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1.
采用考马斯亮蓝(R250)染色法和低渗膨胀试验(HOST试验)检测精子顶体反应和质膜完整性,以检测和评价这2种方法在猪精液质量检测中的实际应用价值。结果表明,冷冻复苏后,精子活率为37.97%,精子平均速度为55.72μm/s,顶体完整率和质膜完整率分别为51.01%和39.95%。经相关性分析得出,猪精子顶体反应率和质膜完整性与精子活率相关系数为0.904 0和0.817 6,呈显著相关(P〈0.01),而精子的平均游动速度与顶体反应率和质膜完整性相关系数为-0.056 2和-0.151 8,无明显相关性(P〉0.05),精子活率与精子平均游动速度间也无明显相关性(P〉0.05)。  相似文献   

2.
实验旨在研究不同精子迁移率对鹅群繁殖效率的影响,选择体况健康、发育良好同批次的24月龄种公鹅、体重变异范围为3.70~4.60 kg的30只公鹅单笼饲养,连续5次采精,测定鹅的精子迁移率,同时测定精液质量性状和精子运动参数。将30只公鹅精子迁移率按照由高到低排序,并依据高与低迁移率组之间至少相差一个标准差原则分出高、低2组,每组6只,与母鹅按(1:5)的比例混群。收集种蛋(高精子迁移率组206枚,低精子迁移率组167枚)并孵化。采用分子遗传标记进行亲子鉴定,计算每只公鹅的后代数,比较高、低迁移率组公鹅的遗传贡献率(GCR)差异。结果表明:精子迁移率与精子活力、活率、密度呈正相关(P<0.01),与畸形率呈负相关(P<0.01);精子迁移率与运动参数中平均路径速度、直线运动速度、曲线运动速度、前向性呈正相关(P<0.01),与直线性、鞭打频率呈正相关(P<0.05),与侧摆幅度、平均移动角度呈负相关(P>0.05)。高、低精子迁移率组精子迁移率分别为0.37和0.12 absorbance(P<0.01),受精率分别为93.69%和84.46%(P&l...  相似文献   

3.
[目的] 探讨是否可以通过补充海藻糖来降低冷冻保护剂中甘油的浓度,从而提高冻融精子的质量。[方法] 分别用6%甘油(Ⅰ组)及3%甘油+0、50、100和150 mmol/L海藻糖(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组)处理精子,用精子-微生物动(静)态图像检测分析系统(CASA)检测冻融精子的活力、质膜完整性和顶体完整性及动力学相关参数,筛选出最佳海藻糖处理浓度用于后续试验。通过Western blotting方法检测精子蛋白酪氨酸磷酸化水平评价精子获能状态,Hoechst 33342/PI/JC-1联合染色法检测精子的活率及线粒体膜电位,色霉素A3(CMA3)染色法检测精子DNA的完整性,部花青540(M540)和Yo-Pro-1染色检测精子膜脂质紊乱水平。[结果] 与Ⅰ组相比,Ⅱ组精子的活力、质膜完整性、顶体完整性以及曲线速度(VCL)和直线率(STR)均显著下降(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组组精子的活力、VCL、直线速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、直线性运动(LIN)和STR均显著升高(P<0.05)。因此,后续试验选用100 mmol/L海藻糖处理精子。与新鲜精子相比,冻融精子获能后其蛋白酪氨酸磷酸化的条带显著减少(P<0.05),冻融精子的活率和线粒体膜电位均显著降低(P<0.05);冻融活精子和死精子的高度膜脂质紊乱水平均显著升高(P<0.05),100 mmol/L海藻糖可显著降低高度膜脂质紊乱水平(P<0.05);冻融精子的鱼精蛋白缺失率显著增加(P<0.05),且Ⅱ组和100 mmol/L海藻糖组精子的鱼精蛋白缺失率显著低于Ⅰ组(P<0.05)。[结论] 海藻糖可作为一种新型冷冻保护剂降低甘油毒性,用100 mmol/L海藻糖替代部分甘油可显著改善延边黄牛冻融精子的质量。  相似文献   

