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相似文献
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1.
从英国中心兽医实验室(CVL)引进禽流感病毒14种血凝素亚型(H1~H14)的标准毒株,经9~11日龄的SPF鸡胚增殖、传代后收取感染鸡胚的羊水及尿囊液,经1000xg离心15分钟后,收取上清作为免疫原。取8只12周龄SPF鸡分成A、B两组,进行人工感染鸡的抗体消长规律试验。选用H3毒株制备的免疫原,按1ml/只的剂量翅静脉接种A、B两组的8只SPF鸡,1周后B组的4只鸡复免一次,分别用HI和AGP试验测定2种方法免疫鸡的抗体水平.监测结果表明:经1次免疫的鸡(A组)于免疫后15天HI抗体升至最高,以后抗体逐渐下降,且产生的抗体个体差异不大,AGP试验结果只有于免疫后20~55天内全部为阴性;经重复免疫的鸡(B组),于初免后15~45天内HI抗体都维持较高水平,且产生的抗体个体差异不大,AGP试验结果在初免疫后1575天内全部为阳性。据此,我们根据禽流感病毒株毒力的强弱(参照其EID50,用纯化后的鸡胚尿囊液制备的免疫原,按05~25ml/只的剂量分别免疫12周龄SPF鸡,1周后加强免疫一次于二免后10~15天放血,制备出禽流感病毒14个血凝素亚型的分型血清,并有霍乱滤液(RDE)法对血清进行了处理。  相似文献   

2.
鸡毒支原体F株的毒力回归试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
将鸡毒支原体F株经培养基连续传36代后的菌株培养物以鼻内和胸腔内感染接种的方式在SPF鸡体内连续回传5代,然后分别取各回传代次的F株接种无鸡毒支原体和滑液支原体感染的小雏和SPF鸡胚,同时以没经回的原始代次作为对照,比较各代次F株的毒力变化情况。试验结果表明,经回传SPF鸡5代的各代次F株培养物接种小雏对鸡不致病,所有接种鸡气囊 未出现病变,和未经回传SPF鸡的F株结果完全一致;经过回传的各代次F  相似文献   

3.
腺胃型鸡传染性支气管炎病毒Hu98株的分离鉴定   总被引:4,自引:0,他引:4  
1998年首次从哈尔滨市某鸡场鸡腺胃肿大为特征的病例中分离到IBV-H98毒株。将该病毒株接种SPF鸡胚并传至5代(F5),结果接种胚出现规律性死亡和典型胚胎病变特征,EID50为10^-6.40/0.2mL。IBV-Hu98F5感染SPF鸡胚尿囊液经负染电镜观察,可见直径为80 ̄120nm、有囊膜和纤突的冠状病毒粒子。用IBV-Hu98F5毒株人工感染1日龄SPF鸡能引起与自然病例相似的病理组织  相似文献   

4.
腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定   总被引:36,自引:8,他引:28  
从1997年在辽宁省大连市某鸡场发生的一种以腺胃肿大为特征的鸡的传染病病例中收集腺胃组织(D971)接种SPF鸡胚,传至13代,具有规律性死亡和典型胚胎病变特征,EID50为10-6.48/0.2ml。D971毒株感染SPF鸡胚尿囊液经负染电镜观察,可见直径为80~120nm,有囊膜和纤突的冠状病毒粒子。D971毒株经卵磷脂酶C处理后能凝集鸡红细胞,并能特异的被D971多抗所抑制。用反转录聚合酶链反应获得了D971毒株免原(S1)基因cDNA,经1%琼脂糖凝胶电泳可见1.7kb的特征性条带。用D971毒株接种SPF鸡,能引起与自然病例相似的病理变化,并分离到病毒。用D971毒株可直接感染SPF鸡胚成纤维细胞。结果证实从腺胃病变型IB鸡群中分离的D971毒株是冠状病毒科IBV成员。  相似文献   

5.
生产设苗制备能长期保存且稳定性好、高滴度的生产种毒(种毒批 )是生产的关键。笔者结合生产实际 ,制备了鸡传染性喉气管炎和鸡痘冻干种毒 (种毒批 ) ,实践应用效果很好 ,现介绍给同行以供参考。1 材料和方法1.1 生产种毒鸡痘基础种子由中国兽医药品监察所提供的冻干鸡痘鹌鹑化弱毒F2 82E4株。经SPF鸡舍提供的SPF鸡胚绒毛尿囊膜传代 ,作为生产种毒 ,于 - 2 0℃保存。鸡传染性喉气管炎基础种子由广东生物药厂提供的K3 17株。经黑龙江省生物制品一厂SPF舍提供SPF鸡胚绒毛尿囊膜传代 ,作为生产种毒 - 2 0℃保存。1.2 鸡胚由…  相似文献   

