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相似文献
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1.
探索易错PCR的反应体系最佳条件,利用易错PCR技术对枯草芽孢杆菌jy1的淀粉酶基因amy 1进行定向进化研究。突变基因重组于表达载体pET32a中,并导入大肠杆菌BL21构建突变体文库,经选择性培养基筛选获得2株有益突变菌株pET32a-amya和pET32a-amyb。突变基因经诱导后的酶活力分别是在同等条件下诱导获得亲本酶的2.2和3.1倍。  相似文献   

2.
一、研究目的通过利用含重组基因的动、植物,确立能进行各种糖基化的具有高生理活性的蛋白质等有用物质的效率化生产技术,代替过去利用微生物进行医药品等有用物质的生产,这将有助于在农林水产领域创立一个新的产业。　　二、研究目标1.利用植物生产有用物质技术的开发;　2.向家畜导入有用基因的转基因技术的开发;　3.生产有用物质的转基因家畜效率化克隆技术的开发;　4.利用昆虫生产有用物质的效率化技术的开发。　　三、研究体制(从略)1.研究推进体制:主查、副主查、攻关组领导、副领导的研究所和研究室单位;　2.参加研究机关和研究室名单…  相似文献   

3.
《中国蜂业》2019,(12):21-22
<正>蜜蜂授粉技术是利用自然界具有传粉作用的蜜蜂类昆虫,经过人工驯化饲养和繁殖使其为农作物进行辅助授粉,保障作物产量和品质的一项生物技术。蜜蜂对农药十分敏感,有蜜蜂就代表作物上没有农药,消费者会更放心;蜜蜂授粉会制约农药的大面积使用,倒逼人们采用绿色防控技术预防农作物的病虫害,从而降低农药在作物中的药物残留,通过规范化、标准化、经济化的  相似文献   

4.
为了研究耐碱木聚糖酶基因xylBYG耐热性,试验采用易错PCR技术对耐碱木聚糖酶基因xylBYG进行定向进化,经过2轮易错PCR产生突变基因产物,重组于表达载体pET-32a(+)中,并导入大肠杆菌BL21构建突变体文库。结果表明:经筛选获得了最佳突变菌株37D07,包含4个氨基酸替换,其最适作用温度比野生型提高了13℃,酶活约提高了17%,热稳定性也相应提高。  相似文献   

5.
近日，河北省农科院旱作所承担的国家高技术产业化现代农业专项-设施蔬菜天敌昆虫工厂化繁殖高技术产业化示范工程顺利通过验收，这标志着河北省大面积利用生防技术生产无公害蔬菜成为可能。  相似文献   

6.
昆虫滞育是受基因控制与外界环境多种因素影响的生物学过程,涉及基因众多,调控网络复杂,目前其分子机制仍未清晰.国内外滞育调控的相关研究多数基于家蚕、果蝇、麻蝇等模式昆虫.介绍了家蚕滞育关联基因的研究现状及进展,包括分类、生理功能、基因间互作、部分基因涉及的信号通路及研究热点等,为促进其在农林害虫的防治途径或天敌保护利用等...  相似文献   

7.
细胞永生化使细胞能够在保持遗传性状的同时无限增殖,细胞的体外永生化需要将HPV的E6和E7基因、SV40的LT基因或人端粒酶逆转录酶(hTERT)等导入目标内,而SV40-LT是建立永生化细胞最便捷的基因.本试验利用慢病毒感染方式将SV40-LT导入MDCK细胞中,阳性筛选后经qPCR和免疫荧光实验均检测到SV40-LT的表达,成功建立了利用慢病毒方式导入SV40-LT的实验体系,为后续永生化细胞建系研究提供了技术依据.  相似文献   

8.
1　亲本选配　　限 95 0 2为日系斑纹限性品种。是以限性品种86Ｂ为母本 ,以丝质、综合性状优良的现行品种苏春为轮回父本选育而成。ＢｓＡ为日系斑纹限性品种 ,是以斑纹限性品种学9为母本 ,以黄血素斑品种鲁2为父本杂交导入黄血基因 ,再以生产性能好、丝质优良的山东现行品种 92 0 2作为轮回父本选育而成。1.1　限 95 0 2选育经过　 1995年夏季 ,以斑纹限性品种 86Ｂ为母本 ,与现行品种苏春为父本杂交。自1995年秋季至 1997秋季 ,子代连续回交父本苏春 ,Ｆ1～Ｆ5代采用混合育 ,以个体选择为主 ,选择茧形短椭圆 ,全茧量平均数± 0 0 1ｇ ,…  相似文献   

