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1.
试验旨在了解在鸡睾丸中高表达的1个长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)及其预测靶基因的时空表达规律,研究二者在鸡弱精子症中的调控作用。根据弱精子症和正常北京油鸡公鸡睾丸转录组测序筛选到的1个高表达的lncRNA(MSTRG.15568.9),采用顺式(cis)作用模式预测其潜在靶基因SPAG4(sperm-associated antigen 4),进一步采用实时荧光定量PCR方法进行表达量分析。分别选择3只0、5、20、30、45、60周龄正常北京油鸡公鸡,检测MSTRG.15568.9与SPAG4基因在不同周龄公鸡睾丸中的表达量差异;选择30周龄3只正常公鸡,采集睾丸、肝脏和脾脏等8个部位组织样品,检测MSTRG.15568.9与SPAG4基因在不同组织间的表达规律;选择45周龄弱精子症公鸡和正常公鸡各3只,对比MSTRG.15568.9与SPAG4基因在睾丸的表达量差异。结果显示,MSTRG.15568.9与SPAG4存在明显的时空表达差异,且二者表达趋势基本一致。在不同周龄的鸡睾丸组织中,MSTRG.15568.9和SPAG4的表达趋势相近,MSTRG.15568.9在20周龄的表达量显著高于0、5、30、45、60周龄(P0.05),0和5周龄表达量显著低于20、30、45和60周龄(P0.05);SPAG4在45周龄表达量最高,其次是20周龄(P0.05)。MSTRG.15568.9和SPAG4在睾丸和肝脏中的表达量均显著高于脾脏、肾脏等组织(P0.05);在正常睾丸组织中的表达量均显著高于弱精子症睾丸组织(P0.05)。综上所述,MSTRG.15568.9与SPAG4基因具有较明显的组织表达特异性,且MSTRG.15568.9可能调控SPAG4基因的表达,参与精子发生与精子活力调控;但其具体作用机制需要进一步探索。本研究可为鉴定与鸡弱精子症调节机制相关的功能基因提供参考。 相似文献
2.
SOX5蛋白对公鸡精子发生和精子活力的作用及其定位 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究旨在探明SOX5蛋白在家禽睾丸发育中的表达规律,分析其在睾丸发育和精子活力调控中的潜在作用。采用RT-qPCR和Western blot技术检测0、5、15、40和60周龄北京油鸡公鸡睾丸中SOX5mRNA和蛋白的表达,并比较其在40周龄正常公鸡与弱精子症公鸡睾丸中的表达差异,通过免疫组化技术对SOX5蛋白在睾丸组织中的表达进行定位。结果表明,SOX5 mRNA和蛋白在不同周龄公鸡的睾丸中均有表达,且差异显著(P0.05)。SOX5mRNA和蛋白表达量趋势一致;随着周龄的增加,其表达呈现先上升后降低的趋势:0和5周龄SOX5蛋白主要在精原细胞和支持细胞中表达;15周龄SOX5蛋白在支持细胞、各级精母细胞、圆形精子细胞和成熟精子中均高表达;40周龄表达量有所降低。SOX5基因和蛋白的表达趋势与公鸡性成熟和繁殖机能衰退的趋势一致,即性成熟前后和繁殖高峰期表达量较高,在性发育前和生精机能减退时表达量较低。此外,40周龄弱精子症公鸡睾丸中,SOX5的表达显著低于正常公鸡(P0.05)。综上表明,SOX5的表达量与公鸡睾丸发育水平和精子活力存在一定的相关,可能对其具有重要调控作用。 相似文献
3.
《畜牧兽医学报》2015,(6)
为了探究公鸡弱精症的发病机理,本研究对前期应用数字基因表达谱技术(Digital gene expression,DGE)及生物信息学分析得到的与公鸡弱精症相关的6个候选基因(COX7B、PTGDS、hPGDS、SPAG6、WNT2、CCNF)进行表达分析。选取300只42周龄的北京油鸡公鸡,进行为期4周的精液品质检测,从中筛出弱精及正常个体各15只。采用RT-qPCR对这6个候选基因在两组个体的睾丸组织的表达量进行相对定量检测。结果发现,COX7B、PTGDS在弱精组个体睾丸的表达量显著高于正常个体(P0.01),WNT2、hPGDS、CCNF在弱精组个体的表达量显著低于正常个体(P0.05),SPAG6在两组睾丸中的表达量没有显著差异,该结果与DGE的结果相吻合。通过DGE筛选出与弱精症相关的6个候选基因的表达模式在本研究的群体中得到进一步验证,可作为公鸡弱精症的重要候选基因,进一步进行功能分析与验证,为揭示公鸡弱精症的发病机理提供依据。 相似文献
4.
