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1.
1、用增加培养液量(3—4倍)旋转法培养猪瘟弱毒细胞疫苗,第一收、第二收病毒收获液的毒价均可达到普通旋转培养法的滴度。二收的绝大多数批次毒价用兔检5万倍通过,符合制苗要求。 2、用深液(培养液量增加7—8倍)倾斜旋转法培养猪瘟弱毒细胞疫苗。第一收与第二收的毒液或培养7天一次全收的毒液,其大多数试验批次毒价均可达到制苗标准。 3、用深液(培养液量增加8倍)倾斜旋转通气法培养猪瘟弱毒细胞疫苗,接毒后培养7天一次全收毒液,大多数批次试验毒价用兔检5万倍通过。符合制苗要求。以上三种培养方法所得资料说明提高猪肾细胞产毒量是明显的,工艺是简便的,在生产上是可行的。对细胞提高繁殖病毒能力的问题进行了某些探索。  相似文献   

2.
为了克服猪瘟兔化弱毒乳免疫苗成本高,易污染的缺点,弥补采用常规猪肾细胞制造猪瘟弱毒疫苗的潜在致病危险性。本文成功的在犊牛睾丸细胞上连续增殖猪瘟化弱毒,特别是利用次代或二代细胞进行转瓶堵养,收获的猪瘟兔化弱毒其毒价稳定,细胞不易老化脱壁。现已制成猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞培养冻干疫苗,生产工艺简单,成本较低。疫苗对猪的免疫原性良好,免疫期一年以上。性能稳定,在-15℃可保存13个月,4℃保存半年以上,25℃也可保存14天。经7691头猪的免疫接种试验,证明本苗安全,无一死亡,个别猪有反应,其反应率仅为0.74%。  相似文献   

3.
本实验是摸索猪肾原代细胞(带毒与不带毒)的传代方法,先用无 Ca~(++)、Mg~(++)平衡盐溶液浸洗细胞单层表面,再用胰蛋白酶、EDTA 混合消化液消化分散的程序,获得较好的效果。在此基础上,对不同培养时间的猪肾细胞(带毒与不带毒)经传代后繁殖猪瘟病毒的能力作了比较。结果表明:生产猪瘟病毒的猪肾细胞经过四次收获、传代后,不论是否补加病毒,其产毒能力均较差。而只经过两次收获、传代后的细胞,补加了病毒后其产毒能力较前者有明显的提高。不带毒的猪肾细胞也以培养时间较短的,传代后产毒能力为好。若能应用于实际生产中,可以将刚形成单层的原代猪肾细胞传一代后再接毒,以减少杀猪和增加细胞与病毒的产量来达到减少成本、降低原材料消耗和提高产量的目的。  相似文献   

4.
为评估猪睾丸(ST)细胞系作为猪瘟活疫苗生产用细胞基质的可行性,本试验取猪睾丸(ST)基础细胞库、工作细胞库不同代次细胞分别进行致瘤性检验和胞核学检验。结果表明,ST细胞在传代过程中无致瘤性且染色体遗传稳定。本试验取不同代次的ST细胞繁殖猪瘟病毒液并测定其毒液效价;取不同代次的ST细胞繁殖的猪瘟病毒分别对猪进行免疫攻毒测定其免疫原性。结果表明,将ST工作细胞传至第30代,其仍能良好地表达猪瘟病毒,且产毒稳定,病毒滴度高,连续收毒,病毒产量高,其所表达的猪瘟病毒仍保持良好的免疫原性。上述结果表明,猪睾丸(ST)细胞系适宜作为猪瘟活疫苗生产用的细胞基质。  相似文献   

5.
1946年开始,国内外研究人员采用非猪源动物或用细胞传代驯化猪瘟病毒,培育猪瘟弱毒疫苗.1954年周泰冲等用猪瘟强毒经家兔传代减毒,并经继代纯化成功培育出一株能适应家兔的猪瘟病毒变异毒,该毒株对猪无致病性、遗传性能稳定[1-3]、具有良好的免疫原性,这就是国内外广泛使用的中国猪瘟兔化弱毒株(Chinese strain,简称“C株”).目前中国广泛使用C株来生产猪瘟活疫苗,按疫苗毒源类型为牛睾丸细胞源、兔源、传代细胞.本试验主要对高效价猪瘟活疫苗(STK克隆传代细胞源)进行田间应用效果跟踪,通过对收集到的数据进行对比分析,评估该疫苗的免疫效果.  相似文献   

