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采用鸭胚尿囊腔接种、盲传的方法从山东某地区以瘫痪为主要特征的雏鸭脑组织中分离到1株病毒,并对分离病毒的生物学特性和理化特性进行了研究。结果显示,该病毒与OenBank上已发表的坦布苏病毒核苷酸同源性均高于98％,最高可达99．7％;病毒的ELD50为10^-3.17／0．2mL,接种9日龄鸭胚,68h左右鸭胚死亡,胚体出血,肝脏肿大出血,尿囊膜增厚;病毒对胰蛋白酶、酸、氯仿和热敏感,0．5％的胰蛋白酶、pH〈5和4．8％的氯仿条件下可将其灭活,56℃水浴20min或60℃水浴15min可将其灭活,37℃处理24h毒力由10^-3.17／0．2mL下降至10^-1.8／0．2mL;Mg2＋不能提高病毒在50℃60min的稳定性;病毒未经酸碱处理不具有凝集鸡、鸭、鸽等红细胞的特性。接种7日龄雏鸭,48h后陆续发病,表现为病毒性脑炎;剖检变化为雏鸭脑水肿,脑部毛细血管充血、肝脏出血、腺胃出血、肺出血水肿,临床表现与自然发病相同。结果表明,该病毒分离株为坦布苏病毒。 相似文献
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鸭冠状病毒的分离目前国内外尚无报道．我们将回归发病鸭的肠粪及肠内容物处理后，经羊膜腔、尿囊腔接种１２～１４日龄鸭胚，３７℃培养４８小时后取羊水和尿囊液继代，将第５代的鸭胚羊水、尿囊液混合（称ＤＣＶ５）并对其进行系统鉴定，结果表明；该病毒在鸭胚；其ＴＣＩＤ５０为５．０，电镜负染观察多呈不规整的圆形，直径８０～１２０ｎｍ。有囊腹，病毒粒子外周有花瓣样突起。核酸型为ＲＮＡ型，对乙醚敏感、５６℃１５分钟即可使其失去感染性，在ｐＨ３条件下室温３小时仍保持一定活力，该毒接种幼鸭可引起幼鸭腹泻症状，接种幼鸡和火鸡不引起任何症状。 相似文献
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采用鸡减蛋综合征(EDS76)K-11株细胞毒为种毒，通过鸭胚连续盲传5代，使其扩增，收获尿囊液作为基础种子毒。基础种子毒在非免疫健康鸭胚上增殖动态的试验结果表明，EDS76病毒在羊水、尿囊膜(包含羊膜)、尿囊液中含量较高，增殖动态趋于一致；接种病毒后120h为最佳收毒时间，突破了传统的只收集尿囊液作为病毒材料的做法，使收获的病毒材料由原来的每胚5．2ml增加到每胚49．4ml，显著降低了研究费用和制苗成本。确定了0．1％甲醛在20℃条件下48h灭活病毒为最佳灭活方法。成功地研制出尿囊膜、羊膜、羊水、尿囊液四元材料混合的EDS76油乳剂灭活疫苗。此疫苗在甘肃省推广试用80万羽份，安全可靠，免疫持续期长，能有效地预防和控制EDS76的发生和流行。 相似文献
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用新城疫病毒（ＮＤＶ）ＬａＳｏｔａ株,鸡传染性支气为病毒（ＩＢＶ）Ｍ４１株接种鸡胚,收获含毒鸡胚尿液。用传染性法氏囊病病毒地方强毒ＨＢ９０９株接种３０－４０日龄用鸡,发病后取囊组织制备成含毒组织悬液。将三种病毒液按一定比例混合,制备成三联油乳剂灭活苗。 相似文献
