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ISSR分子标记及其在动物遗传育种中的应用 总被引:10,自引:0,他引:10
近年来,分子遗传标记的研究与应用得到了迅速的发展。20世纪80年代中期以来,随着PCR技术的出现,基于PCR技术的分子标记,如随机括增多态性(randomam plified polymorphic DNA,RAPD)、小卫星(minisatellite)或称DNA指纹图谱(DNA fingerprinting,DFP)、微卫星(microsatellite)或称简单序列重复(simple sequence repeat,SSR)、括增片段长度多态性(amplified fragment lengt hpolymorphism,AFLP)、单核 相似文献
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八十年代中期问世的聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)技术,被认为是分子生物学发展的一个新的里程碑。PCR的主要特点是能在体外大量迅速地扩增所选定的核酸(指DNA)片段。PCR技术用于检测传染病时,只要样品中含有极少量的病毒(或细菌) 相似文献
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随机扩增多态性DNA技术的原理及应用 总被引:4,自引:0,他引:4
1985年,美国人Kary Mullis等发明了PCR技术,两年后PCR自动化装置仪器的完成使基进入实际应用的阶段,该装置用于扩增特定的模板DNA,使DNA的量成倍增加,可用于各种用途的DNA分析。1990年,由杜帮公司的Williams等人基于PCR技术之上首次推出了一种简便、灵敏可行的新的遗传标记技术——随机扩增多态性DNA(Random amplified poly-morphic DNA,RAPD)[1]。尽管RAPD技术诞生的时间很短,但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及简便快速的特点,且具有可用引物数量大,检测区域几乎覆盖整个基因组,多态信息含量大等,使得该技术已渗透到分子生物学领域基因研究的各个方面。可以预料,该技术的发展会使分子遗传学得到更广泛的应用。 相似文献
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聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)是Mullis等人(1985)发明的一项DNA扩增技术。它利用耐热的DNA聚合酶快速特异地扩增任何所希望的目的基因或DNA片段。PCR技术不仅可以用于基因分离、克隆和核酸序列分析,还可用于遗传病及传染病的早期诊断等诸多方面。目前,PCR技术在传染病的诊断 相似文献
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RAPD技术及其应用 总被引:5,自引:0,他引:5
RAPD即随机扩增多态 DNA(Random Am-plified Polymorphic DNA,RAPD)。 RAPD标记是由美国科学家 Williams和 Welsh等人 (1990 )利用PCR的方法建立起来的。 RAPD技术因其简便快捷、多态检出率高、所需 DNA量少和不需杂交等优点 ,很快受到科学家们的重视 ,并在遗传分析中得到较为广泛应用。1 RAPD的原理RAPD技术建立在 PCR技术的基础上 ,它利用一系列 (通常数百个 )不同的随机排列碱基序列的寡核苷酸单连 (一般为 10碱基聚合体 )为引物 ,对所研究基因组 DNA进行 PCR扩增。如果引物与模板 DNA某一片段具有互补的核苷酸… 相似文献
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引言1985年由 Mullins 等开发的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)进一步促进了分子技术的进展,并拓宽了其应用领域。当前 PCR 正被应用于生物医学研究、传染病原及遗传缺陷的鉴定和检测、分子进化、流行病学和法医。本文描述标准的(standard)和反转的(inverse)PCR 技术。1 PCR 技术的原理尽管 PCR 对生物科学的作用巨大,但其原理却很简单。即使在有大量无关的DNA 分子存在的情况下,PCR 也可将靶DNA 按幂数扩增数百万倍,所获得的高度同源的 DNA 产物是分子操作的极好材料。如图1所示,PCR 包括3个步骤的循环过程:①双链 DNA 模板变性、②寡聚核苷酸 相似文献
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RAPD技术及其在动物遗传育种中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