本研究旨在筛选北京油鸡SPAG6基因的SNPs位点,探讨其与种公鸡精液品质和性发育相关性状之间的关系。选择89只35周龄北京油鸡种公鸡,采用质谱SNP技术进行基因分型,利用Phase软件和Haploview软件进行单倍型分析并构建线性模型,对单个位点、单倍型与精液品质和性发育相关性状进行关联分析。结果表明:SPAG6基因内含子区域共有5个SNPs,其中C29756T和T23041C与精液量、精子活率和精子畸形率显著相关(P0.05);不同单倍型组合与精液量、精子畸形率显著相关(P0.05);H4H4单倍型组合精液量显著高于H2H3和H3H3组合(P0.05),精子畸形率显著低于H2H3和H3H3等组合(P0.05)。综合分析,SPAG6基因是影响鸡精液品质的候选基因;其单个位点SNP突变C29756T、T23041C和H4H4单倍型组合可作为高精液品质鸡群选择的分子标记。 相似文献
5.
为探究优质鸡鸡冠与繁殖性状的关系，试验以南丹瑶鸡300只母鸡、150只公鸡为研究对象，测量鸡冠面积、冠高、冠长及冠厚，分别将其与母鸡开产至40周龄的产蛋量、22周龄公鸡的精子活力及密度进行相关性分析，并根据面积大小将公鸡分为两组，在22周龄和28周龄时比较两组间精液品质的差异。结果显示：母鸡的鸡冠面积与产蛋量呈显著正相关（P<0.05）;22周龄公鸡的精子密度与鸡冠面积、鸡冠高、鸡冠长、鸡冠厚度均呈显著正相关（P<0.05），精子活力与鸡冠面积和厚度呈显著正相关（P<0.05），且大鸡冠组的精子密度显著高于小鸡冠组的精子密度（P<0.05）;28周龄大鸡冠组的精液量显著高于小鸡冠组（P<0.05）。研究表明，鸡冠与鸡产蛋量、精子密度等繁殖性状有关，在公鸡中虽然不同周龄中的精液品质有所不同，但大鸡冠公鸡精子质量略高于小鸡冠公鸡，可通过对鸡冠大小的选择来间接对优质鸡的繁殖性状进行选育。 相似文献
6.
为了探究Myf6基因在京海黄鸡和金茅黄鸡体内的差异表达规律，研究其在两个品种鸡中可能发挥的作用机制，试验采用实时荧光定量PCR技术对Myf6基因在不同品种鸡不同组织中的表达情况进行了检测。结果表明：京海黄鸡和金茅黄鸡公母鸡胸肌和腿肌中的Myf6基因相对表达量均比较高，且极显著高于脾脏(P<0.01);京海黄鸡心脏组织中的Myf6基因相对表达量显著高于脾脏(P<0.05),金茅黄鸡心脏组织中的相对表达量极显著高于脾脏(P<0.01);两个品种鸡的其余组织中Myf6基因相对表达量与脾脏相比差异不显著(P>0.05)。京海黄鸡公母鸡胸肌和腿肌组织中Myf6基因的表达规律基本一致，仅在4周龄胸肌组织中有稍微下降的趋势，但总体上呈现上升的趋势；腿肌组织中的相对表达量比较稳定，从0周龄到16周龄呈现上升趋势，16周龄时达到最高水平。金茅花鸡公母鸡胸肌和腿肌组织中Myf6基因的相对表达量从0周龄到4周龄呈上升趋势，8周龄有稍微下降的趋势，之后又呈现上升的趋势。在两个品种中，无论是公鸡还是母鸡，胸肌中Myf6基因的相对表达量始终显著高于腿肌(P<0.05)。说明Myf6基... 相似文献
7.
