4、2D6、3D6、3A5、2A1、3C6、3C1、1B3和2C5)。这些杂交瘤细胞经克隆化和再次检测后生产腹水,用微量细胞中和试验筛选出具有中和活性的单克抗隆体4株(4B1、3C1、3C6和2C5),其  相似文献   

8.
对鸡新城疫病毒(NDV)中等毒力毒株CS2株、NDⅠ系、Rokin、Komerov和低毒力LaSota株病毒的脑内致病指数(ICPI)、鸡胚的半数感染量(EID50)等指标进行了测定,结果是ICPI分别为1.27~1.52、1.66~1.70、1.46、1.43和0.29~0.5;EID50分别为10^7.5、10^7.5≥10^8.5、10^^7.9和≥10^8.5/0.1ml。用10倍剂量的CS2株病毒注射1月龄和1.5月龄SPE雏鸡,均安全无不良反应,测定CS2株病毒保存期,结果在-20℃保存6年的鸡胚2代(E2)、鸡胚6代(E6)、鸡胚10代(E10)毒的EID50均≥10^7.5/0.1ml。NDCS2株病毒的各项指标均在中等毒力范围内,对鸡胚的半数感染量仍保持原毒(Ⅰ系)的特性,ICPI比原毒有所下  相似文献   

9.
禽白血病/肉瘤病毒群特异性抗原P^gag27的分离和纯化   总被引:2,自引:0,他引:2  
本试验用差速离心和非线性蔗糖密度梯度离心法从感染雏鸡血浆中分离和提纯了禽成髓细胞性白血病病毒,并以SDS法裂解病毒,用SDS-PAGE分析AMV结构蛋白成分,最后选用水平板式电泳系统,经SDS-PAGE比较大量地分离了P^gag27。用Dot-ELISA和琼脂扩散试验检验其抗原活性,并且用SDS-PAGE测定其分子量和纯度,结果表明,提纯的病毒蛋白具有抗原活性,且达到电泳纯。  相似文献   

10.
磷酸钙介导马立克氏病病毒DNA转染鸡胚成纤维细胞   总被引:2,自引:0,他引:2  
提取马立克氏病病毒(MDV)Rispense株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)总DNA,运用磷酸钙-DNA沉淀转染CEF,可以成功地得到MDV的病变空斑。用每份沉淀含20μg的MDV和细胞总DNA转染次代CEF,其转染形成空斑的数量为4-221个,转染频率约为1-0^-6=10^-5;将磷酸钙-DNA沉淀加入到CEF中,于37℃5%CO2培养箱中培养4h后,室温下用15%甘油休克2min,由此可以提  相似文献   

11.
从中国发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒(EDSV)AA-2株,经常规方法提取其病毒核酸后,构建了限制性内切酶PstⅠ及HindⅢ水解片段的基因文库。对其中HindⅢ-F片段(52.9~58.9mu)的正反2条链的序列测定发现,其反链存在1个编码容量为387个氨基酸(aa)的开放读码框架(openreadingframe,ORF),经Genebank/EMBL同源搜寻后证实其编码产物为EDSV的DNA结合蛋白(DBP)。与其他腺病毒DBP的氨基酸序列进行同源比较,其N端同源性在19.0%~46.2%之间,C端同源性在27.7%~60.4%之间。腺病毒DBP的3个保守序列CR1,CR2,CR3在EDSVDBP中有较大变化,但EDSVDBP的锌指框架(Zn2+fingermotif)却保留了对其功能必需的残基。  相似文献   

12.
用人EBV转化恒河猴的自体B淋巴细胞,再以表达SIV不同抗原成分的重组痘苗病毒VAC-SIVenv,VAC-SIVgag感染,制备^51Cr释放试验的靶细胞。恒河猴于制备B淋巴细胞物四肢内侧静脉采血,分离淋巴细胞,采用^51Cr释放试验检测动物体内的CD8^+Tc特异性细胞免疫反应,对靶细胞的杀伤活性在16.7%~20.2%之间,并可在体内维持3个月之久;在靶细胞数量SIV亚单位疫苗可使部分(16  相似文献   

13.
应用NDLaSotaN79株和EDS-76H931株,分别接种鸡胚和鸭胚增殖病毒.血凝价分别达到≥1:1280和≥1:10000时,收取病毒.经福尔马林灭活.按一定比例加入吐温80、司本80、硬脂酸铝和白油,高速搅拌均匀,制成ND和EDS-76二联疫苗。该苗具有良好的免疫力,其中两种病毒无相互干扰性,接种鸡群无不良反应。疫苗置4~8℃和15~30℃分别保存8和6个月不破乳.不分层,颜色无变化。用联苗接种6000余只父母代种鸡,接种后25天.ND和EDS-76抗体可先后达到高峰,接种后9个月,鸡群ND和EDS-76抗体平均效价仍分别保持在7.0和5.6log2水平上。对16~18周龄产蛋母鸡(皮下注射1ml/只)应用20万羽份的联苗证明,疫苗安全.效力确实,使用方便.效益显著。  相似文献   

