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RAPD法与盐溶蛋白PAGE法鉴定玉米种子纯度的对比试验 总被引:1,自引:0,他引:1
以吉林省玉米主推杂交种21个组合为试材,利用RAPD法与盐溶蛋白法(PAGE)进行了鉴定品种与杂交种纯度的对比试验。结果表明:盐溶蛋白法能很好地鉴定出19个组合,且具有简单、快速、准确、稳定和低成本的特点,可用于大批量检测,但因一些种子蛋白质水平差异较小,有4个组合维以鉴定,具有一定的局限性。RAPD分子标记法经过40个引物的重复筛选,仅用4个引物就能鉴定出所有的组合,具有独特的优越性,但因设备条件要求高,成本相对较高,不宜用于大批量。因此,在应用盐溶蛋白法为主批量检测种子的基础上,对难以鉴定的品种可采用RAPD法作为辅助手段进行鉴定。 相似文献
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《农业科学与技术》2017,(2)
[目的]通过利用SSR分子标记技术测定向日葵种子纯度,以期为生产加工应用提供准确、便捷的杂交种种子纯度鉴定方法提供依据。[方法]该研究以新食葵6号及其双亲的DNA为模板,通过DNA提取、PCR扩增反应和制作电泳的步骤,进行了约100对SSR物分子标记的筛选。[结果]SSR多态引物标记532在新食葵6号母本分别产生特异条带大小为496bp,父本特异标记条带大小为451 bp;引物标记574在母本上特异条带大小为364 bp,父本上的特异标记条带大小为384 bp,同时室内分子鉴定的纯度和田间鉴定纯度基本一致;通过SSR分子标记方法可出可得到区分父本、母本和杂交种的引物标记532和574,这2个引物标记可有效用于鉴定上述新食葵6号杂交种种子的纯度,辨别种子的真伪。[结论]该方法具有简单,快速、准确、重演性高的优点,目前该方法已成为向日葵品种鉴定的主要方法。 相似文献
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[目的]通过利用SSR分子标记技术测定向日葵种子纯度,以期为生产加工应用提供准确、便捷的杂交种种子纯度鉴定方法提供依据.[方法]该研究以新食葵6号及其双亲的DNA为模板,通过DNA提取、PCR扩增反应和 制作电泳的步骤,进行了约100对SSR物分子标记的筛选.[结果]SSR多态引物标记532在新食葵6号母本分别产生特异条带大小为496bp,父本特异标记条带大小为451 bp;引物标记574在母本上特异条带大小为364 bp,父本上的特异标记条带大小为384 bp,同时室内分子鉴定的纯度和田间鉴定纯度基本一致;通过SSR分子标记方法可出可得到区分父本、母本和杂交种的引物标记532和574,这2个引物标记可有效用于鉴定上述新食葵6号杂交种种子的纯度,辨别种子的真伪.[结论]该方法具有简单,快速、准确、重演性高的优点,目前该方法已成为向日葵品种鉴定的主要方法. 相似文献
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[目的]建立一套快速、准确、高效的茄子杂交种纯度鉴定方法,为其制种过程中除伪存真及大面积推广应用提供技术支持.[方法]挑选已公布的48对SSR引物对2个茄子杂交种15-16和1-7的亲本进行多态性标记筛选,选取有效引物对茄子杂交种进行纯度鉴定,并结合田间植株纯度鉴定,验证SSR分子标记纯度鉴定的有效性.[结果]在48对SSR引物中,有12对引物在杂交种15-16亲本材料中存在多态性,其多态性引物带型呈互补带型的有8对(SM14、SM15、SM17、SM20、SM29、SM30、SM34和SM45);有5对引物在杂交种1-7亲本材料中存在多态性,其多态性引物带型呈互补带型的有4对(SM15、SM20、SM24和SM29).分别选取2对呈互补带型的SSR引物进行杂交种纯度鉴定,结果显示杂交种15-16和1-7的纯度分别为99%和100%,与田间种植鉴定结果一致.[结论]采用SSR分子标记检测茄子杂交种纯度具有准确、高效的特点,可为茄子杂交制种过程中真假杂种鉴定提供技术支持. 相似文献
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SSR标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法改进 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]改良SSR标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,提高大规模SSR分子标记分析的工作效率。[方法]在利用SSR标记构建中国春/兰考大粒F2群体遗传图谱的基础上,对变性PAGE点样方法进行改进,并对中国春/兰考大粒筛选的122对差异引物进行组合分析。[结果]试验表明,引物扩增条带特异性强、覆盖范围不大即可采用两次点样法分析;两次点样和单次点样的凝胶扩增条带均清晰可辨;分析相同数量的样品,两次点样法较单次点样法节约了41%的试验时间,节约了50%的试剂用量。[结论]两次点样法简化了试验步骤,节约了试验成本,加速了试验进程,更适用于遗传作图。 相似文献
