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【目的】探讨榛子总RNA提取的有效方法,为今后开展榛子的分子生物学等研究奠定基础。【方法】以榛子的成龄叶片、幼嫩叶片和雄花芽为试材,采用植物RNA提取试剂盒、Trizol法、改良的CTAB法Ⅰ、改良的CTAB法Ⅱ、CTAB法和改良的SDS法提取其总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和PCR检测所提取总RNA样品的品质。【结果】除了Trizol法,其他5种方法都能提取到总RNA,但是改良的CTAB法Ⅰ更适合榛子幼嫩叶片、成龄叶片和雄花芽总RNA的提取,此方法提得的总RNA较完整,条带清晰,品质较优,28SrRNA亮度约是18SrRNA的2倍,且无降解现象。经RT-PCR验证,以改良的CTAB法Ⅰ提取的RNA为模板扩增得到的条带清晰,与目的片段大小一致,能够满足后续试验的要求。【结论】改良的CTAB法Ⅰ是榛子幼嫩叶片、成龄叶片和雄花芽等组织总RNA提取的最有效方法。 相似文献
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白桦MADS基因的克隆及序列分析 总被引：3，自引：3，他引：0
在分析了欧洲白桦MADS3与拟南芥AP1中的保守性后,设计了一对引物。以白桦雄花芽为材料,从总RNA中通过RT-PCR分离得到一个MADS基因,其cDNA长738bp,包含了基因完整的编码序列,白桦MADS基因与已发表的欧洲白桦MADS3基因仅相差6个碱基,同源性高达99％;推导氨基酸序列的差异为5个,同源性达97％。分析其氨基酸序列表明,存在典型的MADS MEF2转录因子结构域和K-box结构域。 相似文献
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木本植物组织总RNA提取的要点与原理 总被引：57，自引：1，他引：57
根据提取木本植物组织RNA时所获得的知识和经验，对木本植物组织总RNA提取时所遇到的提取产量低、RNA降解、多酚物质干扰、DNA干扰、多糖干扰、蛋白质干扰及杂质干扰等问题进行了探讨，并提出了具体的解决方法。同时，对各种常用的RNA提取方法进行了分类，并对它们的原理及优劣进行了论述与评价。 相似文献
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【研究目的】寻找烟草各个组织总RNA最佳的提取方法。【方法】以烟草K326的根、茎、叶、蕾、花和种子为材料,分别采用试剂盒法、Trizol法和CTAB法提取烟草6个组织总RNA进行对比。【结果】烟草不同组织总RNA提取方法有所不同,试剂盒法和Trizol法只能提取出根、茎、叶、蕾和花的总RNA,而不能提取种子总RNA;CTAB法能提取出6个组织的RNA。3种方法提取的RNA质量好,均能满足RT-PCR以及后续实验的要求。【结论】试剂盒法较Trizol法和CTAB法简单、快捷,适合于烟草除种子以外其余组织总RNA快速提取,CTAB法适合烟草所有组织总RNA提取。 相似文献
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本文采用改进的共沉淀方法制备Fe3O4纳米粒子，并利用表面活性剂柠檬酸对其表面改性；然后利用溶胶凝胶法，催化TEOS水解和缩合反应，使SiO2包裹在Fe3O4纳米粒子表面，成功制备出了Fe3O4@SiO2复合纳米粒子。结果表明，Fe3O4@SiO2复合纳米粒子粒径在200-400 nm之间，粒径均匀，具有超顺磁性，磁响应时间在10-20 s，半沉降时间在20 min。根据高盐吸附低盐洗脱原理，建立了一种以磁性微球为载体的核酸快速提取和纯化方法。在白桦基因组DNA提取中，OD260/OD280均在1.8左右，OD260/OD230均在2.0以上，提取的质量和浓度比传统方法要好。在白桦RNA提取过程中，OD260/OD280和OD260/OD230均在2.0以上，提取的RNA浓度要比传统方法更高。磁珠法与传统方法比较时，核酸提取纯化效果上更佳，提取速度快、安全、成本低，具有很高的推广价值。 相似文献
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《东北林业大学学报》2015,(8)