6.
为了解决当前疫苗大量生产中存在的问题,我所在1965年就进行过猪瘟兔化弱毒在猪肾细胞上培养的研究,并初步证明猪瘟兔化弱毒在猪肾细胞上也可以进行细胞——病毒连续增殖。1973年我们再次进行了猪瘟兔化弱毒猪肾细胞——病毒连续增殖方法的研  相似文献   

7.
笔者1982年开始用犊牛睾丸细胞繁殖猪瘟兔化弱毒,7年来进行了各种对比试验,说明用犊牛睾丸细胞复制猪瘟兔化弱毒是成功的,为我国提供防治猪瘟病的疫苗开辟了新的制造手段。不但可以保证疫苗质量,并能确保安全,提高预防效果,降低成本。几年来,经过试产和扩大再生产,截至1988年底,共生产犊牛睾丸细胞苗5000万多头份  相似文献   

8.
牛睾丸原代细胞是目前生产细胞型猪瘟弱毒疫苗的最主要细胞源.全国每年用于生产猪瘟弱毒疫苗的牛睾丸约为70万对,但牛的产仔具有相对严格的季节性,且同一个牛场每天的睾丸产量是极其有限的.这给疫苗生产厂家批量收集睾丸以及调剂生产周期等方面带来了困难.另外,经常不断的从外界送入生鲜睾丸组织,增加了药品生产质量管理规范(GMP)车间的污染频率,因此,进入GMP车间用于生产猪瘟疫苗的牛睾丸细胞最好是经检测无污染并能产出高效价病毒的合格细胞.但是,牛睾丸细胞传代次数是有限的.统计数据表明,牛睾丸细胞接种猪瘟病毒只适合传5代次[1].  相似文献   

9.
猪常用疫苗基本特性及使用方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
(一)猪瘟疫苗免疫接种是预防和控制猪瘟的主要手段,目前我国瘟猪疫苗种毒均为猪瘟兔化弱毒,疫苗有组织苗和细胞苗2种类型。组织苗主要是利用猪瘟兔化弱毒接种3~5日龄乳兔,接种36小时后取乳兔的肝、脾及肌肉组织制成的疫苗。细胞苗是猪瘟兔化弱毒经犊牛睾丸细胞或ST细胞培养制成的疫苗,犊牛睾丸细胞有可能携带牛病毒性腹泻粘膜病病毒。生  相似文献   

10.
《养猪》2015,(5)
为确定脾毒保存期对猪睾丸细胞(Swine Testis,ST)繁殖猪瘟病毒的影响,选用不同保存期的脾毒接种ST细胞,培养猪瘟病毒,从感染率、产毒时间、病毒液效价、合格收次4个方面进行对比。结果显示,随着脾毒保存期延长,病毒对细胞感染率明显降低,产毒时间延后,所产病毒液效价下降,合格收次减少。提示保存期对ST细胞产毒有很大影响,在生产中应严格控制脾毒种毒的保存期。  相似文献   

11.
用猪瘟毒弱毒株感染或活毒疫苗接种猪,探讨了体液免疫反应(血清中和作用)和细胞免疫反应(淋巴细胞刺激试验)。接种疫苗的猪显现出强烈地产生中和抗体,但没有查出细胞免疫反应。而在感染慢性猪瘟病毒的猪中,未发现中和抗体,但观察到暂短时间的细胞免疫反应(在接种后18天)。  相似文献   

12.
将犊牛睾丸置2~8℃保存96 h,按常规方法制备原代和次代细胞,并接种猪瘟兔化弱毒苗,结果表明细胞活力和产毒效价均可满足生产要求,从而建立了睾丸组织细胞活力保持的一种新方法。  相似文献   

13.
在传至70代的永生化猪血管内皮细胞接种猪瘟兔化弱毒,72 h后收取细胞上清液并对处理的细胞进行传代培养,分别检测第70、75、80、90、100、105代接毒细胞中病毒,观察各代细胞的生长情况。结果表明,接种猪瘟兔化弱毒后20代(第90代永生化猪血管内皮细胞)的细胞与正常的形态相似,但传至接毒后35代(第105代永生化猪血管内皮细胞)时,细胞稍有拉长现象。各代次细胞中都有猪瘟兔化弱毒的检出。本研究为永生化猪血管内皮细胞生产猪瘟兔化弱毒疫苗奠定了基础。  相似文献   

14.
1效力 用我国生产的猪瘟兔化弱毒牛睾丸细胞苗免疫无猪瘟抗体及抗原的易感猪,每头皮下注射1头份,14天后分别攻击猪瘟野毒,每头皮下注射猪瘟血毒2毫升。结果表明,猪瘟弱毒细胞苗对9株野毒均具有坚强的保护力,免疫组100%保护,对照组76.5%死亡。以猪瘟荧光抗体法(HCFA)检查,  相似文献   