20世纪80年代,由于分子生物学的迅猛发展,限制性酶切片段长度多态性分子克隆、DNA重组技术,尤其是PCR技术的兴起和新的电泳技术的不断完善,从而使各种分子标记应运而生,并在此基础上发展了多种DNA检测技术,诸如:扩增片段长度多态性(AFLP)、随机扩增多态性DNA(RAPD)、单链构象多态性(SSCP)、简单重复序列(SSR)、测序的标记位点(STS)、数目可变的串连重复序列(VNTR)等等,所有这些技术将为动植物育种、遗传图谱的构建、分子克隆、基因定位等各个方面带来革命性的变化。而RAPD技术由于其在检测DNA多态性上具有独特的方式和… 相似文献
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RAPD分子标记及其在我国蚕业研究上的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
1 RAPD分子标记
1.1RAPD标记随机扩增多态性DNA(Randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)技术由Willams和Welsh等先后于1900提出.该技术主要利用DNA聚合酶链式反应(Polymerase Chain reaction,PCR),以人工随机合成的寡核苷酸单链(为10个核苷酸)为引物,以生物的基因组DNA为模板进行PCR扩增反应,经过琼脂糖凝胶电泳来检测DNA的多态性. 相似文献
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PCR技术是利用DNA聚合酶,在体外大量合成(扩增)DNA片段的分子生物学技术.具有特异性好、灵敏度高、简便快速等特点.即使在10万个细胞中含有一个拷贝的待检核苷酸序列,也可用PCR技术检测出来. 相似文献
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聚合酶链反应(PCR)技术自1985年问世以来,以其灵敏性高、特异性强和速度快在分子生物学等科研领域得到了广泛应用.但是,由于传统的PCR技术不能准确定量,在操作过程中易受污染而使假阳性率偏高;因此,使其应用受到限制.实时荧光定量PCR技术拥有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,已成为了分... 相似文献
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印度中央家禽研究所研究人员将鸡精子细胞和3种外源DNA,完整的线性pVIVO2-GFP/LacZ载体(9620bp)、LacZ基因(5317bp)和GFP基因(2152bp)共孵育,使外源DNA转染精子细胞。PCR试验、DotBlot和Southern杂交试验显示,鸡精子细胞成功内化外源DNA。脂质体和限制性内切酶介导的整合技术被用于 相似文献
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聚合酶链反应(PCR)技术自1985年问世以来,以其灵敏性高、特异性强和速度快在分子生物学等科研领域得到了广泛应用。但是,由于传统的PCR技术不能准确定量,在操作过程中易受污染而使假阳性率偏高;因此,使其应用受到限制。实时荧光定量PCR技术拥有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,已成为了分子生物学研究的重要工具。文章对实时荧光定量PCR技术的原理、检测方法、定量方法及其应用进行了综述。 相似文献
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随机扩增多态性DNA (randomamplifiedpolymorphic,DNA)是由Williams等 (1990 )提出的一种DNA多态检测技术 ,它以PCR为基础 ,用一系列不同的碱基随机排列的寡聚核苷酸为引物 (通常为 10bp)对所研究的基因组DNA进行单引物扩增。RAPD是分子水平上的一种标记方法 ,具有简单、快速、无须标记探针和杂交实验等优点 ,因而广泛应用于动物基因定位与构建遗传图谱、MAS、预测杂种优势、性别鉴定等研究领域。1 基因定位与遗传图谱的构建家畜中大多数有经济意义的性状都受多基因控制且表型呈现连续分布的数量性状。微效多基因在基因组的分布… 相似文献
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<正>自1962年线粒体DNA(mitochondria DNA,mt DNA)首次通过电子显微镜直接被观察到以来,便成为核外遗传物质的研究热点。随着PCR、DNA测序、生物信息学等领域的快速发展,有关猪mt DNA的结构、遗传特点、应用等各方面都已经积累了相当丰富的资料。猪线粒体DNA的长度约为16.7kbp,由1个非编码D-Loop区和37个编码基因组成,其结构排列十分紧凑,碱基使用节约、高效。mt DNA具有母系遗传、自主遗传、无组织特异性、进化速率快 相似文献
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