p53-EGFP表达载体的构建及其对A549的影响     

胡昌亮  尹志刚  俸婷婷  周英 《山地农业生物学报》2019,(1)

构建具有EGFP标签的抑癌基因p53表达载体,并验证其对肺癌细胞A549的影响。以质粒pcDNA3.1-p53为模板,设计引物并进行PCR扩增获得目的基因p53,将获得的目的基因克隆至载体pcDNA3.1-EGFP上,用琼脂糖凝胶电泳检测目的条带,双酶切以及测序验证。将克隆好的载体,利用脂质体法转染A549细胞,荧光显微镜下观察,同时用MTT法测不同时间段细胞OD值。结果表明,琼脂糖凝胶电泳结果显示,目的基因扩增成功。双酶切及DNA测序结果均证实,成功构建了载体pcDNA3.1-EGFP-p53。转染A549细胞后,荧光显微镜下观察到绿色荧光。MTT法测定结果表明,目的基因转染的A549细胞组所测得的OD值明显低于对照组(p0.01)。因此,具有EGFP标签的抑癌基因p53表达载体pcDNA3.1-EGFP-p53构建成功,转染A549细胞后,对A549细胞具有一定抑制作用。为后续继续研究p53-MDM2生物发光能量共振转移作用奠定了基础。  相似文献   

吸水链霉菌谷氨酰胺转氨酶突变体的构建和酶学性质表征     

张颖  王佳莹  王红静  刘钏  檀建新  石楠 《河北农业大学学报》2023,(1):63-71

根据茂源链霉菌谷氨酰胺转氨酶点突变的结果,用重叠延伸PCR法构建了3个吸水链霉菌谷氨酰胺转氨酶突变体Tyr81ValGly82Asn、Tyr133Phe、Tyr360Ala,在巴斯德毕赤酵母GS115中表达并对其酶学特性进行了表征。结果表明,野生型和3个突变体的最适温度为40℃,最适pH 7;除了甘油外,其他有机试剂都降低了TGase的酶活力;与野生型相比,突变体Tyr81ValGly82Asn、Tyr133Phe和Tyr360Ala的比活力分别提高了9%、85%和30%;3个突变体与野生型相比,K_m、K_cat和K_cat/K_m值有所升高,表明突变可能降低了TGase与底物的亲和力,却加速了其催化效率。上述结果为通过点突变提高吸水链霉菌谷氨酰胺转氨酶酶活力提供了试验依据和途径。  相似文献   

基于SSR分子标记的广西德保县和隆林县野生古茶树聚类分析          下载免费PDF全文

彭靖茹  李朝昌  檀业维  温立香  张芬  叶靖平  黄寿辉  邓慧群 《南方农业学报》2019,50(1):1-7

[目的]对广西德保县和隆林县野生古茶树及其他省份名优栽培种茶树进行聚类分析,为野生古茶树种质资源保护、良种选育及创新利用提供理论参考.[方法]利用筛选出的15对SSR引物对9份广西德保县和隆林县的野生古茶树种质和15份名优栽培种茶树种质进行聚类分析,并计算遗传相似系数.[结果]筛选出的15对引物从德保04和德保05未扩增出任何条带,但从其余22份茶树样品中共扩增出183条谱带,其中CS1引物扩增出多态性谱带最多,为19条,最少为CS13引物,仅7条,平均每对引物扩增出多态谱带12.26条,多态率为96.17%.22份茶树种质资源可聚为两大类群,其中德保县和隆林县的野生古茶树聚在Ⅰ类群,栽培种茶树聚在Ⅱ类群.根据遗传相似系数,也可获得上述相同的分类结果.茶树品种间的遗传相似系数为0.48~0.84,平均遗传相似系数为0.67,其中,野生古茶树种质资源间的遗传相似系数为0.68~0.84;栽培种茶树间的遗传相似系数为0.62~0.84;野生古茶树与栽培种茶树的遗传相似系数为0.48~0.77.仅德保06与其他野生古茶树(隆林42和德保01)遗传相似系数小于0.70;栽培种茶树与野生古茶树相比,仅黄观音与野生古茶树(德保01和德保G02)遗传相似系数大于0.70.[结论]广西德保县和隆林县的野生古茶树种质起源相近,与我国其他各省份的名优栽培种茶树亲缘关系较远,存在相远近亲和相近远亲共存现象,进一步证实广西德保县野生古茶树为五柱茶系的厚轴茶,推测桂西北山区广泛分布山茶属原始种系.  相似文献   

