动物源性食品中泰乐菌素残留ELISA试剂盒的研制     

朱事康 《中国兽药杂志》2009,43(8):5-8

采用杂交瘤技术,筛选并克隆出能够稳定分泌抗泰乐菌素（TYL）单抗的杂交瘤细胞株,免疫BALB／c小白鼠制备抗泰乐菌素单克隆抗体,建立泰乐菌素竞争ELISA检测试剂盒。结果表明,logit／log拟合标准曲线为y=-1．84x＋2．02,相关系数r=0．9944,线性检测范围为1．5～121．5ug／L,半数抑制浓度（IC50）为10.3ug／L,灵敏度为1．5ug／L,检测限为1．5～3．0ug／L;肌肉、肝脏、蜂蜜的添加回收率分别为64％～99％、61％～102％、60．5％～95％;平均批内和批间变异系数均小于10％;泰乐菌素与替米卡星（TIL）的交叉反应为40％,与其他类抗生素无交叉反应;此泰乐菌素试剂盒在4℃可保存6个月以上。本文建立的竞争ELISA检测方法可用于动物源性食品中泰乐菌素残留的定量检测。  相似文献   

阿维菌素单克隆抗体的制备与鉴定     

郭东华  徐世文李术 《中国兽医科技》2006,36(12):1019-1023

将与牛血清白蛋白（BSA）偶联的阿维菌素人工合成抗原AVM-BSA免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了2株分泌抗阿维菌素特异性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2F2和2H10.生物学特性鉴定的结果表明,2株杂交瘤细胞株诱生腹水的效价为1∶6 400,分泌的抗体亚型均为IgM;间接竞争酶联免疫吸附试验结果表明,抗体的50%抑制质量浓度（IC50）为101 ng/mL,2株单克隆抗体与伊维菌素、多拉菌素、红霉素和白霉素均无交叉反应,证实单克隆抗体2H10具有很强的特异性,可用于阿维菌素药物残留免疫分析方法的建立.  相似文献   

甲砜霉素及氟苯尼考胺单克隆抗体的制备及特性鉴定     

金银珍  刘智宏 《中国兽药杂志》2012,46(10):30-32

将氟苯尼考胺与HSA载体蛋白相连作为抗原免疫Balb/c小鼠,经杂交瘤技术获得了两株能稳定分泌抗甲砜霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E及5C。用间接竞争ELISA方法测定,其细胞株1E单克隆抗体的细胞上清液效价为1∶5×103,腹水效价为1∶1×106,抗体亚类为IgG2b,50%抑制浓度(IC50)为15μg/L。其分泌的单克隆抗体与其结构类似物氟苯尼考及氟苯尼考胺的交叉反应率为10.4%和10.8%,和其他化合物基本无交叉反应。体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定,可为检测试剂盒提供长期稳定的抗体。  相似文献   

克伦特罗单克隆抗体的制备及其初步鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨正涛张乃生  史利军 《动物毒物学》2003,18(1):38-42

目的：制备克伦特罗单克隆抗体(McAb)建立克伦特罗ELISA检测方法，为研制检测试剂盒奠定基础。方法：用偶氮化法将克伦特罗与钥孔血蓝蛋白(KLH)牛血清白蛋白(BSA)及卵清白蛋白(OVA)偶联．制备完全抗原，免疫Ballb／c小鼠，建立杂交瘤细胞株以备单抗，并对单抗特异性、交叉反应性及抗原识别位点等特性进行初步鉴定。用HRP标记CL，建立ELISA方法。结果：获得了1H5、1H7、1D6、2F10四株杂交瘤。其中1H5、1H7培养上清效价都在1：2000以上．腹水效价在1：100000以上。对沙丁胺醇交叉反应测定，最小的是1D6，只有2．32％的交叉反应性。最后建立了检测CL的固相抗体竞争ELISA方法。  相似文献   

己烯雌酚单克隆抗体的制备及鉴定   总被引：5，自引：1，他引：4  

常小斌  程天印  王权 《畜牧与兽医》2008,40(10)

用人工合成的己烯雌酚-牛血清白蛋白(DES-BSA)作为抗原免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术建立了1株稳定分泌己烯雌酚单克隆抗体的杂交瘤细胞1F5,经鉴定:杂交瘤细胞染色体数为99.24±2.5,其分泌的抗体亚型为IgG2α。该细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。间接ELISA测定培养上清效价为1∶640,诱生腹水效价3.2×106。ciELISA检测显示其DES 50%抑制质量浓度(IC50)为24μg/L,与水产养殖中常见禁用激素和抗菌药物的交叉反应小,表明该单抗具有较好的敏感性和特异性。  相似文献   

