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相似文献
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1.
用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析柱纯化中国大陆株日本血吸虫成虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)。把纯化的GST结合福氏性剂免疫了二批达BALB/c小鼠,获得了29.58~32.71%的减虫率和52.94~68.13%的粪便减卵率。ELISA试验表明免疫小鼠产生了体液免疫应答,免疫印迹试验(WesternBlotting)显示日本血吸虫水溶性成虫抗原和GST抗原的26、28kD蛋白被免疫小鼠血清所识别。  相似文献   

2.
将体外重组的日本血吸虫中国大陆株28ku谷胱甘肽-S-转移酶与免疫,刺激复合物(ISCOM)结合制备了rSj28GST-ISCOM。用含85μg rSj28 GST的rSj28GST-ISCOM及100μg rSj28GST分别免疫BALB/c小白鼠,用常规ELISA检测体液免疫水平,以日本血吸虫大陆株尾蚴攻击后的减虫率表示免疫保护力。  相似文献   

3.
应用日本血吸虫两种抗原疫苗免疫水牛的减虫率、肝组织虫卵的减少率和攻击前及解剖前的平均增重分别为:日本血吸虫冻融苗(F/T苗)组为64.8% 、81.8% 和28.5kg、55.3kg;日本血吸虫提纯抗原苗天然谷胱甘肽S-转移酶(nGST 苗)组为33.19% 、79.7% 和37.8kg、63.7kg  相似文献   

4.
把编码中国大陆株日本血吸虫23kD抗原大亲水区多肽的DNA片段亚克隆到pGEX载体上进行表达,并用重组抗原和载体pGEX表达蛋白分别免疫了二批BALB/c小鼠,结果与未免疫小鼠和载体pGEX表达蛋白免疫小鼠相比,重组抗原免疫小鼠分别获得了57.80% ̄70.30%和52.63% ̄62.96%的减虫率,证明重组的日本血吸虫23kD抗原大亲水区多肽可诱导宿主抗血吸虫攻击感染的部分保护力。  相似文献   

5.
口服抗原疫苗预防小鼠日本血吸虫病的初步试验   总被引:4,自引:0,他引:4  
为了观察口服可溶性血吸虫成虫抗原疫苗预防小鼠日本血吸虫病的效果,本试验应用生物可降解的天然高分子材料──壳聚糖作为载体[1,2],运用单凝聚法[4]制成粒径500~1500μm的可溶性血吸虫成虫抗原微囊,胃饲ICR小鼠,经3次免疫后人工感染日本血吸虫,4周后剖杀小鼠。结果,试验组获得43.23%(P<0.05)减虫率和41.18%(P>0.05)减雌率。血吸虫抗原微囊体外释放试验表明,在0.01MolpH7.2PBS中微囊4h后即开始释放抗原,至第7天时抗原释放结束,累积释放抗原95.87%。  相似文献   

6.
IgM单抗体内,外杀伤日本血吸虫的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
本文报道应用急性感染日本血吸虫的Ba1b/c小鼠脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了一株具有抗血吸虫攻击感染保护作用的IgM单抗ssj14。在被动免疫转移试验中,这株单抗在小鼠体内提供了27.69%~68.5%的减虫率。体外ADCC试验显示该单抗参与了巨噬细胞和嗜酸性粒细胞介导的杀伤血吸虫童虫的作用,免疫化学特性测定表明该单抗同时对血吸虫尾蚴、成虫和虫卵三期虫体抗原起反应,靶抗原的分子量为290KD,分别位于血吸虫童虫和成虫的表膜及虫卵的卵壳。靶抗原表位的化学性质为多糖类,它同时被辐照致弱尾蚴免疫的大鼠血清、血吸虫慢性感染人血清和小鼠血清所识别。本文结果表明,IgM抗体和多糖类抗原在血吸虫病免疫保护作用中发挥了重要的作用。  相似文献   

7.
五种旋毛虫抗原对猪的免疫保护作用研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
本实验研究了旋毛虫肌幼虫可溶性粗抗原、排泄分泌抗原(ES)、表面抗原(SA)及成虫ES、SA5种抗原对猪的免疫保护作用。结果5种抗原对猪均具有一定程度的免疫原性,可诱导猪体产生对攻击感染的抵抗力(减虫率),其中肌幼虫粗抗原为55.20%;肌幼虫ES为42.56%,肌幼虫SA为72.21%;成虫ES为32.92%;成虫SA为42.17%。免疫5种抗原后用肌幼虫“B”抗原、新生幼虫可溶性抗原及成虫可溶性抗原进行ELISA检测,均可测出血清抗体应答反应,其中以相应抗原测出的抗体应答较强烈。免疫5种抗原后猪外周血液中B淋巴细胞减少,Th及Ts增加,Th/Ts比值降低,呈暂时的细胞免疫抑制现象。  相似文献   