几种复配杀菌剂对小麦赤霉病及DON毒素污染控制作用     

侯冕  汪章勋  操海群  檀根甲 《农业灾害研究》2019,(6):3-5

为了筛选防治小麦赤霉病和控制毒素的高效杀菌剂,通过田间小区药效试验及小麦样品DON毒素检测,研究了4种杀菌剂对小麦赤霉病的防治效果和控制毒素的能力。结果表明,36%克菌丹·叶菌唑SC、45%戊唑醇·咪鲜胺EW、48%氰稀·戊唑醇SC和40%戊唑·多菌灵SC在小麦抽穗80%,扬花初期施用,对小麦赤霉病均有较好的防治效果,病指防效在84.25%~93.96%,样品DON毒素检测结果在0.12~0.64μg/ml,其中36%克菌丹·叶菌唑SC 900 ml/hm2的病指防效为93.96%,样品平均DON毒素检测结果为0.12μg/ml,控制毒素效果达93.72%。  相似文献   

水轮机顶盖部分螺栓断裂后剩余螺栓的强度分析     

葛新峰  徐旭  沈明辉  檀林杰  钱巨林  张昌振 《排灌机械工程学报》2019,37(7):600-605

针对水轮发电机组由于顶盖连接螺栓断裂而导致水淹厂房等严重事故的问题,建立了某电站实际顶盖及螺栓的模型并进行有限元分析.基于Ansys,采用有限单元法求解静力学基本方程,计算得到各种工况下螺栓的应力分布;研究了某混流式水轮机顶盖全部螺栓正常工作时的强度,对部分螺栓断裂后剩余螺栓的强度进行了分析,对比了螺栓在断裂数量为1,2,4,8根以及断裂位置为90°对称分布、邻近分布、180°分布时的应力情况.计算结果表明:部分螺栓断裂后,由于偏载和突变,其余螺栓的最大应力值都会升高;螺栓断裂个数越多,断裂螺栓的分布位置越邻近,则其余螺栓强度越不足.当断裂螺栓数量为4根且处于邻近分布位置时,剩余螺栓的最大应力为744.03 MPa,十分接近螺栓材料的极限容许应力744 MPa;当断裂螺栓处于邻近分布位置且数量达到8根时,剩余螺栓的最大应力达776.21 MPa,增幅达19.69%,已远远超过材料极限容许应力,威胁电站安全运行.  相似文献   

城市化过程对土壤资源影响研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

李桂林  陈杰  孙志英  檀满枝 《中国生态农业学报》2008,16(1):234-240

世界范围内的快速城市化过程对土壤资源的质与量都产生了深刻影响.作为一种不可再生性自然资源,土壤在我国快速城市化过程中的强烈人为活动影响下发生功能上的转化、弱化甚至消失.城市及其周边地区的土壤景观、各种土壤过程都明显异于传统的土壤质量演变规律.与农业生态系统相比,城市生态系统更加复杂,城市化过程中土壤演变研究的挑战性也更大.深入开展城市化过程中土壤质、量响应及其生态环境效应的系统研究意义重大.  相似文献   

枣阳市2005年小麦赤霉病大发生特点原因及防治对策     

李世义  檀银忠  张广照  王鹏  杨瑞清 《湖北植保》2005,(6):14-15

2005年枣阳市小麦赤霉病大发生,主要是小麦杨花灌浆期降雨天数多、大风、冰雹、倒伏加重了危害。选用抗耐病小麦品种、配方施肥、适期防治可减轻其危害。  相似文献   

青稞中主要功效成分最新研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

冯格格  佘永新  洪思慧  檀思佳  王淼  曹振  王珊珊  郑鹭飞  何亚荟  金茂俊  王静  邵华  金芬 《农产品质量与安全》2020,(2)

青稞是禾本科大麦属的一种古老的谷类作物,具有较高的营养价值和功效作用。本文综述了近3年来国内外有关青稞中含有的β-葡聚糖、酚类、黄酮类化合物、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)等活性成分的最新研究进展,并对今后青稞营养功效的发展前景进行了展望。  相似文献   

安徽省中籼稻品种抗病性评价     

殷涛  檀立  檀根甲  张立新  汪章勋 《安徽农业大学学报》2018,45(6):1119-1123

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不同品种茶树根际土壤真菌群落多样性及结构特征     

赵兴丽  卯婷婷  张金峰  孟泽洪  李帅  周玉锋 《茶叶通讯》2019,46(3)

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