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六十二株水貂源大肠杆菌分离株耐药表型与耐药基因及克隆菌群分析 总被引：2，自引：2，他引：0
为了调查诸城地区某水貂养殖场粪便源大肠杆菌的表观及其分子特征,采集某个水貂养殖场的水貂粪便进行大肠杆菌分离鉴定,对分离鉴定的大肠杆菌进行血清型鉴定和对14种常见抗菌药物的耐药表型鉴定;使用PCR检测耐药基因以及Ⅰ整合子基因盒的携带情况,利用多位点序列分型（MLST）来分析菌株的克隆关系并构建系统发育树来分析相同克隆群菌株的遗传相似性。结果显示,自82份水貂粪便样品分离到62株大肠杆菌,分离率75.61%;大肠杆菌分离株对AMP和TET的耐药率超过90%,多重耐药菌株（MDR）占比为85.48%。PCR检测到5类耐药基因的存在,qnrS检出率最高,为61.29%（38/62）;aaC2、aaC4、sul1和aac（6'）-Ib-cr耐药基因与菌株产生相应的耐药抗性存在一致性（P<0.01）。分离菌株中Ⅰ类整合子可变区域的优势结构为dfrA27-aadA2-qnrA。鉴定出致病性血清型的存在,且对应菌株都具有多重耐药性,优势血清型为O104：H4。分离株中存在33个STs,ST46为优势STs（16.13%）,具有3个主要克隆群,依次为CC10、CC46和CC176;与致病性相关菌株的STs和人源大肠杆菌具有共同的遗传背景。本研究表明,养殖场的水貂受到致病性和多重耐药性大肠杆菌的污染,相同克隆群菌株的耐药基因分布具有多态性,表观特征差异明显。 相似文献
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为了解四川省规模化肉牛养殖场致犊牛腹泻大肠杆菌的血清型和耐药性,试验采集四川省部分规模化肉牛养殖场腹泻犊牛的肛拭子、粪便等样品151份,采取细菌分离与鉴定,生化试验,PCR鉴定、测序与同源性分析,致病性试验等方法分离致病性大肠杆菌,并采用凝集试验和药敏纸片法分别检测致病性大肠杆菌的血清型和耐药性。结果表明:共分离到72株大肠杆菌,其中50株为致病性大肠杆菌,属于10个血清型,以O_(101)、O_(36)、O_(126)、O_(26) 4种血清型为流行的优势血清型。分离的50株致病性大肠杆菌对头孢克肟、头孢曲松、头孢他啶等的耐药率为14.0%～28.0%,对林可霉素、环丙沙星、丁胺卡那霉素等的耐药率为30.0%～64.0%,对强力霉素、磺胺间甲氧嘧啶、多黏菌素等的耐药率为72.0%～96.0%。说明致犊牛腹泻大肠杆菌流行的血清型复杂,耐药现象严重,且呈现多重耐药现象。 相似文献
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【目的】了解河北地区动物源大肠杆菌分离菌株的耐药情况和各耐药菌株之间的亲缘关系,为有效防控大肠杆菌耐药性的产生提供科学依据。【方法】从河北省某养殖场采集健康动物的粪便样本297份(鸡源48份、猪源249份),通过细菌分离纯化和PCR扩增对分离菌株进行鉴定,采用药敏试验确定分离菌株的耐药表型,并对其进行耐药基因检测、血清型鉴定、系统发育群分析、质粒复制子分型和基因分型鉴定。【结果】分离菌株在麦康凯培养基上呈粉红色圆形菌落,经16S rDNA测序分析鉴定出129株大肠杆菌,其中92株大肠杆菌呈现多重耐药现象,主要以3～4耐为主,耐药基因以floR、tetA、qnrS和strB的检出率最高;多重耐药大肠杆菌以O132为优势血清型,系统进化群主要分布在A和B1群,主要流行质粒为IncFIB和IncN;经MLST分型获得27个ST型,主要为ST93型,其中12株序列型为未知型。【结论】河北地区健康动物肠道内大肠杆菌多重耐药现象较为严重,其血清型众多,分子特征呈现多样性,仍需加强对动物源大肠杆菌耐药性和分子特征的监测。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2015,(17)
