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1.
本试验旨在从泰山土壤中筛选出具有降解黄曲霉毒素B1（AFB1）作用的枯草芽孢杆菌,经16S rRNA基因测序鉴定为枯草芽孢杆菌,最终确定1株具有较高降解作用的枯草芽孢杆菌,命名为泰山枯草芽孢杆菌,并利用该菌株对AFB1进行了降解率、活性组分、性质的确定及降解饲料中AFB1效果的研究。结果表明,泰山枯草芽孢杆菌对AFB1的降解率达90.28%,其中,泰山枯草芽孢杆菌发酵后的上清液对AFB1的降解活性最高,确定发酵后的上清液中存在解毒活性组分;对解毒活性物质进行加热和蛋白酶K变性处理后,解毒活性显著降低,表明起解毒作用的活性物质是其分泌的一种胞外酶;应用性试验进一步证明泰山枯草芽孢杆菌能降解霉变饲料中的AFB1,可在饲料或食品行业应用。 相似文献
2.
对筛选出的一株枯草芽孢杆菌进行生物学特性研究。将枯草芽孢杆菌全菌液、上清液及超声波菌体分别进行抑制黄曲霉菌生长试验和降解黄曲霉毒素解毒效率,并进行抑制大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌抑菌试验,以及耐酸、耐胆盐、胃肠耐受能力和温度敏感试验。结果表明该株枯草芽孢杆菌超声波菌体对黄曲霉生长具有明显抑制作用,对黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素G1和黄曲霉毒素M1的降解活性分别为75%、70%和62%,而全菌液和上清液效果较差。对大肠杆菌和沙门菌抑菌效果较好,对金黄色葡萄球菌较差,能够耐酸、耐胆盐、胃肠耐受能力和耐高温。试验对该株枯草芽孢杆菌应用临床提供理论依据。 相似文献
3.
《中国饲料》2018,(23)
为了筛选能稳定高效降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的细菌,本试验以香豆素培养基进行初筛,AFB1标准品进行复筛,从动物粪便堆肥土壤中获得降解率最高的菌株,命名为SG16,并初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。通过研究各发酵组分的降解率,不同p H、温度、金属离子等因素下发酵液的降解活性,以及浓缩发酵液对发霉玉米中AFB1降解的效果。结果显示:各组分中发酵上清液降解率最高为80.62%,菌悬液和胞内液的降解率仅为14.32%和10.67%,温度、p H、金属离子、蛋白酶K均能影响其毒素降解活性,因此SG16产生的降解AFB1活性物质初步鉴定为胞外酶。浓缩发酵液能显著降低霉变玉米中AFB1的含量,这为生物防治饲料或粮食中的黄曲霉污染提供资源。 相似文献
4.
为研究青贮用黄曲霉毒素降解菌N-1a的降解特性及在全株玉米青贮中的应用效果,本试验首先对菌株N-1a的发酵上清液进行不同处理后分别与毒素作用,初步研究降解活性物质的性质;然后研究N-1a发酵上清液在不同pH、不同温度下对黄曲霉毒素的降解率;最后通过发酵黄曲霉污染的全株玉米来验证N-1a在实际生产中的应用效果。结果表明:初步判定枯草芽孢杆菌N-1a降解黄曲霉毒素的活性物质是一种分泌蛋白,其在pH7.0和温度37℃时降解率最高;在全株玉米青贮试验中,N-1a明显降低了全株玉米青贮过程中的黄曲霉毒素,添加N-1a的处理组黄曲霉毒素含量为(8.56±1.68)μg/L,添加市售菌剂的处理组黄曲霉毒素含量为(15.26±2.53)μg/L;N-1a还有效降低了中性洗涤纤维(NDF)的含量,加入N-1a处理组NDF含量较加入市售菌剂的处理组降低7.98%;加入N-1a处理组乳酸含量比加入市售菌剂的处理提高1.66%,由此可见,N-1a处理组效果显著优于市售菌剂组。 相似文献
5.
本试验旨在研究黄曲霉毒素分解酶(ADTZ)基因在枯草芽孢杆菌中的表达与应用。试验通过构建枯草芽孢杆菌ADTZ基因的整合表达载体,将ADTZ基因整合到野生型枯草芽孢杆菌(B.subtilis LN)中,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)初步检测ADTZ蛋白的表达情况。将重组枯草芽孢杆菌作为发酵菌种接种到发霉玉米中进行发酵试验,检测发霉玉米样品中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量的变化,验证ADTZ基因在枯草芽孢杆菌中的表达效果。结果表明,通过构建整合表达载体成功将ADTZ基因整合到枯草芽孢杆菌基因组中,在SDS-PAGE上检测到重组枯草芽孢杆菌能够分泌表达特异性蛋白条带。经过重组菌发酵的发霉玉米AFB1的含量较未接种和接种野生型枯草芽孢杆菌发酵的发霉玉米AFB1的含量差异显著(P0.05)。由此可见,ADTZ基因可成功整合到野生型枯草芽孢杆菌中,并进行了胞外分泌表达,表达产物具有生物活性,能有效地降解AFB1。 相似文献
6.
