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采用PCR方法对1株O2/O74混合血清型鸡大肠杆菌检测其iss基因的存在,并与1株O2血清型鸡大肠杆菌相比较.结果表明:鸡E.coli O2/O74混合血清型菌株携带iss基因,但采用目前通用的PCR方法并不能检测出iss基因,必须经套式PCR扩增才能检测出iss基因.O2/O74混合血清型菌株iss基因序列与已知禽大肠杆菌iss基因序列同源性为99.7%;与人源大肠杆菌iss基因进行比对,同源性为90.6%;与λ噬菌体bor 基因序列进行比对,同源性为88%,显示了此基因的保守性. 相似文献
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研究不同动物来源大肠埃希菌iss基因分布及其致病性。分别将分离于发病猪、鸡和犊牛的44株大肠埃希菌计数后腹腔注射小白鼠,观察临床症状,记录发病及死亡情况;采用PCR方法分别扩增不同动物来源的44株大肠埃希菌的iss基因存在情况,同时对部分PCR扩增产物测序并进行同源性分析。感染后小白鼠出现不同程度的临床症状。其中有14株对小白鼠的致病性最强,感染小鼠的死亡率达100%;有25株致病性较弱,死亡率为20%~80%;而另有5株接种感染后小鼠均无死亡;iss基因在致病性大肠埃希菌中的PCR扩增总频率为79.5%;在毒力较强大肠埃希菌中的PCR扩增频率为92.8%;在无致病力(或低毒力)大肠埃希菌中的PCR扩增频率为16.7%;部分基因片段核苷酸序列与参考序列之间同源性在91.6%~99.0%。iss基因致病性强的菌株扩增频率明显高于其他菌株,且不同来源菌株iss基因片段变异程度不大。 相似文献
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《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2015,(4)
通过设计1对fimA全基因通用引物,对已知不同人、动物源的17株大肠埃希菌菌株的Ⅰ型菌毛fimA基因进行PCR扩增、克隆和测序,并与GenBank中9株菌株序列进行同源性比较分析,探讨I型菌毛宿主嗜性。结果表明:17株菌株均能扩增出约549bp的预期大小目的片段。克隆和序列分析显示,26株不同来源的大肠埃希菌fimA基因的核苷酸同源性为88.7%~100%,推导氨基酸同源性为88%~100%,其中出现差异的31个易发生突变的位点多为中性氨基酸,其中10株菌的fimA序列于第26个氨基酸位置连续插入了脯氨酸和苏氨酸,且80%为猪源大肠埃希菌,因此提示I型菌毛在大肠埃希菌的进化过程中可能具备一定的宿主嗜性。 相似文献
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为了摸清鸡源大肠埃希氏菌的菌毛与致病性的关系而进行了本课题的研究。我们从内蒙古自治区7个盟市9个具有代表性的养鸡场死胚和死雏鸡中分离到的203株大肠埃希氏菌中选择了13株有致病性和2株无致病性的菌株进行电子显微镜观察。通过观察发现,我们所分离到的鸡致病性大肠埃希氏菌菌株在适宜的条件下培养均能形成菌毛,而无致病性大肠埃希氏菌未能形成菌毛。 相似文献
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为探讨鱼腥草对雏鸡免疫器官的影响和对雏鸡大肠埃希菌病的防治效果,从雏鸡1日龄开始取鱼腥草煎剂(100 g鱼腥草加水2 500 mL)每日定量(每次每只90 mL,每天3次)混饲,以观察雏鸡摄入鱼腥草煎剂后免疫器官指数、外周血T淋巴细胞数的变化及鱼腥草对雏鸡大肠埃希菌病的临床防治效果。结果显示,7日龄、14日龄试验组雏鸡各免疫器官指数、T淋巴细胞数均高于对照组,差异极显著(P<0.01);大肠埃希菌攻毒5 d后,对照组死亡率为83%,试验组死亡率为47%。试验结果表明,鱼腥草可以促进雏鸡免疫器官的发育和增加外周血T淋巴细胞的数量,并对雏鸡大肠埃希菌病的防治有一定效果。 相似文献