为探讨高温对精子膜蛋白牛精子相关抗原11D （sperm associated antigen 11,SPAG11D）表达水平的影响,试验采用了实时荧光定量PCR和Western boltting方法检测了牛睾丸原代细胞和娟姗牛、槟榔江牛、西门塔尔牛的正常精子及低活力精子中SPAG11D的表达。结果显示,牛睾丸原代细胞在不同温度（32、34、36、38和40℃）下培养24 h,SPAG11D的mRNA及蛋白在36℃时表达水平最高,且高温时表达水平比低温时要高;培养48 h时,SPAG11D的mRNA表达基本和24 h相一致,但蛋白表达水平在高温时明显下降。此外,槟榔江牛和娟姗牛低活力精子中SPAG11D的蛋白表达量比正常精子明显降低,而在西门塔尔牛的精液中变化不明显。 相似文献
8.
试验通过开展快慢羽群体的鉴定,并对比其在羽毛发育、生长和繁殖性能方面的差异,旨在为北京油鸡种鸡选育和科学养殖提供数据支持。选用北京油鸡纯系公鸡,出雏时,按照主翼羽与覆主翼羽的羽长差值将其分为快慢羽亚群,其中快羽包括K1（主翼羽长于覆主翼羽>5 mm）和K2（主翼羽长于覆主翼羽2~5 mm）,慢羽包括M1（主翼羽与覆主翼羽等长或主翼羽长于覆主翼羽<2 mm）和M2（主翼羽短于覆主翼羽）和M3（主翼羽未长出）。1~7日龄每隔1 d测量1次主翼羽与覆主翼羽羽长,7~42日龄每隔1周测量1次;1~8周龄每周测量体重,9~18周龄每隔1周测定体重;10周龄时,观测公鸡全身羽毛发育情况;47周龄时,测定公鸡常规精液品质性状、精子动力学参数、受精率及孵化率。结果显示,快羽公鸡占北京油鸡公鸡总数的11.60%,慢羽占88.40%,慢羽又以M2型为主,有少量M1型和M3型。育雏育成期（1~18周）北京油鸡快慢羽公鸡各周龄体重均无显著差异（P>0.05）。在育雏育成期,慢羽公鸡主翼羽和覆主翼羽生长均慢于快羽公鸡。其10周龄时,背部和腿部羽毛生长完全的鸡的比例仅为44%,且不同类型的慢羽公鸡的比例也不一,其中等长型或微长型慢羽最高,超过90%,未长出型慢羽最低,仅为17%左右。47周龄时快羽鸡和慢羽鸡的常规精液品质无差异,但是快羽公鸡精子直线性显著高于慢羽鸡（P<0.05）,直线速率高于慢羽公鸡（P=0.06）,快羽北京油鸡公鸡受精率显著高于慢羽公鸡（P<0.05）,且入孵蛋孵化率和受精蛋孵化率有高于慢羽公鸡的趋势,但差异不显著（P>0.05）。本研究结果表明,快慢羽北京油鸡公鸡的羽毛生长和繁殖性能有一定差异,需要加强慢羽公鸡羽毛发育缓慢原因和鉴定方法的研究,也需加强慢羽公鸡精液品质选育。 相似文献
9.