14.
用血凝抑制试验(HI)监测鸡新城疫(ND)-减蛋综合症(EDS)-传染性支气管炎(IB)三联、ND-EDS二联及ND油乳剂灭活苗免疫抗体水平动态,结果表明,以上疫苗免疫鸡群后第16天HI抗体达峰值,维持2个月,至免疫后一年ND抗体不低于8Log2;EDS不低于6Log2,IB不低于8Log2。经t检验结果表明除EDS有两组差异显著外,各组之间免疫后一年,ND、EDS和IB血清抗体差异均极不显著  相似文献   

15.
禽流感RT-PCR诊断法的建立   总被引:5,自引:0,他引:5  
根据禽流感病毒(AIV)A/Chicken/Breslin/1902(H7N7)株的血凝素(HA)基因参考序列设计合成一对H7HA特异引物,并应用SDS-蛋白酶K法提取病毒RNA,建立了逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测AIVRNA的方法。应用此法对鸡胚培养的AIV尿囊液、SPF感染鸡粪便进行了检测,并与琼脂扩散试验和电镜技术作了对比。特异性试验以新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、减蛋综合征病毒(EDS-76V)等的感染鸡胚尿囊液作为对照。结果表明,AIV尿囊液RT-PCR全部阳性,SPF感染鸡粪便87份,RT-PCR检出69份阳性,样品处理浓缩后琼脂扩散检出11份,电镜检测了23份样品,仅检出2份阳性。非特异性对照样品经RT-PCR检测全部阴性。将AIV感染鸡胚尿囊液作10倍系列连续稀释,可检出稀释度为10-2的病毒尿囊液。RT-PCR最早检出时间为感染后第3天,而琼扩和电镜均是7天。该法具有高度的特异性和灵敏性,且节约时间(只需8小时左右),可从分子水平上对AIV进行早期快速诊断和流行病学调查  相似文献   

16.
郑州地区家鸭EDS—76血清学调查   总被引:3,自引:0,他引:3  
郑州地区9个鸭场鸭群中有7个鸭场为EDS-76HI抗体阳性,阳性率为66~100%,不同日龄和不同品种鸭群对感染无明显差异。被感染EDS-76病毒鸭群虽无可见临床症候,对产蛋率也无明显影响,但有一定流行病学意义,试验证明,使用EDS-76HI母原抗体4.8Log2以下的鸭胚,用HA5×2^12的种毒接种,对其病毒增殖没有明显的影响,可用于制造EDS-76灭活疫苗,但鸭胚母原抗体超过4.8Log2以  相似文献   

17.
周宗清  刘晨 《中国家禽》1997,(12):25-26
1997年3月下旬,上海市郊区某蛋鸡场发生以产蛋下降为第一指征的非典型新城疫,通过临诊调查、抗体测定、病毒分离与鉴定进行了确诊。结果:感染鸡群产蛋下降的幅度可高达50%;新城疫HI抗体滴度高达12log2或以上;用泄殖腔棉拭接种鸡胚的分离物用标准血清鉴定为新城疫病毒(NDV),初代尿囊液的ELD50为10-7.5(0.2mL),1日龄SPF鸡胚脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄SPF鸡静脉接种致病指数(IVPI)分别为1.725和2.32,其毒力接近标准毒株—NDV北京株F48E9。  相似文献   

18.
猪水泡病病毒抗独特型抗体的研究—Ab2的制备与鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
用猪水泡病病毒中和单抗2B6和4H9免疫家兔,制备出SVDV兔抗独特型抗体。经亲和层析纯化,用ELISA鉴定性质,结果表明,所制备的Ab2能竞争抑制Ab1与SVDV抗原结合,同时,Ab2与Ab1的结合可被病毒抗原阻断,表明所制备的Ab2具有SVDV抗原内影像关系。  相似文献   

19.
犬瘟热病毒强毒株的分离与鉴定   总被引:6,自引:0,他引:6  
从病死犬肺,肝和淋巴结分离到2株CDV,CDV93039和CDV93041。消除小牛血清中的干扰因素和33℃培养是分离成功的主要因素,两株病毒均在Vero细胞生长良好,传2~4代毒力稳定,CPE产生明显,TCID50为10^-6.50~10^-6.77,明显高于国内外野毒株和弱毒的毒力效价,人工感染犬死亡率较高,表明该分离株致病力较强,作者推测我国犬群可能存在CDV强毒变异株。  相似文献   

20.
用某鸡场发生减蛋综合征病鸡的输卵管组织接种10~12日龄鸭胚盲传,分离到一株EDS-76·EXK2病毒。自第3代起至第10代,均从鸭胚尿囊液中检出血凝素.凝集鸡红细胞的特性可被EDS-76阳性血清所抑制。鸭胚分离毒不能凝集兔红细胞。应用第3和第4代鸭胚尿囊液混合毒经口腔、鼻腔和眼途径人工感染健康产蛋鸡.成功地复制了EDS-76。攻毒后35天内11只试验鸡的总产蛋数无明显变化.产蛋率为85~94%,但产各种异常蛋占总产蛋数的29%。电镜下发现原囊液中病毒颗粒呈球形、大小为70~80nm、无囊膜。  相似文献   

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