9.
为初步鉴定鸡补体受体2（ChCR2）基因,本试验设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增ChCR2基因。利用同源臂连接的方法构建去掉跨膜区的ChCR2-△TM基因的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-△TM,将两个原核质粒转入大肠杆菌表达系统中表达GST-ChCR2-△TM和His-ChCR2-△TM蛋白。将纯化后的GST-ChCR2-△TM蛋白免疫BALB/c小鼠制备血清多克隆抗体,以His-ChCR2-△TM蛋白为包被原,ELISA检测血清多克隆抗体效价。利用间接免疫荧光试验和Western blotting对抗原抗体的特异结合性进行鉴定。结果显示,扩增到了一条大小为1 113 bp的ChCR2基因条带。成功构建了去掉跨膜区的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-△TM。诱导表达的GST-ChCR2-△TM蛋白在低温（16 ℃）诱导条件下可溶,而His-ChCR2-△TM蛋白以包涵体的形式存在。经ELISA测定,GST-ChCR2-△TM蛋白免疫的BALB/c小鼠血清效价为1∶512 000。间接免疫荧光试验和Western blotting结果显示,制备的抗GST-ChCR2-△TM蛋白血清多克隆抗体可与ChCR2蛋白发生特异性结合。本研究结果为ChCR2基因的进一步鉴定及鸡乃至禽类的相关免疫学研究提供了参考依据。  相似文献   

10.
为初步鉴定鸡补体受体2(ChCR2)基因,本试验设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增ChCR2基因。利用同源臂连接的方法构建去掉跨膜区的ChCR2-△TM基因的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-△TM,将两个原核质粒转入大肠杆菌表达系统中表达GST-ChCR2-△TM和His-ChCR2-△TM蛋白。将纯化后的GST-ChCR2-△TM蛋白免疫BALB/c小鼠制备血清多克隆抗体,以His-ChCR2-△TM蛋白为包被原,ELISA检测血清多克隆抗体效价。利用间接免疫荧光试验和Western blotting对抗原抗体的特异结合性进行鉴定。结果显示,扩增到了一条大小为1 113 bp的ChCR2基因条带。成功构建了去掉跨膜区的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-△TM。诱导表达的GST-ChCR2-△TM蛋白在低温(16℃)诱导条件下可溶,而His-ChCR2-△TM蛋白以包涵体的形式存在。经ELISA测定,GST-ChCR2-△TM蛋白免疫的BALB/c小鼠血清效价为1∶512 000。间接免疫荧光试验和Western blotting结果显示,制备的抗GST-ChCR2-△TM蛋白血清多克隆抗体可与ChCR2蛋白发生特异性结合。本研究结果为ChCR2基因的进一步鉴定及鸡乃至禽类的相关免疫学研究提供了参考依据。  相似文献   

11.
利用DNA条形码技术对收集到的8种草地螟寄生性天敌昆虫线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mtDNA COⅠ)的部分序列进行测定,通过比对分析,以邻接法(NJ)和最大简约法(MP)构建天敌昆虫系统发育树,以Kimura双参数模型计算天敌昆虫种内及种间的遗传距离。结果发现:与Genbank中寄生蝇及寄生蜂序列进行对比、剪切,共得到584bp的寄生蝇条形码基因序列49条、625bp的寄生蜂条形码基因序列45条。其中,49条寄生蝇的平均碱基含量中AT含量为71.1%,大于GC含量;45条寄生蜂的平均碱基含量中AT含量为74.0%,大于GC含量;均表现出AT偏向性。4种寄生蝇种内平均遗传距离为0.0015,种间平均遗传距离为0.1137;4种寄生蜂种内平均遗传距离为0.0015,种间平均遗传距离为0.3010,两类天敌昆虫的种间遗传距离均远大于种内遗传距离;聚类分析显示每一种天敌对应一个分支。说明基于COⅠ基因的条形码技术可以用于草地螟寄生性天敌昆虫的鉴别。  相似文献   

12.
《中国兽医学报》2016,(8):1301-1306
利用无疤痕基因敲除方法,构建大肠杆菌FliC基因敲除突变株。基因重组PCR结果显示:在重组转化体中FliC基因完全被卡那抗性基因和CcdB替代,获得Ⅰ型突变株(△1FliC);同时利用基因突变技术,对FliC基因起始密码子进行点突变,将ATG突变为AAA,再次进行基因重组后获得Ⅱ型FliC基因沉默菌株(△2FliC)。利用96孔微量板法,分别对野毒株、△1FliC和△2FliC进行生物膜表型检测,结果显示:△1FliC和△2FliC生物膜形成能力明显低于野毒株,从而为临床上大肠杆菌病的预防及疫苗的研制提供一定的理论基础。  相似文献   

13.
青山○号龙眼自 1985年在福建省长乐县古槐镇青山村龙眼资源普查中发现以来 ,多次在省市龙眼鉴评会上名列前茅。 1997年 12月通过省市有关专家评审 ,被认为是晚熟龙眼实生变异的优良株系。青山○号龙眼果实扁圆形 ,果皮黄褐色 ,果大核小 ,一般单果重 14～ 16ｇ ,大果 18 3ｇ ,剥壳不流汁。肉厚 ,质脆 ,化渣 ,味浓甜 ,含可溶性固形物 2 0 5%～2 1 2 % ,含维生素Ｃ 6 6 0～ 71 8ｍｇ 10 0ｇ ,品质极佳。可食率 6 7 7%～ 6 9 7%。果实 9月下旬成熟 ,生长发育期 118～ 131天。在福州地区气候条件下 ,青山○号龙眼一年可抽发 3次梢 ,即春、夏、…  相似文献   