8.
用几种电泳方法分析牦牛肝片吸虫不同部位抗原   总被引:1,自引:0,他引:1  
乔代蓉  赵坚 《四川草原》1997,(2):48-51,64
应用SDS-PAGE、等电聚焦电泳(IEF)及双向电泳三种电泳方法分析牦牛肝片吸虫成虫四种抗原(头抗原-HA、体抗原-BA、体表抗原SA、分泌排泄抗原-ES)。SDS-PAGE结果表明,BA、HA、SA分子量在12~100kD之间,ES在12.3~26kD之间,蛋白质染色BA、HA、SA、ES分别显示25、24、18、9条带;IEF分析肝片吸虫分别得34、33、28、22条带,主要由酸性蛋白质组成,主要谱带在pI4.20~6.55内;双向电泳分析BA、ES多肽斑点为69、30个  相似文献   

9.
重组菌株BL21(DE3)(pXETSLT1)经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PAGE和ELISA检测,结果表明重组菌株可以高效表达大肠杆菌肠毒素ST1-LTB 融合蛋白,该融合蛋白占菌体总蛋白的33.21% ,而且已失去天然ST1肠毒素生物毒性。用从IPTG 诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原免疫小鼠,结果免疫小鼠至少能抵抗1.5MLD 的大肠杆菌强毒株C83902(K88ac,ST+ ,LT+ )的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后,采集的血清能够中和天然ST1肠毒素的毒性。这表明构建的工程菌株BL21(DE3)(pXETSLT1)可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株  相似文献   

10.
1994 ̄1995年1997年应用日本血吸虫3类候选疫苗分别免疫绵羊,各组的减虫率、粪便虫卵减少率和组织(肝、大肠、小肠)的虫卵减少率分别是:虫体副肌球蛋白组17.4% ̄55.3%,14.6% ̄68.1%和48.9% ̄76.7%;重组副肌球蛋白组41.4% ̄44.2%,15.9% ̄25.1%和41.1% ̄48.0%;Sj26谷胱甘肽S转移酶(GST)组53.4% ̄62.1%,11.0% ̄38.6%  相似文献   

11.
葡萄球菌A蛋白(SPA)和链球菌G蛋白(SPG)的IgG结合区编码基因合后,克隆到肠杆表达载体PGEX,SPA/SPG融合蛋白(SPAG)得到高效表达。可溶性SPAG-GST产物可被谷胱甘肽亲和柱一次性纯化。用琼扩和ELISA试验测定了表达产物与不同种属动物血清反应的性能。SPAG-GST与所有SPA、SPG各自反应的动物IgG结合,对小鼠IgG的反应优于SPA或SPG。在所测试的23种动物血清中  相似文献   

12.
通过提取猪、犬旋毛虫成虫抗原,制备成虫油佐剂免疫原,在小鼠体内进行同源特异性免疫试验和交叉免疫试验。试验得到猪旋毛虫成虫抗原同源免疫减虫率为55.80%,其对犬旋毛虫的交叉免疫减虫率是35.11%;犬旋毛虫成虫抗原同源免疫的减虫率为39.00%,其对猪旋毛虫的交叉免疫减虫率是24.96%。试验结果揭示,猪、犬旋毛虫成虫具有一定的免疫原性,其交叉免疫减虫率低于同源特异性免疫。猪旋毛虫成虫抗原对犬旋毛虫的交叉免疫与犬旋毛虫自身的同源特异性免疫差异不显著。  相似文献   

13.
21日龄平均体重的5.85kg的断奶仔猪32头,按随机区组设计分2组,分别饲喂豆粕(SBM)和膨化全脂大豆(EFS)型日粮。试验结果表明:0~14d间,SBM组平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)分别比EFS组显著提高45.9%和25.8%(P〈0.05);15~28d间,SBM组ADG比EFS组显著提高7.7%(P〈0.05)。全期试验(0~28d)SBM组ADG和ADFI分别比EFS  相似文献   

