猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展     

黄海军  彭霞  卢顺  周莉  向敏  陈志华  占才耀  陶弼菲 《畜牧与兽医》2014,(3):110-113

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)给世界养猪业造成了巨大损失。对PRRSV受体的深入研究有助于揭示病毒与宿主细胞的相互关系,明确病毒的入侵机制及其对宿主细胞的影响,帮助人们了解病毒的侵入过程、复制动力学及其一系列在胞内发生的事件;对于揭示病毒感染过程与免疫系统之间的相互作用,阐明细胞病理和组织病理是非常有价值的,也必然会对抗病毒药物和疫苗研发产生巨大的推动作用。  相似文献   

哺乳动物防御素生物学研究进展     

卢顺  向敏  高其双  黄海军  陈志华  周莉  彭霞  占才耀  夏瑜  陶弼菲  华娟  童伟文  王莲芳 《中国兽医杂志》2014,(2):61-64

<正>动物防御素是一类内源性阳离子短肽,广泛分布于包括人类在内的各种哺乳动物体内,具有广谱抗菌活性,又被称为抗菌肽(AMPS)。早在1963年,美国科学家Zeya等人在研究豚鼠白细胞裂解物时就发现该类具有抗菌活性的物质[1]。随后,人们在昆虫、鸟类、鱼类、两栖类、爬行类和哺乳类等动物体内均发现有防御素的存在。到目前为止,已从多种动物和人体内分离出百余种防御素。哺乳动物防御素的抗微生物机理独特,不易产生耐药性,是机体抵抗外来致病性微生物侵袭  相似文献   

利用杆状病毒表达系统表达奶牛触珠蛋白及其单克隆抗体的制备     

向敏  程蕾  胡修忠  余婕  夏瑜  陶弼菲  熊海谦  周源  刘晓华  王定发 《黑龙江畜牧兽医》2019,(15)

为了建立奶牛早期妊娠诊断检测方法,试验用GenBank公布的奶牛触珠蛋白(haptoglobin)Hp基因序列设计引物,扩增出Hp基因全长片段,将Hp基因亚克隆至Bac-to-Bac昆虫/杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBacHTb的多克隆位点中,转入含昆虫杆状病毒骨架质粒的E.coli DH10Bac感受态细胞中,通过蓝白斑筛选获得穿梭质粒rBacmid-Hp阳性克隆,在脂质体介导下转染昆虫细胞sf_9,获得含Hp基因的重组杆状病毒质粒rBacmid-Hp;用纯化的rBacmid-Hp蛋白免疫Balb/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞和鼠SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选杂交瘤细胞;分别用ELISA法、Western-blot检测单克隆抗体腹水效价及特异性。结果表明:在sf_9细胞中成功表达Hp蛋白,该蛋白具有良好的生物学活性;制备了8株单克隆抗体,分别命名为3B_(12)、4F_4、4F_(11)、5D_7、5G_8、7E_5、10C_3和12F_9,腹水效价均在1∶5.12×10~4以上;亚类鉴定显示,除3B_(12)、4F_(11)、10C_3为IgG_(2a)外,其余单克隆抗体均属于IgG_1;筛选出1对配对单克隆抗体,分别为12F_9和4F_(11)。说明Hp蛋白可在Bac-to-Bac昆虫/杆状病毒表达系统中高效表达,并成功筛选出一对配对的高效单克隆抗体。  相似文献   

畜禽排泄物资源化利用及处理模式     

王莲芳  万平民  陶弼菲  代长云  吴建英 《当代畜牧》2018,(8)

近年来,湖北武汉市规模化集约化畜禽养殖产业得到了迅猛发展,在满足人们对肉蛋奶等需求的同时,大量畜禽污染给周围生态环境造成严重影响。规模化集约化畜禽养殖,每天会产生大量废物垃圾,这些畜禽排泄物如果得不到妥善科学的利用,一方面造成资源严重浪费,另一方面对环境造成严重污染。在全新历史时期,需要高度重视畜禽排泄物资源化利用,采用科学合理的处理模式,提高资源利用效率,最终实现畜禽养殖的可持续发展。笔者主要结合实际情况,就畜禽排泄物资源化利用及处理模式进行分析。  相似文献   

siRNA抑制牛子宫内膜上皮细胞Nrf2基因的表达研究     

胡修忠  程蕾  余婕  向敏  夏瑜  陶弼菲  周源  王定发  熊海谦 《中国畜牧兽医》2019,(6)

