农杆菌介导短柄草遗传转化体系的建立     

刘丹  蔡高磊  张立  王建锋  康振生  韩德俊 《麦类作物学报》2011,31(4):598-603

为了探索短柄草的遗传转化体系,以二倍体短柄草ABR 6为受体材料,通过对诱导培养基类型、潮霉素筛选浓度和根癌农杆菌侵染浓度等参数的优化,建立了农杆菌介导短柄草遗传转化体系。结果表明,来源于未成熟胚的胚性愈伤组织在LS培养基上诱导率最高,达76.27%,最佳Hpt筛选浓度为40 mg·L^-1,最佳农杆菌侵染浓度为OD₆₀₀=0.6,在此条件下ABR 6的转化效率可达5%;通过PCR检测12株抗性植株,发现7株能扩增出Hpt基因（845 bp）条带;通过荧光显微镜观察转基因植株叶片,发现绿色荧光蛋白的表达,进一步证实了转基因植株的可靠性。  相似文献   

用气相色谱法测定食用菌中的农药残留     

张晓艳  孙敏杰  刘丹  温健 《北京农业》2011,(18)

食用茵是一种营养丰富兼有食疗价值的食品,它有利于人体各种生理机能的调节,由于食用茵大量生产依赖于人工栽培,在生产过程中可能受到农药污染.因此.食用茵中农药残留限量(MRL)超标问题目益受到国内外的重视.  相似文献   

条锈菌诱导的小麦TaOZR的克隆及特征分析     

蔡高磊  王晓杰  刘丹  邓麟  刘新颖  汤春蕾  赵杰  魏国荣  黄丽丽  康振生 《中国农业科学》2010,43(12):2403-2409

【目的】克隆受条锈菌诱导的小麦OZR,研究其在小麦抗条锈病防御反应及非生物胁迫过程中的作用。【方法】通过电子克隆及RT-PCR方法,从条锈菌侵染的小麦水源11中分离出1个编码OZR的cDNA序列。利用生物信息学对cDNA序列及其编码的蛋白序列进行分析;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析该基因在小麦与条锈菌互作、外源激素处理以及非生物胁迫下的诱导表达情况。【结果】获得小麦OZR,命名为TaOZR。其ORF长240 bp,编码79个氨基酸;蛋白序列理论分子量8.67 kD,等电点9.34;具有信号肽和跨膜区,可能为分泌蛋白;与水稻OZR相似性达76%;TaOZR受条锈菌诱导后在亲和互作中差异不显著,在非亲和互作中诱导表达;外源植物激素水杨酸、乙烯、脱落酸、茉莉酸均诱导TaOZR的积累并上调表达;低温、干旱、高盐非生物胁迫下TaOZR表达差异不显著。【结论】首次克隆到一个条锈菌诱导的小麦TaOZR,TaOZR可能通过水杨酸、乙烯、脱落酸和茉莉酸信号途径协同参与小麦对条锈菌的早期防御。  相似文献   

播期和密度对免耕直播油菜生长及产量的影响   总被引：9，自引：0，他引：9  

马霓  张春雷  李俊  余利平  刘丹  李光明 《湖北农业科学》2010,49(7)

采用免耕直播的方法,研究了不同播期和密度对油菜生长、冻害情况及产量的影响。结果表明,播期推迟,越冬期油菜苗高、绿叶数、叶面积指数、根颈粗、开展度、地上和地下部分干重逐渐下降,冻害指数增加,全生育期缩短,产量降低;密度增加,除了叶面积指数逐渐增大,其他生物学性状指标降低,冻害指数增加,单株有效角果数、每角粒数、千粒重和单株产量呈下降的趋势,密度为31.5万～36.0万株/hm2产量较高。  相似文献   

广州白云山几种林分修复模式下凋落物跳虫群落的特征   总被引：1，自引：0，他引：1  

佟富春  陈步峰  谢正生  李丹红  刘丹  夏卫  刘雨翘  夏玉婷  谢嘉华 《东北林业大学学报》2010,38(4)

依据2008年1月—11月在白云山不同修复模式示范林样地中采集的凋落物跳虫群落数据,应用类群数、个体密度和多样性指数等群落参数,研究了白云山6种修复模式示范林凋落物层土壤跳虫群落特征的差异。共捕获土壤跳虫4814头,隶属于12科36属。结果表明:与其他修复模式相比,马尾松间伐芳香树种修复试验示范林和马占相思林进行乡土树种修复试验示范林能改善土壤理化性质和跳虫群落环境,提高跳虫类群数、个体密度和多样性;相对而言,马尾松间伐芳香树种修复试验示范林更能显著提高跳虫类群数和个体密度,生物多样性更高,物种更丰富。  相似文献   