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鸭黄病毒病为近年来新发的鸭病,给养鸭业带来了极大的经济损失。为了深入研究本病的防制,本试验对鸭黄病毒(duck flavivirus,DFV)进行了分离鉴定。取疑似感染DFV的病鸭病料,经细菌分离初步排除细菌感染后,应用RT-PCR检测呈现DFV阳性,处理后将其接种到鸭胚成纤维细胞(DEF)和健康鸭胚上进行病毒分离传代。结果显示,在DEF细胞上第1代48 h就开始出现CPE,随着时间的延长CPE更加明显,通常在72~96 h产生典型CPE;接种鸭胚每一代均出现死亡,且死亡时间多集中于接种后60~72 h,死亡鸭胚胚体水肿、出血、发育不良、胚肝严重出血、肿胀或斑驳样坏死等病变。将病毒DEF细胞和鸭胚分离物应用血凝试验、毒价测定、病毒中和试验、RT-PCR及人工感染试验进行检测鉴定,证明所分离到的病毒为DFV,并将其命名为DFV SDbz株。 相似文献
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用分离病毒KM2007株的尿囊液经氯仿,乙醚,甲醛处理后的病毒液接种9日龄鸡胚,并设对照组;病毒液密封于封闭的小试管中,分别置于100℃1min、2min;56℃5mi n、10min、30min、45min和60min,并迅速冷却,按常规处理接种9日龄鸡胚。结果经氯仿,乙醚,甲醛处理过的病毒液接种的鸡胚全部健活,对照组全部死亡,说明分离病毒对氯仿,乙醚,甲醛敏感。病毒热稳定性试验结果显示：100℃1min,2min;56℃45mi n和60min,鸡胚全部存活,血凝价消失;其他组别的鸡胚部分死亡,血凝价下降,说明病毒对热敏感。 相似文献
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鸡新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合征三联油乳剂苗的研制及应用 总被引：1，自引：0，他引：1
用新城疫病毒（克隆H88株。）、传染性支气管炎病毒（JP株和H52株）和减蛋综合征病毒（H91株）分别接种于鸡胚和鸭胚,并收取其含毒鸡、鸭胚尿囊液,用一定浓度甲醛溶液灭活,按一定比例混匀,以7号白油为佐剂制成鸡新城疫（ND）－传染性支气管炎（IB）－减蛋综合征（EDS76）三联油乳剂灭活苗（三联苗）。三联苗免疫30日龄雏鸡,免疫后7天产生免疫应答,免疫后21天保护率达100％。疫苗在4℃～8℃保存期为12个月,10℃～25℃保存期为6月,该疫苗在全省不同地区鸡群应用400余万羽份,取得满意效果。 相似文献
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鸡新城疫,减蛋综合征,传染性支气管炎三联油佐剂灭活苗的研究… 总被引：2，自引：0，他引：2
用新城疫病毒克隆７９株，减蛋综合征病毒ＮＥ４株和传染支气管炎病毒Ｍ１株分别接种于鸡胚和鸭胚，并收取其鸡，鸭胚尿囊液毒，经甲醛灭活，按一定经例配比，以矿物油为佐剂制成三联油佐剂灭活苗。本苗接种于产蛋后备鸡，免疫后７天产生免疫应答，免疫后３０天保护率达９０％－１００％，免疫后六个月攻毒，ＮＤ和ＩＢ保护率１００％，ＥＤＳ７６为９５％。１９９２－１９９４上半年，本苗在江苏，安徽，山东等省的一些鸡场免疫十万 相似文献
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为研究二乙烯亚胺(BEI)对猪伪狂犬病病毒的灭活效果,使用终浓度为0.03%、0.04%和0.05%的BEI在30℃条件下对猪伪狂犬病病毒(DQ株)进行了灭活试验,通过ST传代细胞接种法观察病毒的灭活效果,用2~2.5 kg大耳白兔和断奶仔猪检测BEI灭活后的病毒液所制备疫苗的安全性,用小鼠检测该灭活工艺制备疫苗的免疫效果,并与传统甲醛灭活进行了比较。结果表明,终浓度为0.05%的BEI在30℃情况下经24 h即可彻底灭活PRV病毒;BEI灭活的病毒制备的疫苗接种大耳白兔和猪的安全性良好,免疫小鼠较甲醛灭活病毒能提供更高的保护率。本研究可为猪伪狂犬病灭活疫苗灭活工艺研究提供依据。 相似文献