为探讨核因子E2相关因子(nuclear factor E2 related factor,Nrf2)基因沉默及激活后对牛子宫内膜上皮细胞的影响,本试验利用小分子干扰(siRNA)技术及Nrf2的激动剂叔丁基对苯二酚(tBHQ),分别从Nrf2基因的下调和上调表达来研究Nrf2对牛子宫内膜上皮细胞中血红素加氧酶-1(HO-1)和Homebox A10(HOXA10)基因表达的影响。结果显示,经实时荧光定量PCR方法检测,在设计的2条siRNA序列(siRNA-1209和siRNA-1672)中,siRNA-1672在终浓度为75 nmol/L、作用时间24 h时抑制效果较好,抑制效率在80%以上;经Western blotting方法检测,Nrf2蛋白表达水平在转染后96 h极显著下降(P0.01),而HO-1和HOXA10的mRNA表达量分别下降了60%和70%(P0.01),蛋白表达量在96 h后极显著或显著下降(P0.01;P0.05)。此外,经CCK8方法检测,Nrf2基因表达沉默后,牛子宫内膜上皮细胞增殖能力减弱。而在tBHQ激活Nrf2试验中,经Western blotting方法检测,tBHQ终浓度为30μmol/L时Nrf2蛋白表达量最高,极显著高于对照组(P0.01),且HO-1和HOXA10的蛋白表达量与对照组相比也明显上升。结果表明,本试验设计的siRNA-1672能特异性地抑制牛子宫内膜上皮细胞Nrf2的表达,而抑制Nrf2的表达会导致牛子宫内膜上皮细胞增殖能力下降,且Nrf2对牛子宫内膜上皮细胞HO-1和HOXA10基因表达存在调控作用。  相似文献   

胎羊肾细胞用于增殖H1N1亚型流感病毒的初步研究     

向敏  高其双  陈志华  黄海军  卢顺  彭霞  陶弼菲  占才耀  夏瑜  华娟  童伟文  王莲芳 《动物医学进展》2013,(2):52-55

为研究胎羊肾细胞用于H1N1亚型流感病毒增殖的可能性,采用胰酶消化法从胎羊肾组织中分离肾细胞进行传代培养,并采用间接免疫荧光法检测细胞表面的流感病毒受体,采用直接血凝法测定病毒培养物的血凝价。结果表明,该细胞表面有较丰富的流感病毒受体,且α2,6-Gal受体的含量明显高于犬肾细胞(MDCK);用该细胞培养H1N1亚型流感病毒,其病毒培养物的血凝价达到29～210,略高于MDCK细胞的毒价;该细胞在体外连续传10代,其病毒培养物的血凝价没有明显改变。以上结果初步表明胎羊肾细胞可用于H1N1亚型流感病毒的增殖。  相似文献   

沼肥综合施肥模式对小白菜产量及硝酸盐含量的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

龚余亮  高其双  黄海军  陶弼菲  向敏  陈志华  占才耀 《湖北农业科学》2012,51(15):3201-3203

通过一年3茬小白菜(Brassica chinensis)田间试验,研究了4种不同施肥模式(即不施肥、施纯化肥、化肥和猪粪配合施用(其中化肥N占80％,有机肥N占20％)、化肥和沼肥配合施用(其中化肥N占80％,有机肥N占20％)对小白菜产量及硝酸盐含量的影响.结果表明,与不施肥(对照)相比,20％的沼肥综合施肥模式(即化肥和沼肥配合施用)可极显著提高小白菜的生物学产量,增产(165.13±2.63)％,与其他施肥模式相比,小白菜产量差异不显著;与施用纯化肥相比,极显著地降低了硝酸盐的积累.因此,沼肥综合施肥模式可以在武汉地区的小白菜生产中加以推广应用.  相似文献   

微生态制剂在畜禽生产中的应用研究进展     

金尔光  陈洁  邵志勇  吴利军  何斌  陈夏冰  杨文海  华娟  陶弼菲  夏瑜 《畜牧与饲料科学》2018,39(8):68-68

综述了微生态制剂的概念、主要生理功能及其在提高畜禽生产性能、改善产品品质、防治疾病、增强免疫机能、改善繁殖机能、缓解应激反应、净化养殖环境方面的应用效果，并分析了存在的主要问题与今后的发展方向。  相似文献   

猪PBD-1基因的克隆及其真核表达载体的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

高其双  黄海军  邓兵  董斌科  刘艳  陶弼菲  向敏  吴建英  蒋思文 《中国兽医杂志》2009,45(10)

传统抗生素的广泛使用导致耐药菌株大量产生,特别是多重耐药菌的出现给感染性疾病的治疗带来了许多新的问题,因此寻找和开发无耐药性的新型抗菌药物具有非常重要的现实意义.近年来在生物体内发现的防御素类物质就具有这种特殊的抗菌活性,Ganz T等[1]将其命名为防御素(defensins).  相似文献   

江汉鸡公母分饲效果初探     

陶弼菲  高其双  董斌科  陈志华  王莲芳  吴建英  黄海军 《上海畜牧兽医通讯》2008,(6)

随着家禽产品市场供求关系的变化和城乡人民生活水平的提高，江汉鸡正以其优美的外形、独特的风味、丰富的营养以及无药残、低污染等优点深受消费者青睐。为此，国内畜牧相关部门对江汉鸡的品种资源开发与利用做了大量工作。  相似文献