14.
鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
用纯化的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)CA毒株和B87株混合抗原脾内免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA方法进行筛选,共检出31个原始阳性孔,阳性率为15.4%,选择其中3个孔,分别进行3次克隆,最后获得3株杂交瘤细胞,命名为B28、B34、C28。通过与其它禽源病毒的交叉试验证明,分泌的抗体均具有高度特异性。3株细胞的平均染色体数分别为94、87、89  相似文献   

15.
用亲和层析法提取大片吸虫谷胱甘肽转移酶的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了探明大片吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)的多肽组分和酶活力,以供今后进行GST的免疫原性和各种蠕虫GST的交叉免疫原性的研究,本试验首次用亲和层析法对大片吸虫GST进行提取,用SDS—PAGE分析了大片吸虫GST的多肽组分,用1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)为底物测定了GST酶活力。电泳染色结果表明,大片吸虫GST至少有2条带,其分子量为29.9~24.5KD,其中主带2条,分别为28.3、26.2KD。酶活力测定结果表明,提取的GST可获得10.44μmol/L/min/mg以上的酶比活性。  相似文献   

16.
IL-18增强日本血吸虫DNA疫苗Sj23的免疫保护效果   总被引:3,自引:0,他引:3  
将小鼠IL-18基因和日本血吸虫Sj23膜蛋白基因分别插入pVAX1载体,构建真核表达质粒pVAX/mIL-18和pVAX/Sj23,联合或单独免疫小鼠,以pVAX1空载体作对照,免疫2次,间隔2周,2次免疫后4周攻击日本血吸虫尾蚴.体液和细胞免疫检测结果表明,联合免疫组能诱导小鼠产生较强的抗日本血吸虫成虫可溶性抗原(SWAP)IgG,较高水平的IFN-γ和IL-2.攻虫试验表明,联合免疫小鼠成虫减虫率和肝脏减卵率分别达41.6%和49.4%,明显高于pVAX/Sj23单独免疫组(减虫率和肝脏减卵率分别为26.5%和41.4%).以上试验结果表明,IL-18能明显增强Sj23 DNA疫苗在小鼠体内的免疫应答,并且产生较强的保护作用.  相似文献   

17.
抗大片吸虫(Fg)的28-kDa水解酶单抗的建立及鉴定(摘要)Fagbemi,B.O.用从大片吸虫Fg中提取的部分纯和完全纯的28-kDa水解酶,高免BALB/C小鼠,得到抗Fg的28-kDa水解酶的单抗,我们利用FAST-ELISA试验,免疫斑点试...  相似文献   

18.
用纯化的伊氏锥虫变异表面糖蛋白(VSG)免疫大白鼠制备出抗血清,经饱和硫酸铰盐析,DE-52纤维素离子交换层析和Sepharose4B亲和层析提取VSG特异性多克隆IgG抗体(Abl)。用Abl免疫大白鼠和家兔制备出抗独特型血清。ELISA抑制试验检测结果表明,8份大白鼠抗独特型血清的抑制率高于25%。用正常大白鼠IgG致敏的醛化绵羊红细胞吸收兔抗独特型血清除去异种抗体,采用Abl-Sepharose4B亲和层析,可从每毫升兔抗独特型血清中获得97.4微克抗独特型抗体(Ab2)。经ELISA抑制试验检测表明,提取的兔抗独特型抗体(Ab2)对Abl与VSG的结合反应可产生明显的抑制效应,能识别Abl的抗原结合部位,其配位的空间构型与VSG表位具有相似性。  相似文献   

19.
以提纯鸡IgG做抗原免疫Ball/c小鼠,取鼠细胞在PEG1000作用下与小鼠骨髓细胞(Sp2/oAg14)融合,采用间接免疫荧光(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清抗体,阳性孔经有限稀法进行细胞克隆,共获得了7株分泌抗鸡IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞(2H8、4D8、4D8、1B7、2A7、2B3、1G12、3D12)将这些细胞分别接种间系小鼠制备出腹水抗体,ELISA效价可达10^  相似文献   

20.
用建立的斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)法检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗原,确定兔抗IBV血清工作浓度为1:400,SPA-胶体金探针的工作浓度为1:80,该法对纯化IBV抗原的最低检出量为0.4314ng/点,用Dot-IGSS与斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)同时检测15只人工感染IBV鸡的气管,肺,肾病科,IBV阳性检出率均为100%,对32份疑似IBV感染鸡病料检测,I  相似文献   

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