为了了解山东、河北和河南等省部分地区养殖场鸡源致病性大肠杆菌的血清型及耐药性,试验采用细菌分离和生化鉴定方法对鸡大肠杆菌进行分离和鉴定,通过动物试验确定分离大肠杆菌的致病性,应用血清学方法和药敏试验对致病性大肠杆菌的血清型及耐药性进行研究。结果表明:分离鉴定的119株大肠杆菌中致病性菌株有110株,其中92株致病性菌株能够定型,分别属于15个血清型,有5株出现交叉凝集,O14、O35、O1、O2、O78、O88为优势血清型;分离鉴定的致病性大肠杆菌对环丙沙星、头孢噻肟、头孢哌酮等最敏感,对林可霉素、头孢克肟、卡那霉素、庆大霉素、红霉素的耐药率达60%以上。说明分离的致病性大肠杆菌血清型存在复杂性,对大部分临床常用药物产生了不同程度的耐药。 相似文献
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为了分析白城地区致羔羊腹泻大肠杆菌流行的血清型与耐药性,从采集的腹泻羔羊粪便样品127份中分离鉴定得到了56株为致病性大肠杆菌。采用玻板凝集法和K-B药敏纸片法分别检测56株致病性大肠杆菌分离株的血清型分布和耐药性情况。结果显示,56株致病性大肠杆菌分离株属于9个血清型,致病性大肠杆菌分离株以O119、O101、O24为流行的优势血清型;56株致病性大肠杆菌分离株且呈现多重耐药性,对头孢克肟、头孢曲松两种药物的耐药率最低,在12.4%~28.6%之间;对阿米卡星、新霉素、多西环素等7种药物的耐药率在50.0%~78.6%之间;对大观霉素、环丙沙星、氧氟沙星等5种药物的耐药率在82.1%~96.4%之间。 相似文献
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为了解泉州地区猪源致病性大肠杆菌流行血清型分布及耐药性,无菌采集的患病仔猪肝脏、肛拭子和粪便等病料组织样品87份,通过细菌的分离鉴定得到了42株大肠杆菌,其中,30株为致病性大肠杆菌。利用玻板凝集法和K-B药敏纸片法分别检测30株猪源致病性大肠杆菌分离株的血清型和耐药性。结果显示,30株猪源致病性大肠杆菌分离株属于9个血清型中,定型的猪源致病性大肠杆菌分离株27株,定型率为90%(27/30),2株未鉴定出来,占分离菌菌株的64.3%(27/42),以O147和O141为该地区流行的优势血清型;30株猪源致病性大肠杆菌分离株对新霉素、环丙沙星、恩诺沙星等5种药物的耐药率在80.0%~100%之间,对克林霉素、多西环素、丁胺卡娜霉素等5种药物的耐药率在60.0%~73.3%之间;对其他的药物耐药率在33.3%~53.3%之间,且呈现多重耐药性。本研究为该地区的猪源致病性大肠杆菌病的防治提供了重要的参考价值。 相似文献
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《中国兽医学报》2019,(8):1484-1489
为研究撒坝猪大肠杆菌强毒力岛(HPI)的致病性,对撒坝猪致病性大肠杆菌进行了分离和血清型鉴定,获取优势血清型,采用PCR检测HPI,进行同源性比较,并通过耐药性试验和致病性试验对分离菌株与HPI的相关性进行分析。结果显示:分离得到101株大肠杆菌,确定血清型84株,其中O_3、O_4、O_(24)为优势血清型;HPI阳性率为88.64%,与GenBank登录的参考序列同源性比较大于99.3%;氨基糖苷类药物耐药性试验结果显示分离菌株普遍耐药,而HPI阳性株耐药性强,并检出含aac(3)-Ⅱa基因12株,含有aac(6′)-Ⅰb基因21株;致病性试验表明含irp2的菌株致病性强,而具有fyuA-irp2基因簇的菌株致病性更强。结果表明:HPI对大肠杆菌的毒力有增强作用。 相似文献