15.
在某个存在多种病毒性病原混合感染的规模猪场,通过使用猪瘟E2基因工程亚单位疫苗与猪瘟ST传代弱毒细胞苗进行免疫对比试验。免疫前该猪场猪瘟抗体水平比较低(平均ELISA阻断率低于40%),猪群表现为不稳定,存活率低,并且病原检测到猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒2型;与弱毒苗相比较,猪瘟E2亚单位疫苗免疫后,猪瘟抗体滴度显著升高,猪群成活率明显提升。临床应用结果表明E2亚单位疫苗可以突破免疫抑制的影响,在猪群存在猪蓝耳病和猪圆环病毒病等免疫抑制性疾病的情况下,仍可以稳定提高猪瘟抗体水平,提供有效保护,提升生产成绩。  相似文献   

16.
为了选择适合山羊痘病毒AV41株增殖的原代细胞,提高山羊痘病毒疫苗生产效率,分别采用常规方法制备绵羊睾丸细胞、绵羊肾细胞、犊牛睾丸细胞3种原代细胞,接种山羊痘病毒细胞弱毒AV41株进行传代培养,比较该病毒株在3种细胞上所引起的细胞病变时间、病变形态及其传代稳定性等增殖特性,并进行特异性、安全性、效力测定,试验结果显示,AV41株在3种原代细胞上均可增殖,其特异性、安全性均符合兽药典要求。疫苗株在以上3种细胞上的TCID50浓度分别达到10-6.125、10-5.5、10-5.875/mL,细胞病变形态、病变时间、最高传代次数等增殖特性存在一定差异。试验证明,原代绵羊肾细胞或原代犊牛睾丸细胞可以作为山羊痘病毒疫苗生产的候选细胞。  相似文献   

17.
根据PPA-ELISA测定的猪瘟弱毒抗体OD值来决定的规模化集约化养猪场的猪瘟免疫程序为:使用猪瘟弱毒犊牛睾丸细胞苗免疫的母猪,其仔猪在20日龄进行首免,60日龄或断乳后进行二免,育肥猪直至出栏,不再免疫。种猪于配种前进行第三次免疫,以后每半年于断奶后配种前进行一次加强免疫。每次免疫接种剂量均是2头剂猪瘟弱毒犊牛睾丸细胞苗。  相似文献   

18.
鸡痘鹌鹑化弱毒在犊牛睾丸细胞上培养传至7代,各代次均产生程度不同的致细胞病变作用,经测定至第6代病毒收获液在犊牛睾丸细胞(BTC)上的致病变作用(CPE)最明显,细胞产毒效价最高可达105.5 EID50/0.2 mL.另外,对7个代次的病毒液进行的安全试验结果表明,该病毒收获液安全有效,符合制苗标准.此试验为用BTC生产鸡痘活疫苗提供了重要依据.  相似文献   

19.
猪瘟E2亚单位疫苗是一种用杆状病毒载体系统表达的猪瘟病毒E2重组蛋白,与油佐剂按比例混合、乳化制成的新型灭活疫苗,可区分感染和接种疫苗动物,有助于猪场的猪瘟净化。为评价该疫苗免疫效力,本研究用猪瘟E2亚单位疫苗与猪瘟兔化弱毒疫苗(传代细胞源)分别免疫靶动物,二免后2 w用强毒人工感染试验动物,连续测温16 d,并记录试验猪临床症状,结合病理剖检、组织器官病毒含量测定结果,比较不同疫苗保护力。结果显示:对照组猪攻毒后体温高热稽留,表现出典型猪瘟症状,攻毒后11 d内5/5发病死亡,尸检剖检呈典型猪瘟病理解剖学变化;免疫猪全部健活,未表现任何猪瘟症状,组织器官剖检无病变。结果表明,猪瘟E2亚单位疫苗与活疫苗保护效力相当,可为靶动物提供可靠的免疫保护效力。  相似文献   

20.
猪瘟病毒能在猪肾细胞和其它一些哺乳动物细胞内增殖。感染性最强的是PK15和ST等几株猪肾和猪睾丸细胞系[1]。本实验室保存的ST细胞株易形成复层,长时间培养形成组织块突起,细胞团易脱落,无法长期连续收获猪瘟病毒。二甲基亚砜(DMSO)不仅可以影响细胞代谢促进蛋白合成[2]而且DMSO对猪瘟病毒囊膜中的脂质和脂蛋白有稳定作用[1]。  相似文献   

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