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银鲫卵母细胞体外诱导成熟的初步观察丁军，蒋一ｇｕｉ（中国科学院水生生物研究所，武汉４３００７２）关键词银鲫，卵母细胞，成熟，体外诱导ＴＨＥＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＯＢＳＥＲＶＡＴＩＯＮＯＮＩＮＤＵＣＩＮＧＣＲＵＣＩＡＮＣＡＲＰ，ＣＡＲＡＳＳＩＵＳＡＵＲ... 相似文献
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介绍了以屠宰场废弃的猪卵巢为材料,通过系统技术途径得到猪早期胚胎的基本方法。新鲜的猪卵巢采集后,25～35℃条件下保存,在3h内进行卵泡卵母细胞与卵丘细胞复合体(COCs)采集与分级,对COCs中卵母细胞体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)及其受精卵体外发育(IVD)等关键技术环节进行了系统地探索,重点探讨了不同发育阶段(直径大小)卵泡卵母细胞、不同培养系统与添加成分以及不同培养时间等关键因素对猪卵母细胞IVM的影响,并对其IVF卵裂能力进行了比较与评价。实验结果表明,采用mTCM199作为基础成熟培养系统液,并添加ф5～8mm卵泡液(pFF)和雌二醇(E2),ф2～8mm卵巢卵泡COCs经IVM40h可得到较高的成熟率(66.7%)和IVF卵裂率(29.2%)。本研究初步建立了猪2-4-细胞早期胚胎的体外批量生产技术,可望进一步改进和完善,应用于养猪业科研与生产实践。 相似文献
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本试验探讨了不同基础培养液(mTCM-199、NCSU23)和PMSG、HCG浓度、作用时间对猪卵母细胞体外成熟的影响和乙醇及乙醇与各种化学试剂联合处理对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活、孤雌生殖胚胎发育的影响,最终找到了最佳的猪卵母细胞体外成熟培养体系,并确定了乙醇孤雌激活的最佳浓度、作用时间和与不同化学试剂联合处理的最佳组合。试验结果得出:最佳的猪卵母细胞培养体系为:NCSU23+20IU/mlPMSG+20IU/mLHCG+10%PFF,激素作用时间为45h,成熟率可达到70.3+3.9%;乙醇的最佳激活浓度为8%,激活率为29.6+2.5%;乙醇激活的最佳处理时间为10min,激活率为32.6+4.1%;乙醇与CB+CHX联合处理的激活率最高,激活率为60.8+3.2%,卵裂率、3～4细胞率、8细胞及8细胞以上率分别为45.1+3.0%、28.6+3.7%、8.7+1.2%;乙醇与CB+6-DMAP联合处理的激活率为51.7+1.9%,卵裂率、3￣4细胞率、8细胞及8细胞以上率分别为41.7+3.6%、30.3+4.3%、9.9+1.8%,虽然激活率、卵裂率低于乙醇与CB+CHX处理组,但3￣4细胞率、8细胞及8细胞以上率均高于乙醇与CB+CHX处理组(30.3+4.3%vs28.6+3.7%,9.9+1.8%vs8.7+1.2%)。因此,乙醇激活的最佳方法为:8%乙醇处理10min,CB+6-DMAP处理7h。 相似文献
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实验研究了卵丘细胞与卵母细胞通过间隙连接通道对绵羊卵母细胞核成熟的影响。采用抽吸法从2～6mm的卵巢上收集的卵丘-卵母细胞复合体COCs。将部分COCs脱去全部卵丘细胞,成为机械裸卵(DOs)后,分4种方式培养,即卵丘细胞包裹的卵母细胞(CEOs)的单独培养、DOs与COCs共培养(DOs(COCs))、DOs与卵丘颗粒细胞共培养的(DOs(CCs)),以及DOs单独培养,培养26h,用0.2%地衣红对绵羊卵母细胞进行染色检查。各组卵母细胞到达减数分裂2期的比率分别是79.6%、5.6%、9.9%和46.4%,4组间都有显著差异统计核成熟率(P<0.05)。表明卵丘细胞及间隙连接对卵母细胞减数分裂恢复核成熟有非常重要的作用。 相似文献
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用海星鞘神经提取液和二硫苏糖醇对刺参卵母细胞进行了体外人工促熟研究。结果显示,二硫苏糖醇对刺参卵母细胞具有明显的促熟作用。刺参卵母细胞包被在滤泡中发育,卵母细胞通过动物极的卵突起连接到单层细胞构成滤泡膜上,充分发育的卵母细胞处于生发泡期,染色质凝集在核仁周围,处于生发泡期的卵母细胞在海水中不会自发成熟。用二硫苏糖醇处理充分发育的卵母细胞20min,卵母细胞的生发泡开始移动,并锚定在卵母细胞的动物极,继而出现生发泡破裂。此后,减数分裂重新启动,第一、二极体分别排出。但海星鞘神经提取液对刺参卵母细胞没有促熟作用。实验表明,二硫苏糖醇浓度在10-5～10-1mol/L范围内,均可促使刺参卵母细胞发生生发泡破裂,10-2mol/L时诱导卵母细胞成熟率可达90%以上。 相似文献
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探讨鱼类性腺成熟过程以及影响性腺成熟过程的主要因素，这对生产有很大意义。鱼类性腺的成熟程度取决于生殖细胞的发育程度，而生殖细胞的生长发育主要分三期，即卵原细胞的增殖期、卵母细胞的生长期和成熟期。从人工繁殖的角度看，最有实际意义的是生长期及成熟期。 相似文献