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为了解安徽省合肥地区鸡源致病性大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones,FQs)的耐药性及质粒介导的喹诺酮耐药基因(plasmid-mediated quinolone resistance,PMQR)的流行情况,对从合肥地区多个规模化养鸡场病鸡病料中分离保存的37株疑似大肠埃希菌进行细菌分离培养、生化编码鉴定和致病性测定。利用K-B纸片琼脂扩散法检测鸡源致病性大肠埃希菌对4种FQs的耐药性,设计并合成4对特异性引物通过菌液PCR法对所分离细菌进行PMQR基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA)扩增。结果显示,所检测的37份疑似病料均为致病性大肠埃希菌;37株大肠埃希菌中对FQs呈3耐以上(包括3耐)菌株占67.57%(25/37);37株大肠埃希菌中检测到qnrA基因,检出率为56.77%(21/37),而qnrB、qnrS、qepA基因均未检出。提示合肥地区鸡源致病性大肠埃希菌对FQs耐药性严重,PMQR基因以qnrA基因为主,且qnrA基因的流行与FQs耐药性具有相关性。 相似文献
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禽大肠杆菌O2、O78菌株外膜蛋白A基因扩增及序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
根据Genbank中大肠杆菌K-12外膜蛋白A基因的核苷酸序列设计引物,从禽大肠杆菌O为O2、O78及它们的融合株O2．78(Chl^rNor^r)中分别扩增得到外膜蛋白A基因(ompA),进行序列测定及分析发现3个菌株的ompA均由2276nt组成,核苷酸序列完全相同,只有一个大的开放性阅读框(ORF),长1041bp,编码由346个氨基酸组成的前外膜蛋白A(pro-OmpA),前21个氨基酸残基组成信号肽,成熟的OmpA由325个氨基酸残基组成,相对分子质量为37000．其氨基酸序列也完全相同．从基因水平上证明了禽大肠杆菌O2和O78菌株存在相同的外膜蛋白A抗原。 相似文献
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从25个鸡场疑似卵黄性腹膜炎的病料中分离到了18株大肠杆菌和2株沙门氏菌,经大肠杆菌O血清型鉴定为O_(78)6株,O_(11)、O_4各4株,O_(143)2株,O_(15)、O_2各1株,其中O_(78)、O_(11)、O_4为优势血清型,用优势血清型菌株分别接种改良的血清-葡萄糖-肉汤培养基研制成多价油乳剂灭活苗,在开产前接种鸡群预防产蛋鸡卵黄性腹膜炎,预防效果良好,而采取多价油乳剂灭活苗预防接种配合活菌制剂益生素使用,预防效果更佳。使用优势血清型菌株筛选的敏感药物硫酸丁胺卡那霉素、强力霉素,同时配合清瘟败毒散和V_C对卵黄性腹膜炎鸡群进行治疗,治疗效果良好。 相似文献
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从１１个禽败血症Ｏ＿２和Ｏ＿（７８）大肠杆菌分离株提取的主要外膜蛋白（ＯＭＰ＿ｓ），出现了３个ＯＭＰ型。其中６个Ｏ＿２分离株、５个Ｏ＿（７８）分离株可分别归为２个ＯＭＰ型，但有１个ＯＭＰ型为两者所共有。结果表明，从江苏地区所分离到的禽病原性大肠杆菌具有多样性的ＯＭＰ型，而且这２个血清型菌株中存在着共同的ＯＭＰ型。 相似文献
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JIN Wen-jie ZHENG Zhi-ming ZHANG Yong-zhi QIN Ai-jian SHAO Hong-xia LIU Yue-long WANG Jiao WANG Qian-qian 《中国农业科学(英文版)》2008,7(12)
216 avian pathogenic Escherichia coli (APEC) isolates were obtained from poultry with colibacillosis in different areas of China. Among them, 195 were serotyped as O78, O88, and O93. Thirteen virulence-associated genes, including fimC, iucD, iss, tsh, fyuA, irp2, eaeA, hlyE, colV, papC, stx2f, vat, and astA, were submitted to PCR amplification. The fimC gene was the most prevalent with a detection rate of 93.6%, followed by iucD (70.8%), iss (58.8%), and tsh (51.4%) in APEC isolates. The detection rate of high pathogenicity islands (HPI)-associatedfyuA