基于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis spp.)能产生对致腐菌有明显抑制作用,而对人畜安全无毒无害的活性物质,探究将一株分离自桑枝条的枯草芽孢杆菌开发为桑椹鲜果生物防腐保鲜剂的可行性。采用生长速率法测定供试枯草芽孢杆菌菌悬液、发酵上清液、发酵滤液对桑椹鲜果采后的主要致腐菌核盘菌属霉菌(Sclerotinia sclerotiorum GA)和链格孢属霉菌(Alternaria sp.GE)的体外抑菌效果,结果表明:菌悬液的抑菌效果最好,发酵上清液次之,发酵滤液较弱,且呈现浓度(剂量)效应;枯草芽孢杆菌菌悬液与发酵上清液对GA的最高生长抑制率分别达77.88%和81.00%,对GE的生长抑制率最高可达80.61%和81.72%。桑椹采后防腐保鲜的试验结果表明,枯草芽孢杆菌菌悬液对采后桑椹的腐败变质有较好的抑制效果,用浓度为3.5×10~5CFU/m L的菌悬液处理的桑椹鲜果,在25℃条件下贮藏72 h,腐烂率仅为58.75%,而对照组已达88.75%。试验结果证实,用供试枯草芽孢杆菌处理桑椹鲜果可以抑制其霉变,并且枯草芽孢杆菌细胞浓度的变化会影响保鲜效果。 相似文献
7.
花生或花生粕易受到黄曲霉毒素的污染,影响产品安全和动物健康。为筛选具有高效去除黄曲霉毒素能力的菌株,本试验以香豆素为唯一碳源和能源,对各种目标菌株进行初筛,再将活性较好菌株与黄曲霉毒素(AFB_1)共培养后,通过测定AFB_1降解率进行复筛,同时在含有黄曲霉毒素的花生粕培养基中进行验证,并对高效菌株的去除特性进行了初步考察。结果显示,经过初筛和复筛过程,筛选出2株芽孢杆菌、1株乳酸菌和1株酵母菌具有AFB_1去除能力;利用验证过程和对AFB_1去除率的高低,确定枯草芽孢杆菌为高效去除AFB_1菌株;比较枯草芽孢杆菌各组分去除AFB_1能力发现,枯草芽孢杆菌去除AFB_1的能力主要由菌体代谢产生的某种活性物质主导,并提示其是一种胞外物质。 相似文献
8.
本研究筛选获得一株产纤维素酶的耐高温枯草芽孢杆菌FJAT-5561,分析其产酶和抑菌特性,应用于豆粕固体发酵。枯草芽孢杆菌FJAT-5561在45℃、pH为8时的酶活性达0.90 U/mL。抑菌试验结果显示：该菌对青霉具有抑制效果,电镜观察显示FJAT-5561菌株的发酵上清液使青霉菌丝变形和萎缩,抑制菌丝生长。豆粕发酵试验结果表明,添加枯草芽孢杆菌FJAT-5561可降低豆粕中难降解的粗纤维含量,提升豆粕中的粗蛋白质含量。发酵后的豆粕中未检出黄曲霉素、赭曲霉毒、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镶刀菌烯醇等真菌毒素,也未检出黄曲霉。 相似文献
9.
《中国兽医学报》2017,(12):2397-2401
旨在研究2株枯草芽孢杆菌协同降解黄曲霉毒B1(AFB1)的作用。将2株枯草芽孢杆菌进行生理生化特性鉴定和16SrRNA序列测定后,以AFB1降解率为依据,分别进行优化培养并观察协同降解作用。结果表明:菌株K-3优化条件为装液量50mL/250mL、温度37℃、4%接种量、初始pH7.0、发酵周期48h,150r/min振荡培养,对AFB1降解率为88.07%(P<0.05);菌株K-TM装液量为50mL/250mL、温度37℃、6%接种量、初始pH7.0、发酵周期60h,150r/min振荡培养,对AFB1降解率为84.81%(P<0.05);K-3、K-TM按体积1∶2组合,对AFB1协同降解率达到88.43%。本研究为益生菌在降解黄曲霉毒素中的应用奠定理论基础及试验依据。 相似文献
10.