以白桦(Betula platyphylla Suks.)木质部为试验材料,分别采用TCA—丙酮提取、酚提取和试剂盒提取3种方法提取白桦木质部总蛋白。利用试剂盒定量和聚丙烯酰胺凝胶电泳、双向电泳技术比较3种提取方法的蛋白质提取效率、提取质量。同时对酚提取法进行改良,建立适用于白桦木质部蛋白的提取方法。研究结果表明,改良的酚提取法提取的白桦木质部蛋白提取量最大,电泳条带清晰,丰富,质量较高。2-DE电泳得到的蛋白凝胶背景干净,蛋白质点清晰。因此,改良的酚提取法是较适合于白桦木质部蛋白的提取方法。 相似文献
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以白桦（ Betula platyphylla Suks．）木质部为试验材料,分别采用TCA—丙酮提取、酚提取和试剂盒提取3种方法提取白桦木质部总蛋白。利用试剂盒定量和聚丙烯酰胺凝胶电泳、双向电泳技术比较3种提取方法的蛋白质提取效率、提取质量。同时对酚提取法进行改良,建立适用于白桦木质部蛋白的提取方法。研究结果表明,改良的酚提取法提取的白桦木质部蛋白提取量最大,电泳条带清晰,丰富,质量较高。2－DE电泳得到的蛋白凝胶背景干净,蛋白质点清晰。因此,改良的酚提取法是较适合于白桦木质部蛋白的提取方法。 相似文献
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针对棉花组织总RNA难以提取、不同组织的提取方法难以统一的问题，借鉴Jaakola等的越橘果实总RNA提取方法（即CTAB-PVP法），对棉花组织总RNA的提取效果进行了分析。实验结果表明：得到的棉花纤维、胚珠、叶片、胚根、花瓣、下胚轴和花药各组织的RNA完整性好，其D260／D280比值为1．7～2．0，产率30～180pg／g（鲜质量）；用开花后15d纤维的RNA为材料进行反转录，再利用RT-PCR和3’RACE技术进行克隆，各获得1个大小为542和712bp的cDNA克隆，经序列分析鉴定，这2个片段分别编码棉花微管结合蛋白和微丝结合蛋白。 相似文献
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将小鼠的不同脏器用传统的组织研磨方法和近年来开发出来的全自动样品快速研磨机进行匀浆，产物提取总RNA后，用01igodT进行反转录，然后利用小鼠β-Actin基因的特异引物和Taqman探针进行定量，结果发现对于较难捣碎的组织如小鼠尾巴和肌肉，用传统的组织研磨方法和未优化的多样品组织匀浆方法制备的RNA产量没有差别；对于较易磨碎的组织如小鼠心、肺和胃组织，未优化的多样品组织匀浆方法制备的RNA产量反而不如传统的组织研磨方法；通过降低多样品组织捣碎仪匀浆时的温度或匀浆时加入提取RNA的RNAisoPlus等优化措施后，多样品组织匀浆方法制备的RNA产量比传统的组织研磨方法有所提高，不同样品中获得的D-hctinRNA拷贝数趋于一致。利用优化的多样品组织匀浆方法制备RNA具有快速、和产量高、样品处理过程中人为因素少等优点，特别适合于大量RNA样品的制备。 相似文献
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以5种鲜切花为材料,分别采用Trizol法、异硫氰酸胍法、改良十六烷基三甲基溴化铵（Cetyltrimethyl ammonium bromide,CTAB）法和RNA plant试剂盒法提取总RNA,并运用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测比较RNA的完整性和纯度.结果表明,Trizol法和异硫氰酸胍法对百合（Lilium longiflorum）、非洲菊（Gerbera jamesonii）和香石竹（Dianthus caryophyllus）鲜切花RNA的提取效果较好,但不适于月季（Rosa hybrid）和姜花（Hedychium coronarium）的RNA提取.改良CTAB法和RNA plant试剂盒法对鲜切花RNA的提取具有普遍适用性,提取的RNA完整性好、纯度高、不易降解.其中改良CTAB法还具有成本低、提取量大等优点,是提取月季、百合、白姜花、非洲菊和香石竹鲜切花组织RNA的较理想方法. 相似文献
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落叶松RNA提取方法对比研究 总被引：8，自引：1，他引：8