4.
本试验旨在探索用谷氨酰胺(Gln)替代部分甘油对冻融猪精子体外获能和受精能力的影响,试验分为6组:3%甘油对照组和5个处理组(Ⅰ~Ⅴ组:2%甘油+谷氨酰胺(0、20、40、80和100 mmol/L))。对冻融松辽黑猪精子的精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位、鱼精蛋白水平、获能及体外受精等指标进行了检测。结果显示,用谷氨酰胺替代部分甘油均对冻融精子质量有一定的改善作用,改善的程度受谷氨酰胺浓度的影响。与对照组相比,Ⅰ组精子的质量参数均显著下降(P<0.05);与Ⅰ组相比,Ⅱ组精子活力、顶体完整性和活率显著提高(P<0.05),Ⅲ组精子线粒体膜电位显著提高(P<0.05),Ⅴ组精子活力、质膜完整性、顶体完整性、活率和线粒体膜电位均显著提高(P<0.05)。说明用谷氨酰胺替代部分甘油对精子质量具有很大的影响,且当谷氨酰胺为100 mmol/L时可得到更高质量的精子,因此,后续试验使用浓度为100 mmol/L的谷氨酰胺进行研究。与对照组相比,2%甘油+100 mmol/L谷氨酰胺处理组精子鱼精蛋白缺失率显著下降(P<0.05),精子获能无显著差异(P>0.05),但胚胎卵裂率显著提高(P<0.05)。综上所述,谷氨酰胺可作为一种新型冷冻保护剂替代部分甘油来提高猪精液的质量,并降低甘油对猪精液的毒性作用,为猪精液的冷冻保存及商业化生产提供技术支撑。  相似文献   

5.
试验旨在探究公猪精液冷冻保存对其精子功能的影响。取长白猪的鲜精和优质冻精,用精子分析仪检测精子的运动能力,台盼蓝染色检测精子活率,体外受精(IVF)试验检测卵裂率与囊胚率,采用不同功能检测试剂盒检测冻精和鲜精的顶体完整率、线粒体膜通道孔(MPTP)活性、线粒体膜电位(MMP)、线粒体活性、线粒体氧化应激活性氧(ROS)以及精子DNA完整性,实时荧光定量PCR检测弱精子症相关蛋白基因SMCPTEKT3、DNAH1、TCTE3的表达。结果表明,与猪鲜精相比,猪冻精的活率及活力均显著降低(P<0.05),冻精的顶体完整率也明显下降(P<0.05);冻精的卵裂率和囊胚率显著低于鲜精(P<0.05);精子线粒体功能分析结果显示,冻精的MPTP相对荧光单位值(RFU)、线粒体膜电位荧光比率以及线粒体活性光密度(OD)值均显著低于鲜精(P<0.05);精子线粒体ROS检测发现,冻精的RFU值显著高于鲜精(P<0.05);精子DNA完整性检测结果显示,冻精拖尾率显著高于鲜精(P<0.05);而弱精子症相关蛋白基因的表达与鲜精相比,差异不显著(P>0.05)。综上所述,冷冻导致猪精子活率、活力、线粒体功能、DNA完整性下降,最终使得冷冻精液精子的受精能力降低。  相似文献   

6.
为比较哈多利系博美犬老龄与青年阶段睾丸的组织结构差异及相关蛋白分布特征,探索博美犬不同年龄阶段睾丸组织结构变化及其对生殖功能的影响,本试验应用特殊染色、免疫组织化学法结合免疫荧光观察比较青年与老龄博美犬睾丸组织化学特点,并用IPP图像分析软件进行定量分析。结果显示,与青年博美犬相比,老龄博美犬生精上皮层数与厚度降低,Leydig细胞数及Sertoli细胞数显著增加(P<0.05),生精小管基底膜及血管管壁层胶原纤维与网状纤维含量明显增加。免疫组织化学结果显示,老龄博美犬睾丸细胞外基质(exreacellular matrix,ECM)相关蛋白Ⅳ型胶原(collage,Col Ⅳ)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycan,HSPG)含量极显著低于青年博美犬(P<0.01),层黏连蛋白(laminin,LN)含量显著低于青年博美犬(P<0.05)。免疫荧光结果显示,Col Ⅳ、HSPG和LN主要在Leydig细胞及Sertoli细胞强表达。因此,老龄博美犬胶原纤维与网状纤维含量增加,Leydig细胞数及Sertoli细胞数增多可能与其生精功能的维持相关,其生精功能的下降与Col Ⅳ和HSPG的变化密切相关。  相似文献   