14.
为发展昆虫产业,在各种昆虫中开展形质转换技术研究是十分重要的.这里所说的形质转换是指将克隆的外来基因人为地插入昆虫染色体中,并使插入的基因稳定地表达.这种形质转换技术不仅对于昆虫基因表达调控机制研究是必要的,而且对于利用昆虫进行有用物质的生  相似文献   

15.
1农药选用原则农药种类、浓度、使用时间、残留量必须符合国家《生产绿色食品的农药使用准则》，全面禁止使用剧毒、高毒、高残留或具有致癌、致畸、致突变的农药，不使用国家明令禁止的农药，严格控制使用各种遗传工程微生物制剂和激素类农药。立足可持续发展，保护生态平衡，少用有机化学农药，坚持以矿物源农药当家、系统应用植物源农药、生物农药、昆虫生长调节剂，配合应用以虫治虫、农业防治、膜袋保护等综合技术措施。2禁用的农药2．1无农药登记证、准产证的非法农药据国家《农药管理条例》（1997年5月8日发布）的规定，未经农业部登…  相似文献   

16.
家蚕和野蚕的细胞系研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  
李兵  沈卫德 《中国蚕业》2002,23(4):67-69
从Grace(1962)首次建立天蚕蛾(Antheraea eucalypti)的4个细胞系以来,昆虫组织培养技术获得了极大的发展.离体培养的细胞为研究昆虫病原物、病原物的增殖,以及利用这些病原物作为杀虫剂提供了理想的体系.特别是近年来,人们已意识到化学农药作为杀虫剂对人类产生的有害影响;昆虫对农药的抗性渐增,使农药的发展与更新难以与之抗衡.因此,人们试图利用生物杀虫剂取而代之.其中利用昆虫病毒防治虫害是生物防治中的重要方面之一.  相似文献   

17.
0.1%安达防治茶小绿叶蝉、灰茶尺蠖药效试验   总被引：6，自引：0，他引：6  
0 1%安达是新型的植物源农药 ,与昆虫病毒、Ｂｔ、真菌等微生物农药并列为无公害农药。该农药经试验不但效果好 ,且对作物生长有增效作用 ,是生产绿色食品、有机茶的可靠保证。茶小绿叶蝉、灰茶尺蠖是茶园的主要害虫 ,常年可造成损失 2 0 %～30 % ,严重的高达 5 0 % ,如选配农药不当 ,不但使农残超标 ,还破坏了茶园生态环境 ,极大地影响了消费者的身体健康。因此 ,选择无公害的新型植物源农药 0 1%安达防治茶园害虫已成为当之急 ,为此 ,我们首先在室内做了不同浓度药效试验 ,进而又在室外做了试验 ,为大田防治提供依据 ,结果如下。1　试验…  相似文献   

18.
构建猪链球菌2型（Streptococcus suis serotypc 2）强毒株ZY458分选酶srtC5基因敲除突变体并分析其特性。首先通过重叠延伸PCR技术扩增AsrtC5片段,该片段携带srtC5编码基因及其上下游部分序列,但是中间缺失212bp序列。随后构建重组自杀载体pSET4s：：△srtC5,并将其电转化导入ZY458菌株,通过同源重组获得△srtC5突变体。通过体外的细胞黏附试验和体内的家兔攻毒试验证明△srtC5突变体比较野毒株,其细胞黏附能力和对家兔的致病性都显著降低。  相似文献   

19.
家蚕微孢子虫cDNA文库的构建及部分EST同源性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  
以成熟的家蚕微孢子虫 (Nosemabombycis,N .b)为实验材料 ,以λTriplEx2为载体 ,构建了滴度为 1 86× 10 6pfu/mL ,插入片段平均在 5 0 0bp以上的较高质量的家蚕微孢子虫cDNA文库。从cDNA文库中随机挑取 180个克隆进行EST测序 ,得到了 130个有效序列。经BLASTn、BLASTx同源性分析后发现 ,7个ESTs编码基因在氨基酸水平上与脑孢虫有较高的同源性 ,推定为家蚕微孢子虫基因 (putativegene) ,同时获得了 2 7个未知序列。  相似文献   

20.
对细胞工程技术在寄生虫学领域中的应用作了简介：(1)应用杂交瘤技术研制抗寄生虫单克隆抗体，以此作为工具，进行寄生虫病免疫学诊断、媒介昆虫体内寄生虫抗原检测、保护性因子、抗原定位、虫种和虫株鉴定、抗原纯化及基因工程疫苗靶抗原筛选、流行病学监测等方面的研究，(2)利用寄生虫虫体细胞与骨髓瘤细胞杂交表达抗原；(3)应用组织培养技术建立寄生虫细胞系。  相似文献   

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