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硬骨鱼类卵母细胞最后成熟的调控ＴＨＥＲＥＧＵＬＡＴＩＯＮＯＦＦＩＮＡＬＯＯＣＹＴＥＭＡＴＵＲＡＴＩＯＮＩＮＯＳＴＥＩＣＨＴＨＹＥＳ汪小东林浩然（中山大学生命科学学院,广州５１０２７５）ＷＡＮＧＸｉａｏＤｏｎｇ,ＬＩＮＨａｏＲａｎ（ＳｃｈｏｌｏｆＬ... 相似文献
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本通过多年来的实验经验，对常规石蜡切片中常遇到的技术障碍问题进行了深一步的探讨，总结出了十分有效的方法，从而对鲟鱼成熟卵子的组织结构进行了形态结构的观察，利用此方法的同时减少了试剂的致毒和环境污染为组织学的研究提供了科学的实验手段。 相似文献
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人工诱导青虾成熟和产卵 总被引：12，自引：0，他引：12
本文研究了青虾催产的方法。采用注射孕酮;切除眼柄和激光照射复跟等技术,人工诱导青虾成熟和产卵,效果明显。并且孵化出的幼体与自然成熟的卵孵化出的幼体在生长上没有显著差异。 相似文献
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鲟鱼类增殖研究的现状及展望 总被引：1，自引：0，他引：1
<正> 鲟鱼类为冷水性鱼类,仅见于北半球,目前已发现的鲟科鱼类共25种,白鲟科2种。由于鲟鱼大部分为洄游性,个体大,性腺成熟周期长,其数量容易受到人类活动(如过度捕捞和在江河上修建水坝等)的影响。为了保护和增殖这些种类和数量都很少的鱼类,国内外都致力于进行鲟鱼类自然繁殖保护和人工增殖的研究。现将鲟鱼的主要产地苏联、北美和我国的研究情况简介如下。 相似文献
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为进一步提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)人工育苗技术的水平,对半滑舌鳎新型膜孕激素受体(mPR-like,mPRL)基因的表达特征和作用机制进行了研究.应用实时定量PCR方法分析mPRL mRNA在卵子形成过程中的时序表达,发现半滑舌鳎mPRL mRNA相对表达量的最高值出现在性成熟阶段卵巢的Ⅴ时相卵母细胞.原位杂交分析mPRL mRNA在繁殖相关组织的细胞学定位,发现mPRL mRNA分布在半滑舌鳎性成熟阶段卵巢的卵母细胞膜上;在脑的神经元和垂体内分散的细胞中,mPRL mRNA阳性信号较强.制备半滑舌鳎mPRL的多克隆抗体,采用Westem blotting方法检测半滑舌鳎mPRL蛋白在不同组织的表达特征,发现mPRL蛋白的表达量在卵巢、脑、垂体中相对较高,在肝脏、头肾、肾脏中表达量相对较少.免疫组化结果显示,半滑舌鳎mPRL蛋白在卵巢、脑和垂体的细胞学定位与mPRL mRNA定位一致.应用实时定量PCR和Westem blotting方法检测促性腺激素调控下半滑舌鳎不同时相卵母细胞mPRL基因mRNA和蛋白的表达变化,结果显示,促性腺激素对半滑舌鳎卵母细胞中mPRL基因mRNA和蛋白表达都有一定的上调作用,特别是对Ⅴ时相卵母细胞中mPRL mRNA和蛋白的表达量提升明显;发现表达量与促性腺激素调控作用具有剂量依存关系.半滑舌鳎mPRL在繁殖相关组织的表达特征表明其通过脑-垂体-卵巢轴参与繁殖调控,同时也揭示了mPRL介导卵母细胞成熟机制. 相似文献
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厦门杏林湾普通鲻鱼性腺组织学研究 总被引：5，自引：0，他引：5
本文报道了对厦门郊区封闭的海湾杏林湾普通鲻鱼性腺的组织学观察结果。观察结果表明，普通鲻鱼成熟系数变化周期和性腺发育情况相一致，首次成熟年龄为3岁，成熟时间在11、12月。杏林湾普通鲻鱼生长发育与美国的相似，而比地中海、黑海的同种鱼要快。普通鲻鱼大生长期卵母细胞吸收过程分三个阶段，从11月下旬开始，延续到翌年1-2月结束。大生长期的卵母细胞吸收过程主要依靠滤泡上皮细胞活性提高，产生分泌物质促进透明层、胶质层和卵母细胞内含物的分解，滤泡上皮细胞还直接吞噬卵黄颗粒。 相似文献
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波尔山羊卵巢卵母细胞的体外培养与体外受精 总被引：6，自引：0，他引：6
以10只不孕不育波尔母山羊群为试验动物穴供体雪,采用超数排卵、活体采卵、卵母细胞体外成熟培养以及体外受精等技术方法,探讨有繁殖障碍波尔山羊群体繁育正常后代的有效技术途径。在该实验中试验动物中7只经超数排卵处理后诱导发情,利用特制的采卵装置成功地进行了6只供体的活体采卵熏从10个卵巢上成功地采集到30枚形态学正常的卵母细胞。经体外成熟培养后24枚成熟卵母细胞进行了体外受精处理,获得16枚正常受精卵,移植到4只同期发情的当地山羊受体输卵管内,经3个月妊娠检验判定,其中两只受体受孕。该研究为解决不孕不育波尔山羊群繁殖后代的难题探索出一条新途径。 相似文献