7.
本研究旨在通过对意大利水牛精液品质分析、睾丸周径测量、精浆中的氧化应激水平检测和精子活力相关基因表达情况来探究影响精液质量的相关因素。试验检测了6头意大利水牛精液的活力、畸形率、采精量,并在测量其阴囊周径后进行相关性分析;检测了意大利水牛精浆中氧化应激水平指标(丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px))并进行了相关性分析;分析了意大利水牛精子β-微管蛋白-2c(TUBB2C)、外周致密纤维2(ODF2)、筑丝蛋白2(TEKT2)、筑丝蛋白4(TEKT4)基因的表达定量及相关性。结果显示,意大利水牛阴囊周径与精液产量、活力、畸形率之间相关系数分别为0.423(P>0.05)、0.750(P<0.01)、-0.827(P<0.01),即阴囊周径与精子活力呈显著正相关关系、与畸形率呈显著负相关关系;意大利水牛精子活力与MDA、T-SOD、GSH-Px指标之间相关系数分别为-0.522(P<0.05)、0.333(P>0.05)、0.474(P<0.05),即精子活力与MDA含量之间存在显著负相关关系,与GSH-Px活性之间存在显著正相关关系,与T-SOD活性相关性不显著;意大利水牛精子活力与TUBB2CODF2、TEKT2、TEKT4基因指标之间相关系数分别为0.930(P<0.01)、0.726(P<0.01)、0.924(P<0.01)、0.839(P<0.01),即精子活力与以上基因表达量存在显著正相关关系。本研究结果为了解影响意大利水牛精液质量的因素提供参考,也为意大利种公水牛的筛选提供理论依据。  相似文献   

8.
紧密连接(Tight junction,TJ)蛋白是一类构成细胞紧密连接结构的蛋白,主要包括跨膜蛋白和闭合小环蛋白(ZOs),它们共同参与TJ的组成并发挥功能。TJ蛋白在肠道组织中表达广泛,在肠道机械屏障中发挥重要作用。文章通过对国内外报道进行梳理,在了解TJ蛋白结构与功能的基础上,分析影响TJ蛋白异常表达的因素,并基于TJ蛋白途径探究调控鱼类肠道损伤的策略,以期为调控鱼类等水产动物肠道健康提供参考。  相似文献   

9.
猪精子体外获能后其质膜完整性的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
精子质膜功能和结构的完整性对于精子的受精能力十分重要。常规检测,例如曙红染色仅能检测质膜的结构完整性,不能评价质膜的功能性。早在1966年,Dreviuslo等曾描述过哺乳动物精子弯尾(Tailcoiling)现象。低渗肿胀检测(Hypoosmotic swelling test,HOST),最初被用于检测人的精子,也被应用于其他动物,例如猪、火鸡、马、牛等。这种方法能够检测精子质膜的功能状态。HOST的原理是精子质膜能够有选择地运输分子。当被放置到低渗条件下时,水会进入精子内部,并要达到一个平衡,这种内流的水会使精子体积增大、顶体肿胀、尾部弯曲。尾部弯曲这—特征比较明显,因此弯尾率可以作为评价精子质膜完整的标志。  相似文献   

10.
比较观察同年龄(2岁)双峰驼(Camelus bactrianous)正常睾丸与隐睾的显微及超微结构特点。采用光镜和电镜制片及组织化学染色技术,比较双峰驼隐睾与正常睾丸的组织结构特点,进而用IPP图像分析软件进行定量分析。结果:光镜下双峰驼隐睾生精上皮由1~3层细胞组成,生精小管平均直径显著减小(P0.05),间质组织面积极显著增加(P0.01),间质/管腔面积比较正常组极显著增大(P0.01)。电镜观察,双峰驼正常睾丸生精小管固有膜层发育良好,相邻Sertoli细胞之间形成典型连接复合体;生精细胞之间多处形成细胞间小管和桥粒结构。隐睾生精上皮基膜增生明显,其上半桥粒结构不清晰,发育不成熟的Sertoli细胞相邻细胞膜间存在不完全的桥粒结构,可见相邻精母细胞间的胞质桥及Sertoli细胞与初级精母细胞之间桥粒连接;双峰驼正常睾丸Leydig细胞内滑面型内质网和粗面型内质网相延续;隐睾Leydig细胞形态不规则,胞内肿胀线粒体数量较多,内质网不发达;隐睾间质毛细血管基膜不清晰;血管内皮细胞之间可见缝隙连接。双峰驼隐睾生精小管组织结构主要变化为Sertoli细胞异常分化及精子发育阻滞;隐睾Sertoli细胞多为幼稚型,其与基膜连接的改变以及Sertoli细胞外质特化区形态结构及桥粒结构不完整影响了血-睾屏障构成;Leydig细胞内质网发育不均衡为其分泌功能与机体发育阶段关系研究提供思路。  相似文献   