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为了分析邵阳地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型与耐药性,采用细菌分离鉴定的方法对38家宠物医院中无菌采集的87份腹泻宠物犬肛拭子及粪便样品进行大肠杆菌分离鉴定,采用人工感染动物试验、玻板凝集试验和K-B药敏纸片法分别检测分离菌株的致病性、血清型及耐药性。结果显示:分离得到了49株大肠杆菌,其中34株为致病性;34株致病性大肠杆菌分离株属于9种血清型,以O_2、O_9、O_(13)和O_(20)为主要的优势血清型;34株致病性大肠杆菌分离株对阿莫西林、氨苄西林、美罗培南等4种药物耐药率在82.4%～94.1%之间,对丁胺卡那、头孢他啶、恩诺沙星等6种药物的耐药率在41.2%～79.4%之间,对头孢曲松、头孢噻肟耐药率在14.7%～23.5%之间。研究结果为该地区宠物犬大肠杆菌病防治提供参考。 相似文献
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对2018—2020年采集的南涧县不同养殖场中患腹泻病仔猪肛拭子、粪便、肝脏等共243份病料进行大肠杆菌分离鉴定,采用人工感染小白鼠试验、玻板凝集试验、结晶紫微孔板法和K-B药敏纸片法,对分离的致泻性大肠杆菌的致病性、血清型、生物被膜形成能力及耐药性进行检测。结果显示,从243份仔猪腹泻病料组织中分离得到了113株大肠杆菌,其中有87株为致病性大肠杆菌,87株致病性大肠杆菌属于14种不同的血清型,以038 (17.2%)、0101 (18.4%)和0142 (14.9%)为主要流行优势血清型,强形成被膜能力菌株有24株(27.6%)、中形成被膜能力菌株有34株(39.1%)、弱形成被膜能力菌株有17株(19.5%)、不形成被膜菌株有12株(13.8%)。分离的87株致病性大肠杆菌对阿莫西林、氨苄西林、链霉素等10种药物的耐药率较高,耐药率在49.4%以上,对其他药物的耐药率在9.2%～26.4%之间。 相似文献
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本研究旨在明确江苏及周边地区鸭禽致病性大肠杆菌（avian pathogenic Escherichia coli,APEC）的血清型、毒力基因分布和耐药性之间的相关性,以期为APEC的防控提供依据。从江苏省及周边养鸭场分离了191株APEC,并对其中21株（每个养殖场选取1株）的O抗原血清型、毒力基因分布和耐药性进行检测。对21株APEC的血清型检测结果表明,O65血清型12株,占全部菌株的57.14%,O5、O28、O42、O87、O93、O138、O147血清型均为1株,其他血清型2株;毒力基因检测结果表明,5个毒力基因有较高的分布率,其中fimA基因的阳性率为100%,ECs3737、ECs3703、tsh和irp2基因的阳性率分别为90.5%、85.7%、57.1%和42.9%,含有5个毒力基因的菌株共有6株（28.57%）;药敏试验结果表明,21株APEC均存在多重耐药性,100%的分离菌株对恩诺沙星、强力霉素、万古霉素和红霉素耐药,85.71%的分离株对10种以上抗生素耐药,14.29%的菌株对21种药物都耐药;对血清型、毒力基因分布和耐药性之间的关系分析表明,含有4种以上毒力基因的菌株有13株,其中9株是O65血清型。在13株含有4种以上毒力基因的菌株中,耐15种药物以上的有9株（69.23%）,耐20种以上药物的有3株（23.08%）,表明含有4种以上毒力基因的菌株多重耐药现象严重。研究表明,江苏及周边地区鸭源大肠杆菌血清型复杂,携带多种毒力基因,耐药性严重。 相似文献
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《中国预防兽医学报》2020,(6)