日粮代谢能水平对北京油鸡脂肪沉积和LPL基因表达的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
试验旨在研究不同日粮代谢能水平对北京油鸡脂肪沉积及脂蛋白酯酶（LPL）基因mRNA表达影响。试验以3周龄北京油鸡公鸡为研究对象,将480只公鸡随机分为4组,分别饲喂4个代谢能水平的日粮（12.122、12.540、12.958和13.376 MJ/kg）,每个处理组5个重复,每个重复24只鸡。试验期为10周。采用荧光定量PCR方法检测LPL基因mRNA表达水平。结果表明,日粮代谢能水平对鸡体脂沉积各项指标和LPL基因mRNA表达水平影响极显著,随日粮代谢能水平提高,各项体脂沉积指标极显著上升,胸肌和腿肌IMF、皮脂重和皮脂率在ME3达到峰值,LPL基因mRNA表达水平在ME2组达到峰值（P＜0.01）。LPL基因mRNA表达水平与腹脂率、皮脂重和皮脂率呈显著正相关（P＜0.05）。研究结果提示,日粮代谢能水平显著影响北京油鸡体脂沉积和LPL基因mRNA表达;LPL基因表达影响北京油鸡体脂沉积状况。 相似文献
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试验旨在研究不同日粮代谢能水平对北京油鸡脂肪沉积及脂蛋白酯酶（LPL）基因mRNA表达影响。试验以3周龄北京油鸡公鸡为研究对象，将480只公鸡随机分为4组，分别饲喂4个代谢能水平的日粮（12.122、12.540、12.958和13.376 MJ/kg），每个处理组5个重复，每个重复24只鸡。试验期为10周。采用荧光定量PCR方法检测LPL基因mRNA表达水平。结果表明，日粮代谢能水平对鸡体脂沉积各项指标和LPL基因mRNA表达水平影响极显著，随日粮代谢能水平提高，各项体脂沉积指标极显著上升，胸肌和腿肌IMF、皮脂重和皮脂率在ME3达到峰值，LPL基因mRNA表达水平在ME2组达到峰值（P＜0.01）。LPL基因mRNA表达水平与腹脂率、皮脂重和皮脂率呈显著正相关（P＜0.05）。研究结果提示，日粮代谢能水平显著影响北京油鸡体脂沉积和LPL基因mRNA表达；LPL基因表达影响北京油鸡体脂沉积状况。 相似文献
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【目的】 筛选与鸡繁殖性状近交衰退相关的长链非编码RNA （long non-coding RNA，lncRNA），为深入探究lncRNA对鸡繁殖性能近交衰退调控机制提供参考。【方法】 以狼山鸡高、低近交群体为试验素材，通过转录组测序技术分析狼山鸡下丘脑和卵巢中lncRNA表达情况，筛选高、低近交组间差异表达lncRNA，并对其进行顺式调控靶基因预测及功能分析。【结果】 狼山鸡下丘脑和卵巢中共鉴定出4 222个lncRNAs，高、低近交组间比较发现，下丘脑中差异表达lncRNAs 35个，卵巢中差异表达lncRNAs 215个。下丘脑中差异lncRNAs中预测到顺式调控靶基因98个，这些靶基因显著富集于出生或孵化时胚胎发育终止、胚胎心导管发育、视黄酸应答等繁殖相关生物过程（P<0.05），涉及lncRNA MSTRG.9196.4、MSTRG.9195.2、MSTRG.6254.2以及相应靶基因DNAAF2和FKBP1B等胚胎发育相关基因；卵巢中差异lncRNAs预测到顺式调控靶基因414个，这些靶基因富集到卵母细胞减数分裂、MAPK、叶酸合成等信号通路，包括MSTRG.7683.1、MSTRG.13604.4、MSTRG.16570.1、MSTRG.8330.5、MSTRG.8330.4等神经内分泌调节及配子生成相关的lncRNAs。【结论】 本研究在下丘脑和卵巢中筛选到了一系列鸡胚胎发育及配子生成调控相关差异lncRNAs，这些lncRNAs可作为鸡繁殖性能近交衰退候选lncRNAs，为进一步揭示鸡繁殖性能近交衰退调控机制提供线索。 相似文献
13.