6.
采用新城疫病毒克隆79株和传染性法氏囊病病毒F16及Vile株为种毒,分别接种SPF鸡胚,收取尿囊液毒及胚毒,经甲醛灭活,按一定比例混合,以白油为佐剂制成二联油剂灭活苗。用该苗接种易感鸡,免疫后14天产生免疫力,21天攻毒保护率达100%。1993-1995年在我省烟台,威海、青岛的一些鸡场免疫20余万只鸡,获得满意效果。  相似文献   

7.
鸡传染性支气管炎可疑病料的病毒分离及初步鉴定   总被引:8,自引:0,他引:8  
19份鸡传染性支气管炎可疑病料通过SPF鸡和鸡胚感染试验,血凝试验,气管环培养感染试验,单克隆抗体ELISA和电镜形态学观察,初步证明其中13份病料含IB病毒,在用其中9份接种8-9周龄SPF鸡进行的发病试验中,全部呈现临床症状,其中3份引起高死亡率(60-80%),接种后5周从存活鸡采血作IBV血凝抑制试验,结果均为阳性。  相似文献   

8.
DNA免疫防制鸡传染性支气管炎的探索研究   总被引:11,自引:0,他引:11  
ORF完整的IBV类M41株S1基因cDNA插入真核表达质粒pCI CMV启动子下游我隆位点,构成pCIS1用于1周龄SPF雏鸡的DNA免疫试验。试验鸡生疏腿部肌肉注射pCIS1DNA100g,2周后加强免疫一次。二次免疫2周后,代感染IBV H52株。结果,IBV人工感染后第4天气管-泄殖腔棉拭子鸡胚病毒分离阳性者,免疫试验组为1/6,而对照组为6/6,鸡胚病毒中和试验显示,二次免疫后临感染前及  相似文献   

9.
本文回顾了中国SPF鸡发展及SPF鸡微生物质控标准建立的进程。对比了中外一些国家SPF鸡微生物质量控制标准的异同。分析了中国SPF鸡微生物质量控制标准中的有关问题。指出:目前中国按现订SPF鸡微生物质量控制标准生产的SPF鸡和鸡胚,完全符合WHO和世界大多数国家共识的作为实验动物和生物制品生产原材料的要求,完全可以适应国际科技和经贸交流,保证科学研究的应用。  相似文献   

10.
浅析中国SPF鸡微生物质量控制标准   总被引:2,自引:0,他引:2  
本文回顾了中国SPF鸡发展及SPF鸡微生物质控标准建立的进程。对比了中外一些国家SPF鸡微生物质量控制标准的异同。分析了中国SPF鸡微生物质量控制标准中的有关问题。指出:目前中国按现订SPF鸡微生物质量控制标准生产的SPF鸡和鸡胚,完全符合WHO和世界大多数国家共识的作为实验动物和生物制品生产原材料的要求,完全可以适应国际科技和经贸交流,保证科学研究的应用。  相似文献   

11.
本研究的病毒分离物,是来源于天津地区某鸡场暴发的28日龄病鸡。此毒株对SPF雏鸡几乎100%感染发病,死亡率达30 ̄90%。此毒有很强的亲肾组织性,引起肾病变肿大、苍白、斑驳状,肾小管和输尿管有尿酸盐沉积。对SPF鸡感染率98 ̄100%,可致鸡胚侏儒化、卷曲等特征性病变。在10日龄SPF鸡胚连传10代后,其毒价可达10^6.5EID50/0.1ml。鸡胚毒不凝集鸡红细胞,可干扰NDV血凝素的生成,  相似文献   

12.
本研究采用AGP、HI等试验方法,对经H9亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫、免疫后攻毒以及经H9N2活毒人工感染后的SPF鸡抗体产生、消长规律进行了测定,结果表明人工感染SPF鸡和免疫鸡一周后,AGP的检出率即可达到100%;H9亚型禽流感油乳剂灭活苗自免疫后一周内即可产生HI抗体,21-28天达到高峰,并能对相同亚型病毒感染引发良好的免疫反应。  相似文献   

13.
鸡新城疫Ⅰ系活疫苗是鸡新城疫系列活疫苗中单产最低的一个苗种 ,许多厂家不再生产该苗或为产品配套象征性的生产。但由于该苗产生抗体快 ,被现地兽医工作者作为防制鸡新城疫病紧急接种的首选疫苗。为了解决这一矛盾 ,我们在提高鸡新城疫Ⅰ系苗产品的生产工艺进行了改进 ,使单产明显提高 ,现介绍如下供参考 :1 材料和方法1.1 种毒由中国兽医药监察所购入鸡新城疫Ⅰ系冻干种毒 ,经SPF鸡胚接种自行繁殖 ,收获感染胚液血凝价在 1∶6 4 0以上 ,ELD50 / 0 .1mL也在 10 7.4以上 ,加适量冻干保护剂制成冻干生产种毒备用。1.2 SPF鸡胚…  相似文献   