为分析河北地区水貂源大肠杆菌的致病性与耐药性,本研究对河北地区送检病死水貂采集组织样品,经分离鉴定、生化鉴定和16S rDNA基因序列分析,共分离得到24株水貂大肠杆菌。对分离菌株进行致病性试验、药敏试验、毒力基因和耐药基因检测。结果显示,24株大肠杆菌感染小鼠后小鼠死亡率为20%～100%;24株分离菌中有22株检测到毒力基因,fimC毒力基因检出率最高,为70.83%(17/24);分离的24株株大肠杆菌耐药性较强,对替米考星、土霉素、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、复方新诺明耐药的菌株占80%以上,对头孢曲松最敏感,敏感菌株占66.67%(16/24),且分离菌均具有多重耐药性,耐5种以上药物的菌株占比高达100%;24株大肠杆菌均检测到耐药基因,耐药基因检出率为4.17%～79.17%,其中氨基糖苷类耐药基因addA1(79.17%)、喹诺酮类耐药基因gyrA(75%)、gyrB(70.83%)检出率较高,β-内酰胺类耐药基因ctx-M(20.83%)和SHV(4.17%)检出率较低;未检测到tetA、tetC、sul1、mefA耐药基因。上述结果表明,分离菌对小鼠均具有一定的致病力,且毒力基因检出数越多的菌株对小鼠的致病力越强;β-内酰胺类、氨基糖苷类和喹诺酮类的耐药基因与耐药表型基本相符,分离菌的其余耐药基因与耐药表型不符,提示分离的大肠杆菌可能存在其他耐药机制。本研究为河北地区水貂大肠杆菌病的防治提供参考依据,为大肠杆菌的致病机制和耐药机制的研究奠定基础。 相似文献
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2017年1月,新疆博乐某牛场犊牛群出现腹泻疫情,本试验旨在调查病因并制定相应的防控措施。采集6头腹泻犊牛的肛拭子和新鲜粪便样本,先用Speed V-Diar4TM试纸进行轮状病毒、冠状病毒、隐孢子虫和大肠杆菌F5(K99)的检测,再对样本进行病原菌的分离鉴定和分子分群,最后对分离菌进行致病力及耐药性的检测。结果显示,所有粪便样本的试纸检测结果均为阴性,从6份样品中共得到6株大肠杆菌和1株爱德华氏菌,分子分群PCR检测结果显示6株大肠杆菌中A群占83.3%(5/6),F群占16.7%(1/6)。半数致死量结果显示,只有1株大肠杆菌(菌株XJ-B1)具有致病性,可致小白鼠腹泻和死亡。药敏试验结果显示,7株分离菌对这18种抗生素产生不同程度的耐药性,其中致病性大肠杆菌XJ-B1耐药程度最严重,对β-内酰胺类、磺胺类和多肽类抗生素耐药,为多重耐药菌。由此可见,这株致病性大肠杆菌可能是引起本次犊牛腹泻的病因之一,也是本试验首次分离到牛源的F群大肠杆菌,该菌的多重耐药性增加了临床治疗的难度,而本试验结果为该牛场治疗此次犊牛腹泻提供了依据。 相似文献
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2017年1月,新疆博乐某牛场犊牛群出现腹泻疫情,本试验旨在调查病因并制定相应的防控措施。采集6头腹泻犊牛的肛拭子和新鲜粪便样本,先用Speed V-Diar4~(TM)试纸进行轮状病毒、冠状病毒、隐孢子虫和大肠杆菌F5(K99)的检测,再对样本进行病原菌的分离鉴定和分子分群,最后对分离菌进行致病力及耐药性的检测。结果显示,所有粪便样本的试纸检测结果均为阴性,从6份样品中共得到6株大肠杆菌和1株爱德华氏菌,分子分群PCR检测结果显示6株大肠杆菌中A群占83.3%(5/6),F群占16.7%(1/6)。半数致死量结果显示,只有1株大肠杆菌(菌株XJ-B1)具有致病性,可致小白鼠腹泻和死亡。药敏试验结果显示,7株分离菌对这18种抗生素产生不同程度的耐药性,其中致病性大肠杆菌XJ-B1耐药程度最严重,对β-内酰胺类、磺胺类和多肽类抗生素耐药,为多重耐药菌。由此可见,这株致病性大肠杆菌可能是引起本次犊牛腹泻的病因之一,也是本试验首次分离到牛源的F群大肠杆菌,该菌的多重耐药性增加了临床治疗的难度,而本试验结果为该牛场治疗此次犊牛腹泻提供了依据。 相似文献
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《畜牧与兽医》2020,(8)
