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基于结核菌素与CFP10/ESAT6的牛IFN-γ检测法在牛结核病诊断中的比较研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究通过比较三种刺激物(牛结核菌素、禽结核菌素和牛型结核菌特异性抗原CFP10/ESAT6对结核菌素皮内变态反应阳性牛的IFN-γ刺激反应,探讨IFN-γ检测法在我国牛结核病诊断中的应用前景。无菌采集22头结核菌素皮内变态反应阳性牛的血液.肝素抗凝。每1mL全血与1mL RPMI1640完全培养基混合均匀,并加入0.1mL(20μg)PHA(阳性对照孔)、0.1mL(20μg PHA)CFP10/ESAT6融合蛋白、0.1mL(2000U)&结核菌素(PPD/B)、0.1mL(2500u)禽结核菌素(PPD/A)或等量PBS(无刺激阴性对照),37℃培养过夜。次日用夹心ELISA法检测各刺激组0.1mL培养上清的IFN-γ,以OD630表示IFN-γ浓度。结果,特异性抗原CFP10/ESAT6刺激组与牛结核菌素(PPD/B)刺激组的IFN-γ反应具有良好的相关性.相关系数为0.84。但CFP10/ESAT6刺激组IFN-γ浓度与牛和禽PPD的比较反应(以两刺激组IFN-γ浓度差值表示)间无相关性,相关系数为-0.11。分析禽PPD组的IFN-γ反应,发现实验牛中有少数牛对禽PPD有反应。以OD630=0.17为阳性反应切割值,牛PPD检出阳性牛21头,CFP10/ESAT6检出20头,牛和禽PPD比较反应(以OD值差值表示)检出14头,禽PPD阳性反应3头。扣除禽PPD阳性反应牛后,牛和禽PPD比较反应与牛PPD刺激组的相关系数增至0.54。结果表明,牛PPD的IFN-γ释放反应检测灵敏度最高。当出现牛型结核菌与环境分枝杆菌混合感染时.应用牛和禽PPD比较反应检测牛结核的准确度低,混合感染牛被误判为结核阴性牛。而基于CFP10/ESAT6的IFN-γ释放反应不受环境分枝杆菌的影响,检测具有良好的特异性与敏感性。 相似文献
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气相色谱-质谱法测定猪尿中地西泮 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了猪尿中地西泮的气相色谱-质谱(GC/MS)检测方法。样品经C18固相萃取柱净化后进行气相色谱-质谱测定。结果表明,方法定量限为0.5μg/L,线性范围为10~500μg/L。在三个添加浓度2、4、6μg/L水平上,地西泮的平均回收率为70%~120%,批内相对标准偏差〈20%、批间相对标准偏差〈12%。 相似文献
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用高效液相色谱法测定饲料级L-赖氨酸盐酸盐含量。VenusilABS—C18柱(250mm×4.6mm,5μm),以水(pH=1.5±0.2)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为195nm,柱温为30±2℃。在该色谱条件下,L-赖氨酸盐酸盐在0.205~0.821mg/mL浓度范围内呈良好线性关系(r=0.99997),样品加标平均回收率为99.0%,相对标准偏差(RSD)为0.9%(n=9)。该法操作简便易行,系统适用性良好,适用于饲料级L-赖氨酸盐酸盐含量测定。 相似文献
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建立了QuEChERS样品前处理一高效液相色谱法测定鸡、猪组织中那西肽残留量的方法。动物组织样品中残留的那西肽用乙腈提取,经C18和无水硫酸镁分散固相萃取净化,旋转蒸干复溶后,用高效液相色谱一荧光检测器测定。方法在0.01~2.0μg/mL的线性范围内,线性相关系数r。为0.9998;检测限和定量限分别为5μg/kg和10μg/kg。在10~100μg/kg添加浓度范围内,猪、鸡肌肉和肝脏等动物组织中那西肽平均回收率为73.8%~93.0%,批内相对标准偏差(RSD)在1.3%~11.1%之间.批间相对标准偏差(RSD)在2.9%~10.9%之间。该方法条件易于控制,结果准确,重现性好,适用于动物组织中那西肽残留量的测定。 相似文献
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鸡蛋中四环素类药物残留量测定的高效液相色谱法研究 总被引:1,自引:1,他引:0
建立了鸡蛋中土霉素、四环素、金霉素、多西环素残留量测定的高效液相色谱法。样品经弱酸性缓冲液提取后,HLB固相萃取柱净化后,反相液相色谱分离测定,本方法的检出限为10μg/kg,定量限为50μg/kg。四种四环素类药物在50~1000ng/mL范围内呈线性相关。在100~400ng/g添加浓度范围内,平均回收率为60%~110%,批内变异系数在3.2%~13.7%之间(n=5),批间变异系数在0.9%-5.3%之间(n=4)。结果表明,该法简单、灵敏、特异性强,适用于鸡蛋中土霉素、四环素、金霉素、多西环素残留量的测定。 相似文献
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采用试管二倍稀释法,测定了9种抗菌药物对禽多杀性巴氏杆菌的体外抗菌活性(MIC和MBC)。结果表明氨苄西林、阿莫西林和诺氟沙星对禽多杀性巴氏杆菌的MIC均为0.125μg/mL,诺氟沙星MBC为0.5μg/mL,氨苄西林和阿莫西林的MBC都为1.0μg/mL。氟苯尼考、替米考星和卡那霉素对禽多杀性巴氏杆菌的MIC分别为:0.5、2和2μg/mL。 相似文献