【目的】筛选出能够高效降解黄曲霉毒素（aflatoxin,AF）的菌株,并对其降解活性及残留毒性进行检测,以期为黄曲霉毒素B1（alflatoxin B1,AFB1）污染防治提供参考。【方法】采集耗牛、绵羊等草食性动物粪便和养殖场霉变饲料,以AFB1的结构类似物香豆素为唯一碳源筛选降解AFB1效率最高的菌株,并对其进行形态学、生理生化和16S rDNA鉴定。取AFB1与适量筛选菌株的发酵液混合,使AFB1的浓度为1 μg/mL,37℃、150 r/min培养,测定培养不同时间AFB1降解率;应用差速离心法分别制取上清液、菌悬液和菌体,将菌体超声裂解后制得胞内液,测定不同组分对AFB1的降解率;对上清液分别进行蛋白酶K、蛋白酶K+SDS和热处理,检测处理后上清液AFB1降解率;分别用不同浓度的饱和硫酸铵沉淀处理上清液,检测AFB1降解率;应用7 ku透析袋对上清液进行浓缩,检测AFB1降解率,从而判断菌株活性成分的性质和分布。将鸡肝细胞分为AFB1组、AFB1-菌株组、菌株组和空白对照组,用实时荧光定量PCR检测各组鸡肝细胞中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosisi factor alpha,TNF-α）和Bcl-2-associated X蛋白（Bax）基因的相对表达量。【结果】经初筛和复筛,从编号为S1的绵羊粪便样品中分离出1株菌株,其降解AFB1的活性最高,降解率可达60.36%。菌株S1在LB固体培养基上培养12 h,可观察到淡黄色不透明菌落,表面光滑,有隆起,镜检革兰氏染色呈阳性,杆状。16S rDNA基因进行PCR扩增并进一步测序分析,其序列与LC55966.1的同源性为100%。综合16 S rDNA序列分析和生理生化结果鉴定该菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。该菌发酵液与AFB1（1 μg/mL）反应4、12、24、48和72 h,降解率分别达到10.98%、25.36%、46.24%和52.65%和80.84%。上清液AFB1降解率显著高于菌悬液和胞内液（P<0.05）。热处理后,上清液的AFB1降解活性降低,而经蛋白酶K和SDS处理后降解活性基本丧失。用不同浓度饱和硫酸铵处理的上清液AFB1降解率差异不显著（P>0.05）,而经透析浓缩后的上清液AFB1降解率显著高于硫酸铵处理的上清液沉淀蛋白（P<0.05）。在鸡胚胎肝脏原代细胞上,与AFB1组相比,AFB1经枯草芽孢杆菌S1降解后诱导IL-6、TNF-α以及Bax的表达量均显著降低（P<0.05）。【结论】筛选到1株枯草芽孢杆菌S1,其具有较高的降解AFB1的活性,其降解活性主要来自于培养液上清中的蛋白质;AFB1经降解后其毒素显著降低。 相似文献
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黄曲霉毒素降解菌对饲喂含AFB_1霉变玉米日粮蛋鸡生产性能和蛋品质的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验旨在研究黄曲霉毒素降解剂(霉立解菌,MLJ060菌)对饲喂含黄曲霉毒素B(1AFB1)霉变玉米日粮蛋鸡生产性能和蛋品质的影响。选取60周龄农大三号蛋鸡70只,随机分为7个处理,分别为基础日粮(正常玉米)组(C0)和用20%、40%、60%霉变玉米分别替代C0组中等量正常玉米的C20、C40、C60组及霉变玉米日粮中添加MLJ 060菌的E20、E40、E60组,其中霉变玉米中AFB1含量为70μg/kg,MLJ 060添加量按每千克霉变玉米添加0.4 L发酵液,试验期为21 d。结果表明:对照组C0产蛋率为75%,随着日粮中霉变玉米添加量增加,C20、C40、C60组产蛋率分别降低到65%、63.41%和49.79%,C40、C60组显著低于C0组(P<0.05);而添加MLJ060菌后的E20组产蛋率提高到74.68%,E40、E60组的产蛋率也随之提高。C60组蛋鸡日耗料量显著低于C0、C20、C40组(P<0.05),MLJ060菌的添加没有显著改善采食霉变玉米鸡的采食量(P>0.05)。随发霉玉米添加量的增加,蛋黄重下降,蛋黄色泽、蛋壳厚度和蛋壳强度均显著变差(P<0.05),其中C40组蛋黄重显著低于C0组(P<0.05),E40组与对照组差异不显著;C20组的蛋黄色泽显著低于C0组,E20组与对照组接近。霉变饲料中添加黄曲霉素降解菌在一定程度上改善和缓解了黄曲霉毒素对蛋鸡生产性能和蛋品质的不利影响。 相似文献
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旨在筛选出能够高效降解黄曲霉毒素B1（AFB1）的菌株,并对其脱毒活性组分的脱毒效果进行研究,本研究以香豆素为唯一碳源对目标细菌进行初筛,以对AFB1的降解率为指标进行复筛,并从形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析对筛选菌株进行鉴定;通过测定该菌株不同发酵组分对AFB1的降解率,来定位其脱毒活性组分,同时采用CCK-8法测定活性组分降解AFB1后对LMH细胞毒性,并研究了热处理、紫外线照射、强酸、强碱及蛋白酶K处理对活性组分脱毒作用的影响。结果显示,从样品中初筛分离到24株能够在初筛培养基生长良好的菌株,经复筛从中筛选到一株能高效降解AFB1的菌株Y1-B1,其AFB1降解率达到73.2%;经形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析确定该菌为解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。对菌株Y1-B1培养物的不同组分进行的脱毒活性研究表明,不同组分对AFB1的降解率不同,上清液的脱毒能力最强,细菌细胞裂解物的脱毒能力下降明显,菌体悬液和菌体裂解物上清的脱毒能力最差,由此确定解淀粉芽胞杆菌Y1-B1的脱毒能力主要来源于上清液中的某种活性物质;细胞毒性结果显示,与AFB1对LMH细胞的毒性作用相比,AFB1被上清液降解后其产物的毒性显著降低。该脱毒活性组分对不同理化因素处理呈现出不同的表现,对高温、紫外照射抵抗力较强,对强酸、强碱抵抗力较差,蛋白酶K仅造成脱毒能力部分减弱。本研究将为解决黄曲霉毒素污染问题提供新的微生物种质资源,同时为后续微生物脱毒制剂的开发奠定基础。 相似文献