and irp2 genes were both 44.9%, with no LEE (the locus of enterocyte effacement) island-associated gene eaeA detected. In terms of distribution patterns of the 13 virulence-associated genes, 5 isolates harborbed 10 genes, 19 isolates contained only fimC gene, and only 4 isolates had no virulence-associated gene detected. Different correlations of the virulence-associated genes with O serotypes were also investigated and 50% O78 isolates had a gene distribution patterns of fimC+iucD+irp2+fyuA+iss+colV+tsh+. 相似文献
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鸡大肠杆菌病的病原分离鉴定与药敏试验研究 总被引：16，自引：0，他引：16
从河南7个县市的不同鸡群中采集鸡大肠杆菌病典型病料,经细菌学检验,分离出35株鸡大肠杆菌．动物试验结果表明：全部菌株对动物均具有很强的致病作用,多数菌株可使动物死亡率达100％．O因子血清鉴定发现8个血清型,分别为O78,O54,O119,O26,O14,O9,O8,O5,其中O78型分离率为25／35,占总数的71．4％,主要分布于许昌、项城、荥阳等地,其它血清型各占1株,此外尚有3株暂未定型．药敏试验结果表明,各地分离菌株对14种药物的敏感性不同,但所有菌株对头孢唑啉、阿米卡星、卡那霉素等敏感． 相似文献
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[目的]了解禽致病性大肠杆菌分离株的遗传相关性。[方法]对分离自保定、秦皇岛和北京3个地区规模化养鸡场的病死鸡体内的38株大肠杆菌,采用超声波裂解和N-十二烷基肌胺酸钠进行外膜蛋白(Omp)提取,利用SDS-PAGE进行Omp分型。[结果]38株大肠杆菌共有3个Omp型,其中Omp-1型为O78、O88、O2、O18、O93、O766个血清型分离株所共有,Omp-Ⅱ型多为O76血清型分离株,Omp-Ⅲ型为O93、O78、O88、O2分离株所共有。这表明同一血清型的菌株可能属于完全不同的Omp型,而血清学上毫不相关的分离株之间却可具有相同的Omp型。[结论]该研究证实了同一血清型的分离株之间可发生遗传分化,而不同血清型的分离株之间也可具有不同程度的遗传相关性。 相似文献
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甘肃省兰州市及其近郊６个鸡场时有疑似大肠杆菌病病例发生，Ｌ鸡场的一批雏鸡１月龄时死亡率高达３６％。近年来分离的２７９株肠道杆菌，其中２／３为大肠埃希氏菌。Ｌ鸡场分离的５３株大肠埃希氏菌中，Ｏ＿１型占１５．０９％，Ｏ＿２型占３７．７４％，Ｏ＿（７８）型占２２．６４％；５只雏鸡分离到两种血清型。一些菌株对小鼠和小公鸡有较强的致病力。制备的铝胶灭活苗对控制本病有较好的效果。 相似文献
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从江苏省某水禽场的疑似感染致病性大肠埃希菌的病鸭中分离获得鸭致病性大肠埃希菌野毒株;通过玻板凝集和试管凝集试验确定其血清型,采用PCR进行分群分析和毒力基因检测;扩增φX_(174)噬菌体裂解蛋白E的基因序列,构建温控型表达质粒pBV221–E,并将其电击转化入分离毒株,升温诱导E蛋白表达制备菌蜕;通过测量菌液A600 nm值和在透射电镜下观察细菌形态,评估菌蜕构建效果;用该菌蜕进行灭活处理和无菌检测后,对雏鸭进行免疫,用间接ELISA法检测血清IgG水平。结果表明:该大肠埃希菌的血清型为O24,属于B1群,具有毒力基因fimC、csgA和iroN;获得的鸭致病性大肠埃希菌菌蜕裂解率为99.96%;经透射电镜观察发现,制备获得的菌蜕表面有明显孔道,细胞质从孔道溢出,细胞膜皱缩变形;抗体水平检测结果显示,二免后菌蜕免疫组雏鸭血清IgG水平显著提高。可见,通过将pBV221–E重组质粒转化至鸭致病性大肠埃希菌分离株,调节细菌培养温度诱导E蛋白表达,能制备鸭致病性大肠埃希菌B1群O24型野毒株菌蜕。该菌蜕可诱发机体产生体液免疫。 相似文献