人工喂养幼虎体内细小病毒的分离与序列分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

刘丹  高玉伟  杨松涛  王立刚  王淑君  侯小强  刘玉秀  王伟  周明  夏咸柱 《安徽农业科学》2010,38(15):7855-7856,7877

[目的]鉴定人工喂养幼虎的病原及其序列特征。[方法]应用FPV特异引物对8只哈尔滨虎园人工喂养幼虎的肺组织进行PCR检测,应用猫肾细胞（F81）细胞对PCR检测阳性样品进行病毒分离,并进行序列分析。[结果]从8份样品中均扩增到761bp的核酸片段。进而应用F81细胞从其中的1份样品中分离获得1株猫细小病毒。VP2序列分析表明,该病毒与此前在该虎园分离获得的虎源猫细小病毒同源性高达99.8%。[结论]猫细小病毒对未接受母乳喂养的幼虎威胁严重,应加强对人工喂养幼虎的被动免疫预防。  相似文献   

奶制品安全问题现状及常见检测技术     

马元元  刘丹  吴娟  徐飞 《兽医导刊》2010,(7):49-50,56

牛奶是一种营养丰富,便利实惠,受人们喜爱的食品。牛奶的人均占有量可反映一个国家的生活质量和人民健康水平。但是,当人们喝下一杯牛奶时,有可能把残留在牛奶中的药物和添加剂也喝进去。虽然各级政府高度重视食品安全,并且食品生产企业的自我保障意识与产品质量检测能力也在不断地加强,但是,人们对奶类产品的质量安全还处在仅重视实验室检测投入,  相似文献   

羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因在杆状病毒中的串联表达     

于琳琳    贾红  侯绍华  刘丹  丁敏  郭晓宇  朱鸿飞 《中国畜牧兽医》2010,37(11):44-49

本研究通过构建含有3拷贝羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因的重组杆状病毒,旨在通过昆虫细胞表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白,为原核表达和真核表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白的免疫效果的比较奠定了基础。将细粒棘球蚴EG95s基因与3拷贝羊C3d基因串联,插入pTarget载体,获得重组质粒pTarget-EG95-(C3d)3,利用BamH Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切位点将目的基因EG95-(C3d)3克隆至Bac-to-Bac系统的转移载体pFastBac-Hta中,获得pFastBacHta-EG95-(C3d)3重组质粒,将该重组质粒转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中进行转座重组,获得携带3拷贝羊C3d基因与细粒棘球蚴EG95s基因的重组转座子rBacmid-EG95-(C3d)3,转染Sf9昆虫细胞后获得EG95-(C3d)3重组杆状病毒,并表达EG95- (C3d)3重组融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting进行重组蛋白的鉴定。同时利用昆虫细胞表达蛋白对羊棘球蚴病特异性抗体进行检测。结果表明,获得了EG95-(C3d)3重组杆状病毒,且EG95-(C3d)3重组融合蛋白在Sf9昆虫细胞得到了正确表达,大小约为132 ku,Western blotting鉴定结果显示表达的EG95-(C3d)3重组融合蛋白能与细粒棘球蚴阳性血清产生特异性反应,表明EG95-(C3d)3基因表达产物具有免疫活性。同时表达蛋白对羊棘球蚴病特异性抗体有良好的敏感性。EG95-(C3d)3基因在昆虫细胞获得表达,为原核表达和真核表达EG95-(C3d)3重组融合蛋白的免疫效果的比较,及细粒棘球蚴病的高效检测方法的建立奠定了基础。  相似文献   

共轭亚油酸对免疫抑制肉仔鸡巨噬细胞分泌功能的影响     

陈艳红  刘丹  颜忠  姚晶  曹克军 《中国畜牧兽医》2010,37(12):31-34

本研究采用健康肉仔鸡和环磷酰胺免疫抑制肉仔鸡模型,通过体外细胞培养试验来研究2种共轭亚油酸异构体（c9,t11-CLA和t10,c12-CLA）对肉鸡巨噬细胞分泌功能的影响。选取24只1日龄爱拔益加(Arbor Acre)肉仔鸡随机分为免疫抑制处理组和健康肉仔鸡组,分别于14、15和16日龄进行环磷酰胺（CY,80 mg/kg体重）腿肌注射和等体积生理盐水腿肌注射。巨噬细胞体外培养试验采用含不同浓度（0、25、50和100 μmol/L） c9,t11-CLA、t10,c12-CLA或1∶1的混合物（CLA混合物）。结果表明,体外添加t10,c12-CLA可对肉仔鸡腹腔巨噬细胞NO和IL-1的分泌起双向调节作用,即在肉仔鸡正常生理条件下,t10,c12-CLA可抑制LPS刺激后巨噬细胞细胞因子的分泌,降低炎性反应;而当巨噬细胞的免疫功能受抑制时,t10,c12-CLA可减缓CY对巨噬细胞的损伤和免疫抑制作用,维持巨噬细胞细胞因子的分泌功能。添加高剂量的t10,c12-CLA效果好于低剂量添加;c9,t11-CLA对巨噬细胞分泌细胞因子的功能均无明显影响。  相似文献   

基于Ajax的绿化林病虫害防治系统的开发     

于海燕  刘丹 《林业机械与木工设备》2010,38(7):27-29

采用J2EE框架结合Ajax前端开发技术,通过JDBC与后台数据连接,基于B/S模式建立绿化林病虫害防治系统的开发思路,即将J2EE框架、Ajax技术、数据库技术和网络技术相结合,应用于城市绿化林病虫害预测和防治中,从而起到防治绿化林病虫害的作用,同时可提高林业信息化和数字化水平.  相似文献