LV Xue-ze JIA Ya-xiong HU Yan-peng ZHAO Chun-ying LI Xing-min CHEN Ji-lan CHEN Yu 《中国畜牧兽医》2016,43(9):2441-2446
The purpose of this study was to explore differences of the Beijing-You chicken product quality between different dactyly.Through the production performance,egg quality and meat characteristics comparative analysis research,we could get the correlation between the Beijing-You chicken polydactyly characteristic and its product quality.So this research could provide the reference to characteristic breeding and the development of the product quality of Beijing-You chicken.In this test,we selected Beijing-You chicken (for meat and eggs),and divided into 3 groups (four-toed (4F),single five toes (SF) and double five toes (DF)) with 4 replicates per guoup and 60 hens per replicate, 720 hens totally.Then,the production performance (weight,laying rate and egg weight),egg quality (haugh unit) and muscle quality (pH,waterholding capacity,shear force,TPA,andnucleotide metabolites) were determined,respectively.The results showed that the weight of DF Beijing-You chicken in 120 days and 240 days of age were slightly higher than that of 4F and SF Beijing-You chicken,but no significant difference (P>0.05);The egg weight of DF Beijing-You chicken in 160 days of age was significantly higher than other Beijing-You chicken (P<0.05).As for DF Beijing-You chicken,the waterholding capacity in leg muscles was better than the other types (P<0.05),hardness,conglutination and chewing of leg muscle were significantly lower than other types (P<0.05),while the cohesiveness and elasticity were significantly higher than other toe types (P<0.05).The shear force in leg muscles of DF and SF Beijing-You chickens were significantly higher than other types (P<0.05),the flavor substance shared no difference between different dactyly Beijing-You chicken (P>0.05).The performance of body weight and egg weigh of DF Beijing-You chicken were superior than 4F and SF Beijing-You chicken in the early stage,but had no significant difference.In addition,the muscle quality of different dactyly Beijing-You chicken had their own advantages,overall,the correlation between leg muscle quality and different dactyly was greater than the brisket. 相似文献
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为初步鉴定并挖掘出猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络,本试验通过构建腺病毒过表达载体,制备高滴度过表达腺病毒,介导猪 HEV-ORF3在HepG2细胞中实现过表达。Western blotting检测ORF3蛋白过表达成功后,运用lncRNA高通量组学测序,筛选出差异表达的lncRNA并进行靶向差异基因预测,对lncRNA靶向差异基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,初步鉴定出与核黄素代谢信号通路相关的lncRNA-mRNA调控网络。Western blotting结果显示,在约为12 ku处出现目的条带,说明成功实现腺病毒介导猪HEV-ORF3在HepG2细胞中过表达。lncRNA高通量组学测序结果显示,共发现102个显著差异表达lncRNAs表达量上调,80个显著差异表达lncRNAs表达量下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,初步挖掘出lncRNA(MSTRG.13995.2)和lncRNA(MSTRG.1960.1)可能是与核黄素代谢信号通路相关的显著差异表达lncRNA,分别通过顺式调控其靶向基因APC-5和FLAD1来影响核黄素代谢信号通路。本试验初步鉴定出lncRNA(MSTRG.13995.2)-APC5和lncRNA(MSTRG.1960.1)-FLAD1可能是影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络。 相似文献