犬伊维菌素中毒的救治     

彭建国  田建云  陈方良 《中国兽医杂志》2006,42(8):51-51

1 发病情况 2000年至2005年，在门诊就诊犬中，出现十几例伊维菌素和阿维菌素中毒人，多为北京犬、吉娃娃、小鹿犬等小体型品种犬和柯利牧羊犬。多为剂量过大，注射或口服间隔过短，注射剂量超过每天0．5mg／kg体重或口服超过2．0mg／kg体重。间隔时间低于7天，或肌肉注射，均易引起中毒。柯利牧羊犬对伊维菌素特别敏感，即使50μg／kg体重伊维菌素，也可引起严重中毒反应。发病较急，往往于注射或口服12～24h后发病，如不及时救治，死亡率可达100％。  相似文献   

抗致病性大肠杆菌O78特异单克隆抗体的研制及其初步应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

杜元钊  朱万光  刘佩兰  范根成 《中国动物检疫》1996,13(1):6-8

应用淋巴细胞杂交瘤技术将提纯O_78:K_80：H_9标准菌株免疫BALB／C小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，获得5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞命名为1G_7、2C_6、3C_1、3E_1、3D_12，这5株杂交瘤细胞经三次克隆化都能稳定分泌抗体。玻板凝集试验、酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光试验结果表明：这5株单抗对所试37个菌株中O_78菌株都能发生反应。但3E_1、3D_12还可与另外6个菌株出现交叉反应。3C_1可与另外所试14个菌株发生反应，1G_7和2C_6则只与O_78菌株发生反应。用上述1G_7，单抗对临床分离123株细菌进行鉴定，与常规单因子血清鉴定结果完全符合。试验结果表明对，O_78特异单抗可以取代常规O_78单因子血清。  相似文献   

氯霉素残留检测阻断ELISA试剂盒的研制及性能测定   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨艳艳  张改平  邓瑞广  王自良  王选年  柴书军  邢广旭 《中国预防兽医学报》2007,29(2):130-134

在建立氯霉素单克隆抗体（CAP mAb）杂交瘤细胞株和阻断ELISA方法的基础上．研制出CAP残留快速检测试剂盒（CAP-kit），并对其性能进行了测定。结果表明，CAP-kit的标准曲线呈典型的S型，符合4参数logit曲线拟合，相关系数R^2=0．9953，检测范围为1．0μg/L～128．0μg/L，灵敏度为0．85μg／L，半数抑制浓度（IC50）为7．54μg/L，检测限为1．0μg/L；牛奶样、猪肉样的平均添加回收率为88．3％、82．5％，平均批内和批间变异系数均〈15％；CAP-kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应（CR％）为150％，与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应；试剂盒在4℃可保存6个月。  相似文献   

液相色谱法测定猪组织中阿维菌素类药物残留量   总被引：18，自引：1，他引：18  

王海  刘素英  单吉浩  吴银良 《中国兽药杂志》2005,39(9):12-15

动物组织中残留的阿维菌素、依维菌素和多拉菌素经乙腈提取,碱性氧化铝固相萃取柱净化后,与荧光衍生化试剂反应,产物用高效液相色谱(荧光检测器)进行检测,实现了阿维菌素类药物的残留分析.本方法在猪组织中测定阿维菌素类药物的检测限为1μg/kg;在猪组织中添加浓度为1、2、5μg/kg时的回收率为55%～75%.  相似文献   

醋酸甲孕酮单克隆抗体的制备与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

蔡小丽  王权  王敏  王希春  吴金节 《畜牧与兽医》2009,41(9)

用人工合成的醋酸甲孕酮-牛血清白蛋白(MPA-BSA)作为抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术筛选得到1株稳定分泌醋酸甲孕酮单克隆抗体的杂交瘤细胞株4C11A3B6,该细胞株经体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。间接ELISA测定培养上清效价为1∶640,诱生腹水效价为1∶2.56×106。经鉴定:杂交瘤细胞分泌的抗体亚型为IgG2а。竞争抑制ELISA(ciELISA)检测显示其IC50为22 ng/mL,与常见抗生素及结构类似物的交叉反应小,表明该单抗具有较好的敏感性和特异性。  相似文献