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猪瘟免疫球蛋白提取及荧光抗体制备 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验采用两种操作程序，对常规提取ＩｇＧ制备荧光抗体的操作程序进行了修改和简化，缩短了每个环节所用的时间，用饱和硫酸铵盐析出的蛋白，采用透析过夜后一次过葡聚糖Ｇ２５凝胶柱，即达将盐除尽纯化之目的；用３３％饱和硫酸铵盐析分离ＩｇＧ和已除盐的蛋白液过ＤＥＡＥ纤维素柱（ＤＥ５２）分离提取ＩｇＧ异曲同功，用本动物制取高免血清提取ＩｇＧ并采用过葡聚糖Ｇ２５凝胶柱纯化，在标记荧光后省略了加入脏粉这一常规环节， 相似文献
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通过对蛋黄中抗嗜水气单胞菌IgY的提取,分别进行了两种粗提方法(水稀释法、Pectin法)和纯化方法(硫酸铵法、PEG6000法)的比较。结果显示,当蛋黄液经pH5.0蒸馏水10倍稀释粗提后,上清液中脂肪和IgY残余率分别为32.69%和68.34%,效果较好。采用12%(w/v)PEG6000、33%(v/v)饱和硫酸铵纯化IgY,其免疫活性残余率分别为63.5%和64.1%。SDS-PAGE显示,水稀释法和Pectin法提取的上清液中杂蛋白减少,硫酸铵和PEG6000纯化后的上清液中几乎无其他杂带。研究表明,水稀释法和Pectin法提取IgY具有简便、高效和无污染的特点,硫酸铵和PEG6000适合纯化IgY。 相似文献
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糖基化改善蛋清蛋白功能性的研究 总被引：3，自引：1，他引：2
试验研究了糖基化对蛋清蛋白功能性的影响.糖基化蛋清蛋白是通过将蛋清蛋白一麦芽糊精混合物在60 ℃,65%相对湿度条件下反应0～5 d制得.糖基化蛋白粉溶解性在反应前期(0～3 d)变化不明显,反应4～5 d溶解性有所降低.糖基化蛋白较未改性的蛋清蛋白在热稳定性、凝胶性、乳化性、起泡性方面都得到了显著提高.本研究的结果表明糖基化方法是提高蛋清蛋白功能性的一种有效途径. 相似文献
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本试验分别用蛋白G亲和层析法、饱和硫酸铵法和辛酸-硫酸铵法纯化兔抗H9N2亚型禽流感病毒血清,发现蛋白G亲和层析法纯化得到的抗体纯度最高,回收率较低,抗体活性未变,操作简便,但成本较高,适合实验室研究及小量样品的纯化;饱和硫酸铵法纯化得到的抗体纯度较蛋白G亲和层析法低一些,抗体活性不变,可通过多次盐析来提高抗体纯度,多作为蛋白G亲和层析法纯化前的初步纯化;辛酸-硫酸铵法纯化得到的抗体纯度不及前两种方法,回收率较高,抗体活性亦无改变,纯化时对pH的精确性和辛酸的浓度要求较高,多用于样品的粗提和单抗的纯化。 相似文献
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试验旨在鉴定解淀粉芽孢杆菌SSY2的抗霉菌物质及其理化性质。通过活性组分分析、硫酸铵沉淀、超滤除盐等方法鉴定并提取抗菌物质；通过对抗霉菌物质产生的时间、酶活性、温度、酸碱度（pH）、稳定性及储存温度的检测初步确定其理化性质。结果表明，不同组分对霉菌的降解率不同，菌液上清液对霉菌的降解能力最强，菌液发酵液的降解能力次之，胞内液降解能力最差。因此，初步确定解淀粉芽孢杆菌SSY2的抗菌物质活性成分是一种胞外分泌物，主要存在于菌液上清液；经30%、60%、80%和100%饱和硫酸铵沉淀，确定最佳硫酸铵饱和浓度为60%；超滤纯化后得到分子质量大于3 ku的抗菌活性物质。理化性质检测结果表明，该抗菌物质能在对数期早期（24 h）开始产生；具有产蛋白酶活性，对胃蛋白酶具有一定抵抗力，但对蛋白酶K、碱性和中性蛋白酶的抵抗力较低；在60~121℃抗菌活性稳定，证明其对热不敏感；耐酸性较强，在pH 6.0~8.0环境中对霉菌的抗菌活性稳定；此外，抗菌物质具有良好的传代稳定性，可在4℃条件下长期保存。本试验结果可为后续研发霉菌生物防控制剂提供依据。 相似文献