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Evaluation of heat-sensitive, neutrophil-toxic, and hemolytic activity of Haemophilus (Actinobacillus) pleuropneumoniae 总被引：28，自引：0，他引：28
S Rosendal J Devenish J I MacInnes J H Lumsden S Watson H Xun 《American journal of veterinary research》1988,49(7):1053-1058
Cytotoxic and hemolytic activity of Haemophilus (Actinobacillus) pleuropneumoniae serotype 1 strain CM5 was investigated because of the potential role as a virulence determinant. Viable bacteria were toxic for porcine and bovine neutrophils, whereas bacteria killed by heat treatment at 60 C for 1 hour were not. Similarly, bacteria-free culture supernatant was cytotoxic and hemolytic in assays that used porcine neutrophils and erythrocytes, whereas supernatant treated at 60 C for 1 hour had no activity. Erythrocytes from various species were susceptible to the hemolytic activity of bacteria-free culture supernatant, with ovine and bovine erythrocytes being most sensitive. The neutrophil-toxic and hemolytic activity of bacteria-free culture supernatant was inhibited by cholesterol and oxygen and abolished after trypsin digestion. The neutrophil-toxic and hemolytic activity was preserved during storage at or less than 4 C, but was lost rapidly at 56 C or 80 C. Neutralizing antibodies were demonstrated in serum of pigs and rabbits immunized with 10-fold concentrated culture supernatant of strain CM5 and in field pigs that had recovered from natural infection with H pleuropneumoniae serotype 1. Bacteria-free culture supernatants of 18 strains, including H pleuropneumoniae serotypes 1 through 10, Actinobacillus suis, and Haemophilus taxon minor group, were tested for heat-sensitive, neutrophil-toxic, and hemolytic activity. Fifteen strains were neutrophil toxic, but only 10 of these were hemolytic. Haemophilus pleuropneumoniae, serotype 1, strain VLS557; serotype 5, strain K17; and Haemophilus taxon minor group strain 33PN were neither cytotoxic nor hemolytic. 相似文献
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Byeong Joo Seo Mi Ran Mun Rejish Kumar V. J Chul-Joong Kim Insun Lee Young-Hyo Chang Yong-Ha Park 《Veterinary research communications》2010,34(4):323-333
Lactic acid producing bacterial strain Probio-16 was isolated from the swine excrements under anaerobic conditions and characterized
by morphology and biochemical characteristics. The strain was further identified by 16S rRNA gene sequencing and phylogeneitc
analysis. The antimicrobial activity of the strain was assayed by testing for growth inhibition of thirteen pathogenic microorganisms.
