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相似文献
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1.
绵羊卵母细胞玻璃化冷冻保存实验   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用玻璃化冷冻保存方法,对375个成熟的绵羊卵母细胞进行冷冻,解冻后进行体外受精。结果为:形态完好率94.4%,卵裂114个,36个受精卵达到早期桑葚胚的阶段。实验的目的在于尝试绵羊卵母细胞玻璃化冷冻保存的可能性,相信绵羊卵母细胞冷冻保存问题最终会得到解决。  相似文献   

2.
家畜卵母细胞冷冻保存研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
自Whittingham(1977)首次成功的报道冷冻-解冻的小鼠卵母细胞活仔以来,国内外诸多学者对家畜及人的卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前,已有小鼠、家兔、牛等动物以及人的卵母细胞冷冻成功,并得到了后代。在国内,山羊、绵羊、猪等家畜的卵母细胞冷冻保存也已有报道。随着胚胎工程技术的不断发展,卵母细胞的冷冻保存越来越受到重视,这将推动卵母细胞的冷冻保存取得更大进展。  相似文献   

3.
试验选用5-6周龄雌性昆明小鼠的成熟卵母细胞,在不同前处理液(10%EG或10%EG+10%DMSO)中平衡5min,然后在冷冻溶液(EFS30、EFS40、EDFS30或EDFS40)中平衡30s后进行OPS法和SSV法玻璃化冷冻保存。试验结果表明:(1)小鼠成熟卵母细胞的OPS法冷冻保存,用EFS冷冻的卵母细胞解冻后形态正常率为75.8%,激活后卵裂率为47.8%;在EDFS30中冷冻保存,解冻后形态正常率为87.2%,卵裂率为62.0%;在EDFS40中冷冻保存,解冻后形态正常率为86.6%,卵裂率为57.4%,与对照组(99.0%和80.5%)相比,差异极显著(P〈0.01)。(2)小鼠成熟卵母细胞的SSV法冷冻保存,用EFS冷冻的卵母细胞解冻后形态正常率为82.7%,卵裂率为47.1%;在EDFS30中冷冻保存,解冻后形态正常率为91.5%,卵裂率为57.5%;在EDFS40中冷冻保存,解冻后形态正常率最高为85.1%,卵裂率为55.9%,与对照组(99.0%和80.5%)相比,差异极显著(P〈0.01)。(3)OPS法和SSV法冷冻小鼠成熟卵母细胞解冻后形态正常率为86.5%和91.6%,卵裂率为53.8%和55.6%.与对照绢相比。差异极显著(P〈0.01)。  相似文献   

4.
近年来,绵羊、山羊胚胎工程技术的快速发展致使对卵母细胞的需求量越来越大。此外,作为家畜种质资源保护体系的组成部分,卵母细胞也是保存优秀雌性家畜遗传资源的重要方式之一。然而,作为胚胎生物技术的重要环节,由于其自身特殊的结构功能特点,卵母细胞对低温和冷冻极其敏感,其冷冻保存研究水平远低于胚胎。因此,如何提高冷冻保存卵母细胞质量是低温生物学和胚胎生物技术研究领域的热点和难点。针对目前绵羊、山羊卵母细胞冷冻保存的最新研究进展和存在问题进行综述,同时针对如何进一步提高绵羊、山羊卵母细胞冷冻保存质量提出建议,以期为之后的研究工作提供理论指导。  相似文献   

5.
细胞骨架系统的稳定对于提高卵母细胞或胚胎冷冻后的存活率及其发育能力具有重要作用。紫杉醇(Taxol)作为细胞骨架稳定剂,可增强α、β-微管蛋白二聚体的紧密联系,增大微管交联,促进微管聚合和稳定。本实验以绵羊体外成熟卵母细胞为材料,旨在探讨紫杉醇预处理对玻璃化冷冻绵羊卵母细胞存活率、形态正常率及体外受精后胚胎发育率的影响。采用0、0.5、1.0、1.5μmol/L的紫杉醇预处理绵羊卵母细胞并进行玻璃化冷冻保存,未经处理的新鲜卵母细胞为对照组。结果表明:采用浓度为0.5μmol/L紫杉醇预处理绵羊卵母细胞冷冻保存效果最佳,其解冻后的存活率(82.38%)与其他3个试验组相比有显著差异性(P0.05);体外受精卵裂率(51.17%)和桑囊胚率(20.30%)也显著高于其他3个试验组(P0.05),但低于对照组(69.42%,34.77%)(P0.05)。由此可见,以0.5μmol/L浓度的紫杉醇预处理组绵羊体外成熟卵母细胞冷冻后能获得较好的效果。  相似文献   