旨在研究徐州地区猪源大肠杆菌血清型分布及其耐药性。采集徐州周边猪场病料和样本117份,经分离纯化、PCR鉴定得到102株大肠杆菌。经血清型鉴定,致病性试验和耐药检测,O抗原血清型检出79株,分属18个血清型,其中O15、 O45、O78、O138 4种血清型分别占已定型血清菌株的17.7%、11.4%、13.9%和12.6%,合计占55.6%,为徐州周边地区优势血清型;强毒株25株,占O抗原菌株的31.6%,主要分布在O45、O15、O138 3种血清型;耐药率50%以上的药物多达17种,占到了临床常用药物85%,其中阿莫西林、氨苄西林钠、强力霉素、氟苯尼考、恩诺沙星、乳酸环丙沙星临床耐药尤其严重,高达80%以上。多重耐药菌株至少耐药12种以上,耐药谱型多达8种。研究表明,徐州地区猪源大肠杆菌检出率高,血清型复杂且致病性强,多重耐药现象严重,应结合本地菌株流行特点进行大肠杆菌病的防治。 相似文献
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《畜牧与兽医》2017,(4):95-98
为了掌握皖北地区家禽致病性大肠杆菌的优势血清型及耐药性表现,从皖北4个市8个县区32个规模化养殖场采集疑似家禽大肠杆菌病的病料64份,通过常规分离培养纯化获取31株致病性大肠杆菌,对31株致病性大肠杆菌进行血清学鉴定和耐药性分析。试验结果表明:31株致病性大肠杆菌分别属于O_(78)、O_(18)、O_(88)、O_2、O_1、O_(143)、O_4、O_(35)、和O_(141)血清型,其中O_(78)9株、O_(18)7株、O_(88)5株,共计21株,占分离株的67.74%,属于本地区的优势血清型。致病性试验结果表明,所分离的31株致病菌中,83.9%具有高致病性,12.9%具有中致病性,3.2%具有低致病性,不同血清型致病性没有明显差异。分离菌株对11种抗生素表现不同程度的耐药性,对复方磺胺甲基异噁唑、磺胺二甲嘧啶、恩诺沙星表现严重耐药,耐药比例在70%以上;对阿莫西林、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、氟苯尼考、环丙沙星耐药比例在16%以上;对头孢噻肟、头孢唑肟、阿米卞星耐药性比例在10%以下。其中,对4、5、6种药物表现耐药比例较高,占分离株的60%以上,对3、7、8、9耐药性居中,所有菌株均表现为多重耐药性。研究结果为皖北地区家禽大肠杆菌病的疫苗防控、药物防治提供了科学依据。 相似文献
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38株鸭源大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验 总被引：1，自引：1，他引：0
本研究通过对山东某大型养殖场的病料采集,分离鉴定了38株鸭大肠杆菌。利用玻片凝集试验和试管凝集试验对分离菌进行了O血清型鉴定,用菌液涂布法对分离菌进行了药敏试验,结果表明,该养殖场存在较为严重的大肠杆菌感染,分离的38株大肠杆菌均有致病性,分属7种血清型,分别是Ｏ2、Ｏ21、Ｏ83、Ｏ119、Ｏ139、Ｏ73和Ｏ78,占分离菌株的86.84%;另有5株未能定型。药敏试验结果表明,38株鸭大肠杆菌对21种抗生素均有不同程度的耐药,并以多重耐药为主,耐药性差异较大,最为敏感的抗生素是磷霉素和阿米卡星2种药物。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2019,(23)
为了了解江苏省肉羊腹泻源致病性大肠杆菌毒力基因分布情况,并与相应的大肠杆菌O抗原型进行比较和分析其耐药性,试验采集江苏省部分地区24个肉羊养殖场临床腹泻样品75份,运用PCR技术、玻板凝集试验和药敏纸片琼脂扩散法对56株致病性大肠杆菌分离株进行毒力基因、血清型及耐药性分析。结果表明:56株分离株可分为11种不同毒力因子组合,O73为优势血清型。致病性大肠杆菌分离株对磷霉素、多黏菌素B比较敏感,敏感比例分别为85.71%、76.79%。耐药性最强的是强力霉素,耐药比例为94.64%;其次是四环素,耐药比例为78.57%。说明目前江苏省规模化肉羊养殖场致病性大肠杆菌的毒力基因检出率较高且基因型复杂,耐药性严重。 相似文献