11.
冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
研究冷冻保存前平衡温度对精子结构的影响,为提高猪精子冷冻效果提供参考。新鲜猪精液(Ⅰ组)稀释后于17℃过夜保存(Ⅱ组),然后于冷冻Ⅰ液中4℃平衡1.5h(Ⅲ组),再加入预冷的冷冻Ⅱ液于4℃平衡45min(Ⅳ组)。通过精子形态正常率及活力检测,吖啶橙(AO)染色检测精子DNA完整性,碘化丙啶(PI)染色检测精子头部质膜完整性,低渗肿胀试验(HOS)检测精子尾部质膜完整性,异硫氰荧光素标记的花生凝集素(FITC-PNA)染色检测精子顶体完整性,并用扫描电镜(SEM)观察精子结构,评价冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响。结果表明,与新鲜精液相比,Ⅱ组精液的精子DNA完整性、质膜完整性、顶体完整性等精子结构检测指标所受影响无统计学意义(P0.05);Ⅲ组和Ⅳ组的精子结构检测指标明显受到影响(P0.05),但Ⅲ组和Ⅳ组间无显著差异(P0.05)。扫描电镜检测结果表明,17℃过夜保存精子未见异常,头、颈、尾结构完整,顶体完整、光滑;Ⅲ组精子头部质膜及头颈结合部有轻微损伤;Ⅳ组精子尾部和头颈结合部有不同程度的断裂。冷冻前从17℃降低至4℃及4℃平衡对猪精子结构有一定程度的损伤。  相似文献   

12.
旨在研究性激素受体[雄激素受体(androgen receptor,AR)、雌激素受体(estrogen receptor,ER)]在子午岭黑山羊正常睾丸与隐睾组织中的分布与隐睾症的关系,应用免疫组织化学及免疫荧光技术方法结合形态计量学统计软件,比较了正常睾丸与隐睾的组织化学特点。特殊染色结果显示:与正常组相比,隐睾组间质组织疏松,管腔面积明显减小,糖原含量明显减少,胶原纤维及网状纤维含量增多。免疫组化及免疫荧光结果显示:1) AR在正常睾丸组Leydig细胞呈高密度强阳性表达,在各级生精细胞呈中等强度阳性表达,隐睾组中Leydig细胞及各级生精细胞表达明显减弱,且在精原细胞偶见表达;2) ER在正常睾丸Leydig细胞呈高密度强阳性表达,管周肌样细胞呈中等强度阳性表达,Sertoli细胞偶见表达,各级生精细胞无表达;3) ER在隐睾Leydig细胞、初级精母细胞、精原细胞和Sertoli细胞中均呈中等强度阳性表达;4)统计结果显示,隐睾组AR的平均光密度较正常组显著降低(P<0.05),而ER的平均光密度则显著高于正常组(P<0.01),且隐睾组AR与ER表达量比值基本接近1:1。子午岭黑山羊隐睾组织胶原纤维和网状纤维分布较正常睾丸多,生精小管基膜主要成分以中性糖蛋白为主,酸性糖蛋白含量明显降低影响精子的正常形成;隐睾组织精原细胞及Sertoli细胞ER与AR表达失常尤为明显,可为哺乳动物隐睾的相关研究提供一定参考。  相似文献   

13.
利用50 mmol的NaOH溶液分别处理牛精子30 min和1 h,显微镜下发现处理30 min精子尾部缩短1/3,处理1 h精子尾完全消失,仅留精子头。为了比较2种不同结构精子对胚胎发育的影响,对2组不同结构精子分别实施单精子注射,比较2组精子对胚胎发育的影响,通过差异染色比较胚胎发育质量,以制动精子作为对照。结果表明:①精子头组操作成功率高于缩尾精子组(P>0.05)和制动精子组(P<0.05);②缩尾精子组的卵裂率显著高于精子头组(P<0.05)和制动精子组(P<0.05),且桑囊率也显著高于制动精子组(P<0.05);③差异染色表明,缩尾精子组胚胎的细胞数和制动精子组胚胎的细胞数均显著高于精子头组(P<0.05)。因此,利用50 mmol的NaOH处理牛精子30 min,选择缩尾精子实施单精子注射,能提高胚胎操作效率和胚胎发育质量。  相似文献   