6.
1977年Whittingham首次成功报道冷冻一解冻小鼠MⅡ期卵母细胞产仔,自此许多学者对多种动物及人卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前小鼠、家兔、牛、马、山羊、绵羊及猪等动物卵母细胞的冷冻保存均有报道,而世界上已经有100多个冷冻卵母细胞的婴儿出生。卵母细胞的冷冻保存可为体外受精、核移植、转基因动物的研制提供更方便的材料来源;[第一段]  相似文献   

7.
玻璃化法是近几年才建立起来的一种细胞、胚胎及卵母细胞的冷冻保存技术。Nekagata和Shaw分别于1989年和1991年用此化法冷冻保存小鼠成熟卵母细胞,取得理想结果。本实验对玻璃化法冷冻保存绵羊卵巢内卵母细胞作了尝试。1 材料与方法从屠宰后东北细毛羊取出卵巢,用注射器从直径2~6mm的卵泡中抽取卵丘—卵母细胞复合体,选择正常的用成熟培养液(M199+10%FCS)洗2次后,转入VS_1(20.5%(w/v)二甲基亚砜,  相似文献   

8.
家畜卵母细胞冷冻保存研究进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
自Whittingham(1977)首次成功的报道冷冻-解冻的小鼠卵母细胞活仔以来,国内外诸多学者对家畜及人的卵母细胞冷冻保存进行了研究。目前,已有小鼠、家兔、牛等动物以及人的卵母细胞冷冻成功,并得到了后代。在国内,山羊、绵羊、猪等家畜的卵母细胞冷冻保存也已有报道。随着胚胎工程技术的不断发展,卵母细胞的冷冻保存越来越受到重视,这将推动卵母细胞的冷冻保存取得更大进展。1抗冻保护剂在卵母细胞和胚胎的冷冻保存时,需使用抗冻保护剂,它可以改变细胞在冷冻过程中的物理化学环境,减轻或避免冷冻、解冻过程中的冷冻损伤。抗冻保护剂主要为一…  相似文献   

9.
建立快速、准确、有效的猪卵母细胞冷冻保存效果的判定方法,将有助于促进猪卵母细胞冷冻保存的研究,从而提高猪卵母细胞冷冻保存效果,为哺乳动物配子和胚胎工程方面的研究提供大量优质卵母细胞。作者主要介绍通过形态学观察结果和发育潜力来判定猪卵母细胞冷冻保存效果的一些方法,如检查冷冻解冻后猪卵母细胞形态和超微结构正常情况,或进行体外成熟、体外受精、孤雌激活、显微受精,然后据此对猪的卵母细胞冷冻保存效果进行评判。  相似文献   

10.
卵母细胞冷冻保存具有广泛而潜在的应用价值。文章主要分析了不同冷冻方法对绵羊GV期卵母细胞发育效果的影响。GV期卵母细胞程序化冷冻解冻后形态正常率(54.8%)和体外培养成熟率(14.7%)均显著或极显著低于细管玻璃化冷冻(71.8%,29.5%;P〈0.05)和OPS玻璃化冷冻(78.3%,P〈0.01;35.4%,P〈0.05);3种不同方法冷冻GV期卵母细胞成熟率与对照组相比均差异极显著(P〈0.01)。  相似文献   

11.
小鼠卵母细胞冷冻保存技术研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
卵母细胞的冷冻保存是动物繁殖技术领域生殖细胞冷冻的研究热点。在此介绍了小鼠卵母细胞冷冻保存的研究进展,阐述了小鼠卵母细胞冷冻保存的原理,探讨了冷冻保护剂的作用机理。最后,对小鼠卵母细胞的冷冻保存方法及其原理进行了概括。  相似文献   

12.
哺乳动物卵母细胞的超低温冷冻保存   总被引:1,自引:0,他引:1  
叙述了哺乳动物卵母细胞超低温冷冻保存的研究进展,分析了影响卵母细胞超低温冷冻保存后存活率的关键因素,推荐了较为成效的卵母细胞超低温冷冻保存方法,认为哺乳动物卵母细胞低温保存技术的应用潜力巨大。  相似文献   

13.
牛卵母细胞冷冻保存研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过随时随地提供具有发育能力的卵母细胞,卵母细胞冷冻保存赋予体外受精,核移植,转基因等胚胎工程技术的极大灵活性,还可为珍稀濒危野生动物的保种提供技术参考。综述了牛卵母细胞冷冻保存方法及冷冻保存对牛卵母细胞结构和发育能力的影响。  相似文献   

14.
牛体外成熟卵母细胞冷冻保存的研究   总被引:10,自引:1,他引:9  
本实验探讨了用6各不同方法冷冻保存的牛体外成熟卵母细胞体受精后的发育潜力及其冷冻损伤,尽管用不同方法冷冻的牛卵母细胞多数(86.1%)形态正常,但体外受精后的受精率(30.0%)和卵裂率(7.4%)明显低于对照组(69.0%和52.9%)。卵裂后继续发育的能力严重受损,在6种冷冻方法中,1.6M丙二醇分步平衡、程序冷冻效果最好,受精率和卵裂率分别达36.4%和13.5%,冷冻后卵母细胞发育潜力下降  相似文献   