The strain was tested for antiviral activity against porcine rotavirus in vitro in African green monkey epithelial cell line
TF-104. Antibiotic susceptibility of the strain against 13 antibiotics was tested using disk diffusion method. Phenotypically
and through 16S rRNA gene sequences, Probio-16 was identified and named as Lactobacillus reuteri Probio-16. This strain was resistant to pH 2.0, 5% porcine bile and exhibited antimicrobial activity against all the thirteen
enteric bacterial pathogens tested. Probio-16 supernatant inhibited porcine rotavirus in vitro in TF-104 cell lines. Except
for erythromycin and penicillin G at a concentration of 4 μg/ml, Probio-16 showed resistance to all other thirteen antibiotics
tested. This study indicates L. reuteri Probio-16 as a novel strain with its tolerance to low pH and bile, antimicrobial activity, antibiotic resistance and antiviral
activity against rotavirus, and an ideal probiotic candidate for animal and human application after the proper in vivo experiments. 相似文献
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【目的】试验旨在研究植物乳杆菌GX20200417-1菌株的生物学特性及体外抑菌活性,探讨其在生产中应用的可能性。【方法】将植物乳杆菌GX20200417-1菌株接种至不同pH和含不同浓度胆盐的PBS,以及人工胃肠液中,使用菌落计数分析其对酸、胆盐和人工胃肠液的耐受性。使用牛津杯法检测GX20200417-1菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及沙门氏菌的抑菌能力;通过与霉菌毒素共培养后使用ELISA方法研究GX20200417-1菌株对霉菌毒素的降解能力,并饲喂小鼠进行安全性试验。【结果】植物乳杆菌GX20200417-1菌株能够耐受pH 2.0及0.3%胆盐,并在人工胃肠液中有至少1×104 CFU/mL的活菌数;GX20200417-1菌株发酵上清液对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用,对玉米赤霉素及黄曲霉毒素均有降解作用,但对呕吐毒素无降解作用;灌服GX20200417-1菌株后小鼠安全、无毒副作用。【结论】植物乳杆菌GX20200417-1菌株具有优良的益生特性,在畜禽生产中有一定的开发潜力。 相似文献
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黄曲霉毒素（aflatoxin，AF）是霉菌产生的毒性极强的次级代谢产物，主要存在于乳与乳制品和霉变谷物中。目前研究较多的黄曲霉毒素有黄曲霉毒素B1（AFB1）、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1和AFM2，黄曲霉毒素物理与化学性质稳定，加热处理很难将其破坏，是目前公认的毒性最强的致癌物之一。黄曲霉毒素不仅会造成动物营养不良及免疫力下降等问题，进入人体后还会对人体的肝脏造成极大的损害，而且原料乳中黄曲霉毒素的存在会对整个乳制品产业链造成严重的危害。因此，建立简便的、特异性好、灵敏度高的检测乳与乳制品中黄曲霉毒素的方法具有十分重要的意义。作者综述了乳与乳制品中黄曲霉毒素的检测方法进展，介绍了国内外近年来质谱法、电化学法、光谱法、色谱法、试纸条法等方法在检测乳与乳制品中黄曲霉毒素的应用，总结以上各种方法在检测乳与乳制品中黄曲霉毒素中的优势与其面临的挑战，并对今后乳与乳制品中黄曲霉毒素检测方法的发展方向进行了展望，以期为设计新的乳与乳制品中黄曲霉毒素检测方法提供思路。 相似文献
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《The Journal of Applied Poultry Research》2008,17(4):515-521
The efficiency of decontamination of aflatoxin residues in poultry feeds through exposure to sunlight (solar radiation), γ-radiation (60 Co), and microwave heating were investigated in artificially contaminated feed samples. Photodegradation of aflatoxin by sunlight has been found to cause a significant (P < 0.05) decrease in both B1 and the total aflatoxins. Moreover, the degrees of aflatoxins were dependent on exposure time. Both aflatoxin B1 and total aflatoxins were decreased when feed samples exposed to sunlight by 42.3, 39.9, 75.5, and 65.9% for 3 and 30 h of direct sunlight of the treatment T1, whereas feed samples subjected to γ-irradiation and microwave heating caused a significant (P < 0.05) decrease in aflatoxin B1 contents by 42.7 and 32.3% for γ-irradiation and microwave heating (T3 of 25 kGy and 10 min of microwave heating), respectively. Therefore, the solar radiation was more effective in aflatoxin B1 reduction when compared with γ-irradiation and microwave heating. 相似文献