14.
试验旨在分析肽能神经递质蛋白基因产物9.5(protein gene product 9.5,PGP9.5)和神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)在犬隐睾及睾丸肿瘤中的分布和表达,并与同年龄正常睾丸组织进行比较,为认识犬睾丸肿瘤恶变临床诊断提供参考。应用HE染色、Masson三色染色、Gomori银浸染、甲苯胺蓝染色观察各组织中网状纤维、胶原纤维及肥大细胞等组织特征,采用免疫组织化学SP法及免疫荧光法结合IPP统计分析PGP9.5和NPY在组织中的表达及定位。结果显示,正常犬睾丸生精上皮由4~7层生精细胞及Sertoli细胞构成,间质组织胶原纤维和网状纤维分布稀疏。隐睾生精小管基底膜胶原纤维厚度增加,Sertoli细胞核浓缩位于生精小管基底,间质网状纤维增多。睾丸肿瘤组织结构不清晰,胶原纤维和网状纤维无规则分布,肥大细胞较正常组及隐睾组显著增多。免疫荧光定位表明,PGP9.5在正常睾丸Leydig细胞中呈中等阳性表达,生精细胞中无明显表达;隐睾Leydig细胞及生精细胞中呈强阳性表达;睾丸肿瘤中偶有表达。NPY在正常睾丸Leydig细胞中偶见阳性表达,生精细胞中无表达;隐睾Leydig细胞及生精上皮中无表达,间质小血管管壁呈高密度强阳性表达;睾丸肿瘤组织中无明显表达。免疫组化统计表明,睾丸肿瘤组织中PGP9.5和NPY较正常组极显著降低(P<0.01),隐睾组PGP9.5和NPY表达显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01)。因此,犬隐睾时PGP9.5及NPY的表达增高,提示犬隐睾时已有发展为肿瘤的趋势,且与肿瘤恶变程度相关。  相似文献   

15.
探讨高原老龄牦牛睾丸组织结构特点与其生殖机能的关系。采集9~13岁健康老龄牦牛睾丸组织,应用组织化学染色和透射电镜技术,观察其细胞化学特点及结构特征。结果显示,老龄牦牛睾丸体积及重量左侧略大于右侧,光镜下睾丸被膜、间质组织胶原纤维及网状纤维丰富,小叶不明显,Leydig细胞散在于结缔组织之间,生精小管不同程度退化,生精上皮层数为2~5层,细胞间隙变大,部分脱落,Sertoli细胞低矮,细胞质较少。电镜观察Sertoli细胞核外形不规则,内质网呈疏松的泡状,次级溶酶体增加,体积增大。相邻Sertoli细胞间没有观察到并行的内质网层和细丝束这一血-睾屏障所特有外质特化区形态结构,部分生精小管固有膜胶原纤维增生,上皮皱缩;Leydig细胞内脂滴异常丰富,毛细血管内皮细胞间存在紧密连接。间质组织偶有肥大细胞,间质血管及生精小管固有膜中PAS及AB-PAS阳性反应明显。老龄牦牛Sertoli细胞细胞器结构异常,血-睾屏障中Sertoli细胞间的连接处缺陷,且Sertoli细胞与基膜连接的改变可能影响了Sertoli细胞和生精细胞之间的相互作用,进而抑制了生精细胞的功能。  相似文献   

16.
对和田羊精液进行冷冻保存,以比较冷冻对和田羊精子获能、质膜完整性和顶体完整率的影响。结果表明:①冷冻保存对绵羊精子获能有一定的影响,解冻精子的获能比新鲜精子的获能数量显著增多(P〈O.05)。解冻过程使得显示获能的B型精子的数量显著增加(P〈0.05)。②冷冻使精子质膜破损,致使解冻精子无论是在质膜完整性还是在顸体完整率上都与新鲜精子存在较大差异,说明冷冻过程对精子膜结构造成了严重损伤。  相似文献   