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将ＮＤＶＤ１０毒株于鸭胚尿囊腔和绒毛膜两个途径接种传代至５０代，分别测定不同代次胚液病毒ＨＡ，ＥＩＤ５０及免疫原性，结果表明该病毒尿囊腔途径接种也可获得较滴度病毒，不同代次病毒液ＨＡ和ＥＩＤ５０都分别在１：２５６和１０＾８．０／０．１ｍｌ以上免疫原性良好，但鸭胚致性随传代数增加而减轻，１２０小时内死亡率仅说明该病毒稳定性良好，该病毒于－２０℃和－５０℃保存期分别达６个月和１２个月，最小免疫剂量≤亡 相似文献
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用传染性支气管炎病毒(IBV)M41株毒种接种11日龄鸡胚,收获感染鸡胚病毒液,将新鲜的病毒液用小型盒式超滤浓缩系统浓缩,然后用高速离心机离心,去上清,沉淀用原病毒液体积1/100的HA缓冲液悬浮,制备出100倍浓缩的IBV病毒液;将100倍浓缩的IBV病毒液中加入15%^20%的A型魏氏梭菌滤液,充分混匀,放37℃恒温振荡器感作2h,取出置2-8℃条件下48 h.制备出了5批IBV M41株HI杭原.检验结果显示:5批HI抗原的性状均为白色混浊液体,底部有少量沉淀;无菌检验为阴性,HA效价为1:128～1:512,5批杭原与IB阳性血清呈阳性反应,HI效价为81og2,而与阴性血清、新城疫阳性血清、H9亚型禽流感阳性血清、H5亚型禽流感阳性血清及产蛋下降综合征阳性血清呈阴性反应,HI效价低于21og2.各项检验结果均符合要求. 相似文献
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本试验旨在探索对牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV HL-2株）敏感的细胞种类及其在相应细胞上的培养特性和培养条件。将IBRV HL-2病毒液接种不同传代细胞，结果表明MDBK细胞对IBRV HL-2株敏感，能产生明显的细胞病变。对各种条件进行优化，结果表明接种时间、接毒量、维持液血清含量、培养基种类均对收获的病毒液病毒含量有影响。通过优化，得出最佳培养条件如下：在细胞传代后24 h接种，弃掉营养液，加入含2%血清的MEM作为维持液，接入0.01感染复数（moi）的病毒液，接种后44±2 h收获，所获得的病毒液病毒含量最高。 相似文献
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用新城疫病毒克隆７９株，减蛋综合征病毒ＮＥ＿４株和传染性支气管炎病毒Ｍ＿（４１）株分别接种于鸡胚和鸭胚，并收取其鸡、鸭胚尿囊液毒，经甲醛灭活，按一定比例配比，以矿物油为佐剂制成三联油佐剂灭活苗。本苗接种于产蛋后备鸡，免疫后７天产生免疫应答，免疫后３０天保护率达９０％～１００％，免疫后六个月攻毒，ＮＤ和ＩＢ保护宰为１００％，ＥＤＳ＿（７６）为９５％。１９９２～１９９４上半年，本苗在江苏、安徽、山东等省的一些鸡场免疫十万余只鸡，均获得满意效果。 相似文献
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番鸭新病--花肝病的研究Ⅱ分离毒的致弱及灭活苗的保护试验 总被引：2，自引：0，他引：2