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中国美利奴羊胚胎骨骼肌发育的加权基因共表达网络分析 总被引：2，自引：1，他引：1
旨在对绵羊胚胎骨骼肌lncRNAs（long non-coding RNA）进行鉴定分析,以阐明其在肌纤维类型转换与肌纤维增粗过程中的调控机制。本研究选取体重相近的成年中国美利奴母羊进行同期发情和人工授精,通过全转录组测序技术对其妊娠第85（D85N）、105（D105N）和135天（D135N）的胎儿背最长肌组织进行测序,设置D85N vs D105N、D105N vs D135N和D85N vs D135N 3个比较组,通过比较筛选出显著差异表达的lncRNA与mRNA。利用加权基因共表达网络分析（weighted gene co-expression network analysis,WGCNA）方法构建共表达模块,使用DAVID在线工具和R-package进行GO和KEGG富集分析以找到与肌肉发育相关的模块。最后从目标模块中筛选出高连通度的lncRNAs和mRNAs,通过它们与miRNAs间的靶向预测关系建立lncRNA-miRNA-mRNA共表达网络。根据WGCNA分析结果,共得到25个模块。功能富集显示,模块中的核心基因主要富集于细胞粘附、Wnt、紧密连接、mTOR、AMPK及ECM-受体相互作用等肌肉发育相关的信号通路,选出模块中连通度高的lncRNAs和mRNAs构建子网络,得到TNNI2、PIP5K1A、PDK4等关键相关基因,预测出MSTRG.3903、MSTRG.10154、MSTRG.1629、MSTRG.10496、MSTRG.9559、MSTRG.10178、MSTRG.10521、MSTRG.3911、MSTRG.4586、MSTRG.7232等10个与肌肉发育、肌肉疾病、细胞增殖相关的lncRNAs。本研究成功构建了肌纤维发育相关的lncRNA-miRNA-mRNA共表达网络,找到多个与妊娠后期胚胎骨骼肌发育相关的潜在候选基因,为深入研究lncRNA在中国美利奴羊胚胎发育过程中骨骼肌的发育调控机制奠定了基础,也为其他家畜骨骼肌发育机制的研究提供了参考和方向。 相似文献
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本研究旨在探讨不同趾型北京油鸡产品品质的差异,通过对其生产性能、蛋品质和肉品特征的比较分析,获知北京油鸡多趾特征与其产品品质之间的相关性,为北京油鸡特色养殖及产品品质开发利用提供参考。试验选取肉蛋兼用型北京油鸡,分为3组（双四趾、单五趾和双五趾）,每组4个重复,每个重复60只鸡,共720只,分别对其生产性能（体重、产蛋率和蛋重）、蛋品质（哈氏单位）及肌肉品质（保水性、剪切力、TPA、核苷酸代谢产物）进行测定。结果显示,双五趾北京油鸡在120和240日龄的体重均略高于双四趾和单五趾北京油鸡,但差异不显著（P>0.05）;双五趾北京油鸡160日龄的蛋重显著高于其他趾型北京油鸡（P<0.05）。双五趾油鸡腿肌保水性显著好于其他趾型（P<0.05）,腿肌硬度、胶着性和咀嚼性显著低于双四趾和单五趾油鸡（P<0.05）,而内聚性和弹性则显著高于其他趾型（P<0.05）,双五趾油鸡腿肌的剪切力显著高于其他趾型腿肌（P<0.05）,不同趾型间北京油鸡风味物质无显著差异（P>0.05）。双五趾北京油鸡在前期体重与蛋重方面表现优于双四趾北京油鸡,但差异不显著（P>0.05）。此外,不同趾型北京油鸡肌肉品质各有优势。总体来看,北京油鸡腿肌品质与趾型相关性大于胸肌。 相似文献
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试验旨在为北京油鸡品系选育、配套利用和科学养殖提供基础数据。选用北京油鸡纯系母雏534只,开展快慢羽群体的鉴定,并对比快慢羽母鸡羽毛发育、生长和繁殖性能的差异。北京油鸡保种群出雏时按照主翼羽与覆主翼羽的相对长度表型特征鉴别,将其分为快慢羽亚群,其中快羽包括K1（主翼羽长于覆主翼羽5 mm以上）和K2（主翼羽长于覆主翼羽2~5 mm）,慢羽包括M1（主翼羽与覆主翼羽等长或主翼羽长于覆主翼羽2 mm以内）、M2（主翼羽短于覆主翼羽）和M3（主翼羽未长出）。6周龄时通过PCR方法进行再次鉴定快慢羽。7 d内每隔1 d测量1次主翼羽与覆主翼羽羽长;7~42 d每隔1周测量1次;1~8周每周测定体重,9~18周每隔1周测定体重;产蛋期根据个体产蛋记录统计群体开产日龄、个体产蛋数以及连产相关性状等产蛋性能。结果表明,北京油鸡初生雏鸡快慢羽表型鉴定结果与通过PCR方法鉴定的结果一致,快羽鸡占总数的25%,慢羽鸡占75%,慢羽鸡又以M2为主,有少量M1和M3。21日龄以内快羽鸡的主翼羽羽长显著高于慢羽鸡（P<0.05）;28日龄时,M1和M2型慢羽鸡的主翼羽长度与快羽鸡差异不显著（P>0.05）,但是M3仍显著短于快羽鸡（P<0.05）。与慢羽鸡相比,快羽鸡70日龄后体重显著增加（P<0.05）,且开产日龄显著提前（P<0.05）,但是43周产蛋数较低（P<0.05）;快羽鸡除蛋形指数显著高于慢羽鸡外（P<0.05）,其他蛋品质指标均无显著差异。综上,快慢羽北京油鸡在生长和产蛋性能上有一定差异,在选育方向和生产管理中应有所差异化,包括加强慢羽品系早熟性即开产日龄的选育和调整快羽品系育成期饲料能蛋水平等。 相似文献