17.
本实验旨在探究鸟苷酸交换因子15(ARHGEF15)基因在小鼠睾丸中的表达模式及其对精子发生的影响,本研究通过免疫组化和免疫荧光双染色实验检测ARHGEF15蛋白在5日龄和成年(8~9周龄)小鼠睾丸中的表达模式,并利用Cre-LoxP系统特异性敲除小鼠生精细胞内的ARHGEF15基因。结果显示:在5日龄小鼠睾丸中,ARHGEF15蛋白主要表达于精原细胞的细胞质和/或细胞膜,在成年小鼠睾丸中ARHGEF15蛋白主要定位于支持细胞的细胞核;条件性敲除(cKO)组小鼠睾丸的形态大小、组织学结构、精子的运动性能及形态与对照组相比无显著差异,且cKO组小鼠的繁育力也不受影响。因此,ARHGEF15基因主要在发育早期小鼠睾丸的生精细胞中表达,敲除生精细胞内的ARHGEF15基因不影响小鼠的繁殖能力和精子发生。  相似文献   

18.
本实验旨在探究还原型谷胱甘肽(GSH)对西门塔尔牛精液低温保存(0℃)的影响。在精液稀释液中分别添加0(对照组)、1、2、4、6 mmol/L的GSH,在0℃条件下保存24、72、120、168、216 h时检测精子活力、顶体完整率和质膜完整性等指标;保存72 h和168 h时检测精子的丙二醛(MDA)水平、三磷酸腺苷(ATP)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明:在精液低温保存72 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组(P<0.05);在精液低温保存168 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组与其他GSH添加组(P<0.05),MDA水平低于其他组(P<0.05)。因此,在本实验条件下,在精液稀释液中添加4 mmol/L GSH可以有效提高精液品质和精子的抗氧化能力,延长精子的保存时间。  相似文献   

19.
实验旨在探究不同浓度的Mito-tempo对绵羊精液低温保存效果的影响。采集8只湖羊种公羊精液,分别用含0、15、30、45、60μmol/L Mito-tempo稀释液进行8倍稀释,5℃冷藏120 h。分别在24 h和120 h检测精液品质指标(活力、活率、平均路径速度、曲线运动速度、直线运动速度、质膜完整性、顶体完整性、DNA完整性和线粒体活性)及抗氧化指标(总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量)。结果表明:在低温保存期间,30μmol/L Mito-tempo处理组精子活力、活率、平均路径速度、DNA完整性、顶体完整性、线粒体活性、超氧化物歧化酶含量和总抗氧化能力均高于对照组及60μmol/L Mito-tempo处理组(P<0.05);在低温保存过程中,30μmol/L Mito-tempo处理组丙二醛含量低于对照组和其余各试验组(P<0.05)。由此可见,在稀释液中添加30μmol/L Mito-tempo可有效提高低温保存后绵羊精液质量。  相似文献   

20.
【目的】 探究冷冻前添加热休克蛋白A8(heat shock protein A8, HSPA8)和解冻后添加不同浓度精浆(seminal plasma, SP)对冻融猪精子的影响。【方法】 采用手握法采集长白猪精液, 添加0.5 μg/mL HSPA8到猪精液冷冻保护剂中进行细管分装, 投入液氮中保存3周后进行解冻, 解冻后添加不同浓度精浆(0、10%、30%和50%), 对冻融后长白猪精子的运动能力、质膜完整性、顶体完整性、细胞凋亡、线粒体膜电位、鱼精蛋白缺乏及体外获能水平等进行评估。【结果】 与对照组相比(无HSPA8和精浆), 添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)的精子直线速度(VSL)、曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)和前向性运动(STR)均显著提升(P<0.05), 精子直线性运动(LIN)和运动的摆动性(WOB)均无显著差异(P>0.05);精子质量参数中活力、质膜完整性和顶体完整性均显著升高(P<0.05), 细胞凋亡水平与线粒体膜电位均显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。之后在解冻液中添加不同浓度的精浆, 与添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)相比, 精浆添加量达到50%时, 精子VSL、VCL、VAP、LIN、STR和WOB均显著提升(P<0.05);精子活力、质膜完整性、顶体完整性和线粒体膜电位均显著提高(P<0.05), 细胞凋亡水平显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。【结论】 在冷冻基础液中添加0.5 μg/mL HSPA8和解冻稀释液中添加50%精浆联合使用可以有效改善冻融精子质量, 将会对猪精液的冷冻保存及商业化生产提供一定的参考。  相似文献   

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