15.
试验探讨了卵母细胞形态、基础液等因素对小鼠生发泡期卵母细胞冷冻效果的影响,目的在于筛选适合超低温冷冻保存小鼠卵母细胞的冷冻程序。通过这一途径可望建立卵母细胞种子库,并为体外受精、卵核移植和体细胞的克隆研究与应用提供。试验材料。试验结果:①COC组、DO组卵裂率分别是23.17%、30.96%。差异不显著0P〉0.05)。两者都与对照组(60.00%)差异显著(P〈0.01)。②用DMEM(31.25%)和DPBS液(30.28%)作为玻璃化冷冻液的基础液效果差异不显著(P>0.05)。  相似文献   

16.
绵羊卵母细胞体外成熟的研究   总被引:2,自引:1,他引:2  
研究了FSH/LH浓度、年龄和采卵季节对绵羊卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:①FSH/LH能促进绵羊卵母细胞体外成熟,适宜的添加浓度很重妻。本实验条件下,添加量以10μg/ml为宜。②成年绵羊卵母细胞成熟率高于性成熟前绵羊,但无显著差异。③发情季节绵羊卵母细胞较乏情季节易成熟。  相似文献   

17.
为了提高玻璃化冷冻保存山羊卵母细胞的效果,试验用不含Ca2+的玻璃化冷冻液1[30%乙二醇(EG)]、玻璃化冷冻液2[27.5%EG+2.5%二甲基亚砜(DMSO)]和玻璃化冷冻液3(25%EG+5%DMSO)研究抗冻保护剂DMSO和EG的不同浓度配比对山羊卵母细胞形态正常率、孤雌激活率、体外受精卵裂率及胚胎发育能力的影响。结果表明:山羊卵母细胞经玻璃化冷冻液1,2,3处理后细胞形态正常率(97.1%、97.3%、97.3%)与对照组(100%)相比有所降低,但差异不显著(P>0.05),且对卵母细胞均不产生具有化学毒性作用的孤雌激活;山羊卵母细胞经3种玻璃化冷冻液冷冻保存后,玻璃化冷冻液2冷冻保存卵母细胞的囊胚率(13.8%)显著高于玻璃化冷冻液1(5.7%)和玻璃化冷冻液3(5.1%)(P<0.05)。说明采用玻璃化冷冻液2冷冻保存山羊卵母细胞可获得较为理想的效果。  相似文献   

18.
卵母细胞玻璃化冷冻保存对于胚胎生物技术的发展具有重要意义,因其简便、快速、廉价等优点而广泛应用于人类辅助生殖、体外胚胎生产、转基因、克隆等方面.由于受到低温和抗冻保护剂的影响,卵母细胞在冷冻过程中都会造成形态和功能上的损伤,并且存活率和发育能力随之降低.本文以牛、羊卵母细胞玻璃化冷冻保存为例,对卵母细胞玻璃化冷冻保存的...  相似文献   

19.
卵母细胞冷冻保存对于畜牧业生产和人类辅助生殖具有重要意义。随着玻璃化冷冻技术日趋成熟,其现已广泛应用于牛、羊等大家畜的卵母细胞冷冻保存。然而,猪卵母细胞的冷冻保存至今仍处于试验研究阶段,由于猪卵母细胞脂质含量高,对低温敏感,在玻璃化冷冻保存过程中极易受到冷冻保护剂毒性以及渗透胁迫、氧化应激等损伤,造成细胞骨架以及亚细胞器受损,最终导致细胞发育能力降低甚至死亡。近年来,人们在提高猪卵母细胞冷冻保存效率的研究中取得了突破性进展。本文简要介绍了卵母细胞冷冻保存的常见方法及作用机理,总结了猪卵母细胞在玻璃化冷冻过程中造成的细胞损伤类型及影响,概述了人们针对不同类型的冷冻损伤提出的解决方法和取得的成就,并对其应用前景进行展望,为今后提高猪卵母细胞的玻璃化冷冻效率提供新思路。  相似文献   

20.
试验用OPS法对小鼠未成熟卵母细胞进行玻璃化冷冻保存研究,并对解冻后小鼠未成熟卵母细胞的成熟情况进行观察。结果表明:小鼠未成熟卵母细胞在10%EG、10%DMSO前处理后,在EFS30、EFS40、EDFS30和EDFS40中平衡15~45s进行冷冻保存,使卵母细胞解冻后的形态正常率最高达92.4%,与对照组无显著差异(P>0.05),成熟率达40.5%。  相似文献   

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