以华北落叶松(Larix principis—rupprechtii Mayr)为试材，采用2种RNA提取方法，同时做了初提总RNA纯化对比试验，通过琼脂糖凝胶电泳和紫外光检测得到RNA的完整性和提取纯度，并计算RNA收率。试验结果表明，采用Concert试剂法提取和DNA酶提纯法纯化能够高效地从华北落叶松组织中分离获得纯度高、完整性好的RNA样品。 相似文献
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苦瓜性别分化的形态与组织化学研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以石蜡切片法研究苦瓜性别分化的形态学．苦瓜的性别分化首先要经过两性期，然后再分别向雌或雄的方向发育．以显微分光光度法分析两性花及典型发育时期的雄、雌花中雄蕊和雌蕊组织的ＲＮＡ和蛋白质的相对含量，得出两性花的发育方向与相应组织中的ＲＮＡ和蛋白质合成能力的强弱有关．在苦瓜的性别分化与表达中，雄蕊组织和雌蕊组织的ＲＮＡ和蛋白质合成能力总是一强一弱，从而保证了性别分化的结果是某一性别的单性花 相似文献
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5种种源白桦木材干缩性的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
该研究主要对 5种种源新培育速生白桦木材的弦向、径向、体积全干干缩率和差异干缩及弦向、径向、体积气干干缩率和差异干缩等 4个性状进行了测试 ,并根据测试结果进行了变异分析及方差分析 .结果表明 :据此可用来选育纵向干缩率小、差异干缩小、尺寸稳定性好的优良树种 相似文献
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适宜于实验教学的动物组织总RNA提取的操作方法 总被引：1，自引：0，他引：1
为探索适宜于实验教学的动物组织总RNA的提取方法,采用氯仿处理实验器皿、耗材和水以降低外源性RNA酶对RNA的降解作用。结果表明,操作过程中合理利用氯仿能够有效降低外源性RNA酶的污染;与DEPC水处理效果相比,提取的总RNA均可用于分子生物学研究和RT-PCR扩增,但使用氯仿处理更为安全。 相似文献
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甘肃省屈吴山自然保护区不同群落类型中白桦的大小级结构与种群动态 总被引：2，自引：3，他引：2
应用植物群落生态学的研究方法,对甘肃省屈吴山自然保护区不同群落类型中白桦种群胸径、株高的大小级结构以及动态进行了测定和分析,探讨了其动态过程及其机制。研究结果表明:在混交林群落中,白桦种群的大小级结构分布图的形状基本相似,并一致呈现为哑铃型,存活曲线为双峰曲线,为间歇型种群,幼苗、幼树贮备不足,具有衰退趋势;纯林中的白桦种群的大小结构为金字塔型,存活曲线为中间微凹而呈单折直线,种群具有稳定结构,能够长时间生存发展下去。探讨了导致种群结构缢缩的种群更新障碍及竞争效应。 相似文献
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[目的]探讨花生不同组织部位RNA提取方法,为开展花生分子生物学研究奠定基础.[方法]在CTAB法的基础上,设计一种改良的mCTAB-dLiC1法,其使用高质量体积分数的KAC除去组织中的多糖,使用两次10.0 mol/L的LiC1沉淀RNA,采用琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量,核酸蛋白分析仪测定RNA纯度,并通过逆转录、RT-PCR和cDNA-SCoT验证其质量.[结果]采用mCTAB-dLiC1法的RNA产率为554.80 μg/g,RNA的A260/A280比率为1.89,RNA非变性琼脂糖凝胶电泳未出现可见的DNA条带;扩增的28S和18S条带比值为2∶1,且条带清晰无拖尾现象;提取的RNA通过逆转录、RT-PCR扩增和cDNA-SCoT扩增验证,均获得较好的扩增效果,获得的RNA和cDNA质量好.[结论]mCTAB-dLiCl RNA提取方法是一种高效提取花生各组织部位RNA的方法,可在花生分子生物学研究中应用. 相似文献
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白桦是北方地区现代园林绿化中新兴的树种,在园林绿地中的应用越来越广泛。主要阐述了白桦在太原地区的人工种苗繁殖及后期的管理工作,为白桦的优质育苗提供一定的理论和实践依据。 相似文献