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当前猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）仍是猪场常见的病原之一,给我国生猪养殖业造成了巨大的经济损失。为建立一种基于SYBR Green的PRV实时荧光定量PCR检测方法,以PRV-gE基因序列为靶标,构建pUCmT-gE重组质粒（并作为阳性质粒）,针对该基因设计特异性引物,并评估该方法的灵敏性、特异性和可重复性等指标。结果表明,该方法检测下限为4.545拷贝/μL,而普通PCR检测下限为4.545×102拷贝/μL;在90.0℃出现单一的溶解峰,并与PCV2（圆环病毒2型）、PPV（细小病毒）、PRRSV（蓝耳病病毒）、PEDV（流行性腹泻病毒）和TGEV（传染性胃肠炎病毒）等不产生交叉反应。此外,该方法对15份疑似感染伪狂犬病的临床样品检出率为20%(3/15),高于常规PCR检出率（13.33%,2/15）。因此,该方法较传统PCR具有更高灵敏性,更适合用于PRV的临床早期诊断。 相似文献
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离心泵前置导叶设计与试验 总被引：1，自引：0，他引：1
借鉴传统风机前置导叶调节的经验,并针对其采用的二维翼型在叶片轮毂处由于翼型弦长较短对流体控制能力较差的缺陷,提出一种全新的适用于离心泵前置导叶预旋调节的空间导叶水力设计方法,该方法假定前置导叶出口的流体满足等速度矩条件,通过四次分布函数给定叶片安放角沿轴面流线的分布规律来控制叶片的空间形状,采用逐点积分法进行叶片骨线绘型,在圆柱展开面上对叶片骨线双面加厚完成三维空间导叶的水力设计。在此基础上,将该导叶应用于某离心泵,并对其在不同轴向位置和不同预旋角下进行了性能试验。结果表明：三维导叶能够有效拓宽离心泵的高效运行范围,改善其在非设计工况下的水力性能,且与无前置导叶工况相比,最高效率可提高2.0%,从而达到为离心泵增效节能的目的。 相似文献
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根据GenBank中鸡滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)MS53株的乳酸脱氢酶序列设计一对特异性上下游引物,通过PCR扩增获得MS WVU1853菌株的乳酸脱氢酶基因并将其克隆至pGEM-T Easy载体,测序正确并成功完成点突变后连接表达菌pET-28a(+),将重组表达质粒pET-28a-ldh转化表达菌BL21(DE3)。经IPTG诱导成功表达蛋白rMSLDH并测定其酶促活性。结果显示,重组表达的rMSLDH具有较强酶活性;最适反应温度40℃,最适pH7.5;Al2+和Ba2+可增加酶活性;Cr3+作为该酶的辅因子,在一定浓度内能有效的促进酶促反应进行;Cu2+作用下酶几乎失活,Fe3+、Mn2+、Ni2+、Zn2+对酶产生不同程度的抑制作用;其米氏常数(Km)为0.365 mmol/L,最大反应速率(Vm)为0.98μmol(L●min)。本研究结果为更好地研究鸡滑液支原体乳酸脱氢酶的生物学功能提供了参考。 相似文献
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猪用乳头式饮水器的水流速率和安装高度及数量的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
猪用乳头式饮水器水流速率、安装高度及数量与猪的饮水量和生产性能关联,也关系到猪场的粪污排放量。本文综述了猪用乳头式饮水器的水流速率对猪饮水量、饮水行为以及生产性能的影响,简单介绍了猪用乳头式饮水器的安装高度及数量的研究进展。研究表明,在乳头式饮水器的水流速率大约为700 mL/m in、安装高度在高出圈舍内最小猪肩部5 cm、每个饮水器为8~10头猪提供饮水时,是最适宜猪饮水需要的。 相似文献
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以鸡β干扰素（IFN-β）的重组蛋白pCold-ChIFN-β免疫8周龄Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗鸡β干扰素单克隆抗体,获得两株抗鸡IFN-β的单克隆抗体。经ELISA鉴定,两株单抗的腹水效价均达到10-3以上;Western blot检测结果证明2株单克隆抗体均能与表达的鸡IFN-β发生特异性反应;其中一株单抗可检测浓度小于15 pg/mL的鸡IFN-β。本研究为检测鸡IFN-β提供了一种重要工具,也为评价鸡用疫苗的免疫效果等奠定了物质基础。 相似文献