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4个加工番茄新品种SSR指纹图谱的构建与品种鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
[目的]探明加工番茄主要品种的遗传变异,建立准确高效的种子纯度鉴定方法.[方法]利用SSR引物对4个加工番茄杂交品种及其8个亲本进行PCR扩增,经4;的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,进行带型分析.[结果]从34对SSR引物中筛选出10对扩增产物具有稳定多态性的引物,这些引物分布在番茄整个基因组,每对引物可以检测到2~4个数目不等的多态性片段,共28个多态性片段,平均2.8个,片段大小介于60~150 bp,成功构建出4个加工番茄杂交种及其8个亲本的指纹图谱,并鉴定出了这4个杂交种的共显性标记.[结论]这些标记不仅可用于亲本材料和杂交品种的真伪鉴别,还可为杂交种纯度的鉴定提供可靠的方法,对亲本知识权的保护及杂交种推广具有重要意义. 相似文献
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SSR标记鉴定玉米品种真实性及纯度的研究 总被引:5,自引:1,他引:4
[目的]探讨杂交玉米及其亲本种子真实性和纯度的分子检测判读标准。[方法]以16个玉米杂交种及其双亲和202个骨干自交系为引物筛选材料,分别构建3个杂交种和3个自交系人工群体的验证试验材料,用CTAB法提取幼苗叶片DNA,选137对SSR引物进行SSR扩增及产物检测,用于玉米品种的真实性鉴定和纯度检测,并与同批移栽至大田的种植鉴定结果相比较。[结果]从137对SSR引物中筛选出了多态性信息含量(PIC值)高、扩增条带清晰和重复性好的20对一级和20对二级核心引物,用一级核心引物对杂交种人工群体进行真实性鉴定,根据一级核心引物的扩增结果,从中选取3对(phi080、umc1196、umc2084)表现较好的引物用于杂交种人工群体的纯度检测。ssR分子检测结果与田间种植鉴定结果具有高度一致性。[结论]利用SSR标记技术鉴定玉米品种真实性和纯度的方法是可行的。 相似文献
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【目的】分析甘蓝杂交种纯度的SSR分子标记鉴定结果与田间形态学鉴定结果的一致性,寻找一种快速、准确鉴定甘蓝杂交种纯度的方法。【方法】选用SSR分子标记,筛选杂交种具有父母本互补带型的引物,用其鉴定“秦甘50”杂交种的纯度,并与田间常规鉴定结果的一致性进行比较。【结果】300对SSR分子标记引物中,有1对引物SQ1019对“秦甘50”杂交种表现为父母本互补带型;利用引物SQ1019标记鉴定“秦甘50”大田杂交种的纯度为96.3%;“秦甘50”大田杂交种经田间鉴定纯度为96.0%,2种鉴定结果的一致性高达99.7%。【结论】SQ1019是SSR分子标记“秦甘50”杂交种的特异引物,SSR分子标记是一种快速、准确鉴定“秦甘50”杂交种纯度的方法,其结果与田间常规鉴定结果相一致。 相似文献
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[目的]通过对5个石榴品种的蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)分析,为石榴种质资源的鉴定提供科学依据。[方法]以5个石榴品种(大红袍、冰糖籽、大青皮、软籽石榴、谢花甜)为试验材料,分别提取其总蛋白、盐溶蛋白、水溶蛋白,并进行PAGE电泳检测。[结果]蛋白质的PAGE电泳具有条带的多样性,不仅能很好的鉴定区分不同品种,还能通过相似度指数进行聚类分析,探究品种间的亲缘关系。石榴的总蛋白与盐溶蛋白电泳分析结果基本一致,大青皮与谢花甜,软籽石榴与冰糖籽亲缘关系较近;其水溶蛋白聚类分析中,5个品种间无明显分组聚合现象。[结论]该研究结果表明PAGE技术能较好的揭示品种间的遗传变异,可用于分析石榴种质的遗传多样性和亲缘关系,其结果为石榴种质资源的保存和良种培育提供了科学依据。 相似文献