文章通过试验找出能适合于花肝病分离毒生长和繁殖的胚 ,并检测了自制灭活苗对雏番鸭的保护作用。将病料匀浆液接种到番鸭胚、鸭胚和鸡胚上分离病毒 ,并作病毒适应性试验 ,检测继代病毒对雏番鸭的致病性 ;制备了普通灭活苗、油佐剂灭活苗、左旋咪唑灭活苗 ,并分别进行了几种灭活苗的保护试验。结果表明 :分离毒在番鸭胚上能较好地适应并继代 ,随着代次增加 ,其毒力逐步下降 ;灭活疫苗对雏番鸭的保护试验表明 ,灭活疫苗有一定的保护作用 ,但距应用于生产实际仍有一定距离 相似文献
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从辽宁省某猪场大批死亡的新生仔猪脑及内脏中分离到多株病毒，通过初步验证后选择其中一代表毒株进行了鉴定。该病毒株在PK-15细胞上连续传12代均出现典型的细胞病变，用适应PK-15细胞的病毒接种Veto细胞、猪肾传代细胞IBRS-2及SPF鸡胚成纤维细胞均出现典型的细胞病变。在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子。该病毒对氯仿、乙醚敏感，在pH5．0-9．0下稳定，56℃30分钟即可灭活该病毒。该病毒能被伪狂犬病病毒标准阳性．血清中和。取处理后的病料上清液和传代病毒接种家兔均出现典型的伪狂犬病症状。用所分离病毒提取的DNA及培养病毒液经简单的预处理后作为模板，应用特异性引物进行PCR能扩增出伪狂犬病病毒1240bp的gD基因的特异性片段。结果表明，所分离病毒为伪狂犬病病毒，并将该毒株命名为猪伪狂犬病病毒IA株。 相似文献
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为比较不同保存方式对鸡减蛋综合征灭活抗原的影响,采用禽腺病毒京911株(CVCC AV70)经尿囊腔接种易感鸭胚,收获感染鸭胚液,经β-丙内酯灭活后,对该抗原的保存条件及其稳定性等方面进行优化。冻干抗原与未冻干抗原在相同温度下,冻干抗原HA效价下降较慢。冻干抗原在2~8℃和-15℃以下保存,HA效价没有明显差异。因此,生产的鸡减蛋综合征灭活抗原要在冻干后保存在2~8℃最佳。保存条件的优化不仅可以减少经济损失,而且还有助于更好的控制禽腺病毒疫情的暴发。 相似文献
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1病原学
病原为鸭瘟病毒,属于疱疹病毒属中的滤过性的病毒.病毒在病鸭体内分散于各种内脏器官、血液、分泌物和排泄物中,其中以肝、肺、脑含毒量最高.本病毒对禽类和哺乳动物的红细胞没有凝集现象,毒株间在毒力上有差异,但免疫原性相似.病毒能在9～12胚龄的鸭胚绒毛尿囊上生长,初次分离时,多数鸭胚在接种后5～9天死亡,继代后可提前在4～6天死亡.此病毒也能适应于鹅胚,但不能直接适应于鸡胚.只有在鸭胚或鹅胚中继代后,再转入鸡胚中,才能生长繁殖,并致死鸡胚.此外病毒还能在鸭胚、鹅胚和鸡胚成纤维单层细胞上生长,并可引起细胞病变,最初几代病变不明显,但继代几次后,可在接种后的24～40小时出现明显的病变,细胞透明度下降,胞浆颗粒增多、浓缩,细胞变圆,最后脱落.经过鸡胚或细胞连续传代到一定代次后,可减弱病毒对鸭的致病力,但保持有免疫原性.病毒对外界抵抗力不强,温热和一般消毒剂能很快将其杀死;夏季在直接阳光照射下,9小时毒力消失;病毒在56℃环境10分钟即可将其杀死;在污染的禽舍内(4～20℃)可存活5天;对低温抵抗力较强在零下5～7℃经3个月毒力不减弱,对乙醚和氯仿敏感,5％生石灰溶液作用30分钟亦可灭活.在零下10～20℃约经1年仍有致病力. 相似文献