14.
鸡传染性法氏囊病活疫苗在对鸡的传染性法氏囊病免疫上广泛应用 ,其特点是使用方便 ,免疫效果好。但在其效力检验上 ,我国目前使用的方法与国外一些国家使用的方法存在着差异。为此我们对鸡传染性法氏囊病活疫苗进行了效力检验对比试验 ,现报告如下。1 试验材料SPF鸡胚 :由黑龙江化血研生物技术有限公司SPF鸡场提供SPF种蛋 ,本实验室自行孵化。鸡胚成纤维细胞 :由SPF胚自行制备的鸡胚成纤维细胞(CEF)。鸡传染性法氏囊病活疫苗 :由黑龙江省生物制品一厂提供(批号 :2 0 0 0 5 2 ) ,每瓶 10 0 0羽份。由某合资公司提供 (批号 :…  相似文献   

15.
产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA探针的制备及应用研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
用纯化的产蛋下降综合征(EDS-76)病毒(H91毒株)悬液提取的核酸,经琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量较大、背景清晰的核酸带。用BamHI酶消化产生4个片段,大小分别为17kb、10kb、4.0kb和2.0kb。将其中的2.0kb片段克隆进pUC18DNA载体中,重组质粒DNA用digoxigenin标记作为DNA探针,在dotblot中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒(MDV)DNA、鸡传染性贫血病毒(CAV)DNA、SPF鸡基因组DNA等核酸反应,只与3株EDS病毒(EDS标准毒株AV-127、EDSH91毒株和从健康鹅体中分离的EDSY81毒株)DNA呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后24h即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出EDS病毒DNA,在感染后35h仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用SPF鸡胚分离病毒,并用HA和HI试验检测分离病毒的特异性;在感染过程中,同时检测了血清中HI抗体的消长情况。结果表明,人工感染鸡排毒至少可以维持2个月左右,而且血清中HI抗体即使很高,也不能阻止感染鸡的排毒。  相似文献   

16.
鸡传染性喉气管炎免疫扩散试验研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
鸡传染性喉气管炎免疫扩散试验的最佳条件是:用SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)或鸡胚肾细胞(CEK)制备抗原,用8%NaCl的PBS(pH7.2)配制1%的琼脂糖,孔径、孔距均为3mm。  相似文献   

17.
从疑似IBD病鸡的法氏囊组织中分离到1株ARV   总被引:5,自引:2,他引:3  
从暴发类似传染性法氏囊病(IBD)的江苏省某鸡场采集病鸡法氏囊组织制成组织悬液,接种鸡胚卵黄囊,部分鸡胚3~5d死亡,部分鸡胚不死亡但有病变。用感染胚卵黄囊和绒尿膜混合物,接种鸡胚成纤维细胞(CEF),盲传3代后,发现以合胞体为特征的细胞病变(CPE)。感染细胞做超薄切片电镜观察,可见细胞浆内病毒粒子呈整齐的晶格状排列。用免疫沉淀法提取病毒抽提核酸,经SDS-PAGE电泳,可见规律排列的10条带,呈3-3-1-3排列。与禽呼肠孤病毒(ARV)参考毒株S1133株的核酸谱带的数目和位置相同。血清学试验与ARV呈阳性反应,与传染性法氏囊病病毒(IBDV)呈阴性反应。证明分离病毒为ARV  相似文献   

18.
鸡传染性腺胃病病原T95株的分离与鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
自某疫区的鸡腺胃病鸡群中分离到T95毒株,在SPF鸡胚稳定传代至8代,具有规律性死亡和典型胚胎病变特征,T95株感染鸡胚尿囊液提纯的病毒液经负染后电镜观察:病毒粒子大小为80 ̄160nm,有囊膜,表面具纤突,呈典型冠状病毒形态。病毒对热和氯仿敏感,耐酸,能抵抗1%胰酶,无直接血凝性,但经卵磷脂酶C处理后能凝结鸡红细胞。经单抗介导的ELISA检测,T95株与IBV有密切的血清学关系。  相似文献   

19.
禽脑脊髓炎病毒的提纯和电镜观察   总被引:7,自引:0,他引:7  
将禽脑脊髓炎病毒VanRoekel株、1143株和N937分别经卵黄囊接种于6日龄SPF鸡胚,接毒10日后解剖鸡胚,收集尿囊液,采集脑,消化道和胰腺,用玻璃匀浆器制备20%的组织悬液。  相似文献   

20.
我们对国外引入的IBD弱毒疫苗进行了分离,复制和测定,该病毒可接种SPF鸡胚增殖,致难胚死亡,并产生IBD病变;在SPF鸡胚CFF上繁殖,产生CPE变化,并可被行异性IBD抗血清中和;琼脂扩散与IBD(+)血清有明显的沉淀线,因此说明所分离的毒株是IBD病毒,并测得其毒价为10^-6TCID50。  相似文献   

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