百合转S6PDH基因植株的抗盐性鉴定   总被引：3，自引：0，他引：3  

华智锐  马锋旺  李小玲  梁东 《干旱地区农业研究》2010,28(1):160-163

对农杆菌介导S6PDH基因导入麝香百合的转化植株和对照进行盐胁迫处理,通过测定相关生理指标,对其抗盐性进行评价。研究结果表明:随着盐胁迫(10 g/L NaCl)时间延长,转化苗叶片与对照的电导率和MDA含量均呈上升趋势,可溶性蛋白含量均下降,同时SOD、POD、CAT、APX酶活性均呈先升后降趋势;但在整个胁迫过程中,转化苗电导率和MDA含量均小于对照,可溶性蛋白含量比对照高,且具有比对照更高的酶活性,通过差异显著性分析,差异达显著水平。说明转化苗已经明显表现出了较强的抗盐性。  相似文献   

苹果果实L-半乳糖脱氢酶cDNA的克隆及其RNAi载体的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

高静  尚增振  王小华  马锋旺  梁东 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2010,38(1):181-187

【目的】从"皇家嘎拉"苹果幼果外果皮中克隆L-半乳糖脱氢酶(L-galactose dehydrogenase,GalDH)cDNA,进行生物信息学分析并构建其RNAi植物表达载体,为该基因功能鉴定奠定基础。【方法】应用同源序列克隆法克隆"皇家嘎拉"苹果GalDH基因,并进行生物信息学分析;利用噬菌体同源重组原理构建其RNAi植物表达载体pMDR-GalDH,并导入农杆菌EHA105。【结果】通过RT-PCR扩增得到1条约1.1 kb的条带,序列分析表明,该片段长为1 111 bp,包含一个975 bp的开放阅读框,可编码324个氨基酸残基,包含有醛酮还原酶的保守结构域和3个跨膜螺旋结构,其理论上的等电点pI为5.44,蛋白分子质量为34.99 ku;聚类分析显示,苹果GalDH核苷酸与已知其他植物GalDH核苷酸的相似性均在95%以上,判断其为苹果GalDH基因cDNA全长,命名为MdGal DH(GenBank登录号为:GQ131419)。另外,通过RT-PCR获得GalDH基因保守区段,成功构建了其RNAi植物表达载体pMDR-GalDH。【结论】从"皇家嘎拉"苹果中克隆了GalDHcDNA的编码区全长,并构建了该基因的RNAi植物表达载体。  相似文献   

一个苹果山梨醇转运子基因家族新成员的克隆及其表达分析     

李换桃  梁东  马锋旺 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2010,38(9):73-80

【目的】克隆一个苹果山梨醇转运子基因(命名为ST)的全长cDNA,为进一步研究该基因的功能奠定基础。【方法】利用RT-PCR法从苹果叶片中克隆ST基因,应用相关软件对其进行生物信息学分析;并采用实时荧光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)法,分析ST在苹果不同组织中以及在果实发育过程中的表达情况。【结果】获得了1个包含全长开放阅读框的ST基因,该基因cDNA全长1 767 bp,包含长达1 617 bp的完整开放阅读框,该基因所编码的蛋白与GenBank中已登录的其他植物山梨醇转运子的同源性均在72%以上,其中与苹果山梨醇转运子MdSOT5的同源性较高,为81%。Real-time RT-PCR结果表明,在不同组织中,ST在韧皮部的相对表达量最高,其次在衰老叶、成熟叶、叶柄中较高,在库器官花、幼叶、果实、果柄、根中表达较低;在果实不同发育时期,ST基因表达量在果实发育早期很低,花后30 d快速升高并达到峰值,在发育中期保持一个较高的表达水平,在果实发育后期相对表达量又降低,之后略呈递增趋势。【结论】从苹果叶片中克隆了ST基因,生物信息学分析可知ST具有糖转运功能;ST在韧皮部的表达量最高,说明其负责长距离运输;ST在果实发育过程中的表达量与山梨醇的含量变化相一致。  相似文献   

平邑甜茶金属硫蛋白基因MhMT2的克隆和表达分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

王顺才  梁东  马锋旺 《中国农业科学》2012,45(14):2904-2912

【目的】克隆平邑甜茶金属硫蛋白（metallothionein,MT）基因,探讨该基因对逆境的响应机理,为苹果抗逆分子育种提供依据。【方法】采用电子克隆和RT-PCR技术从平邑甜茶叶片中克隆MhMT2基因,利用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推测氨基酸序列进行分析,通过定量PCR技术研究在胁迫条件和激素处理下该基因在叶片中的表达模式。【结果】平邑甜茶MhMT2基因cDNA全长534 bp,具有1个243 bp的完整开放阅读框,编码含80个氨基酸的多肽,其分子量为7.87 kD。同源性比对显示,MhMT2编码的氨基酸序列与其它植物的MT2蛋白有很高的相似性,其中与小金海棠的同源性最高,达到96.4%。MhMT2编码的多肽包含14个Cys残基,其N端富含Cys的结构域具有C-C、C-X-C和C-X-X-C基序,而C端仅有C-X-C基序。聚类分析显示,该基因属于植物MT2基因家族。定量PCR分析表明,MhMT2基因在叶中表达量最高,其次是根,在茎中表达量最低。在ABA、H2O2、机械损伤及NaCl处理下,该基因在叶片中的表达都上调,其中以H2O2最明显。【结论】对MhMT2基因在ABA、H2O2、机械损伤及盐胁迫下的表达模式分析,预示该基因表达水平在植物抗逆反应中起着重要作用。  相似文献   

成都平原地区葡萄冬芽二次果结果技术研究     

黄素平  梁东  吕秀兰 《安徽农业科学》2016,44(27)

[目的]研究成都平原地区利用葡萄冬芽进行二次结果的技术体系。[方法]以当地3年生香悦、夏黑葡萄为试验材料,从处理时间、促进花芽分化方式和单氰胺浓度3个方面进行研究,总结一套适合当地的技术体系。[结果]在一次果坐果25 d后用15%多效唑1 000倍液或50%矮壮素1 500倍液喷施新梢,7 d后重复喷施1次,然后在第2次喷施10 d后用2.0%或2.5%单氰胺处理冬芽,以上技术措施能促进葡萄冬芽二次结果。冬芽的萌芽率、成枝率和结果枝率等生长势与一次果相近;冬芽二次果单穗重、单果重、果粒纵径和果粒横径等外观品质虽小于一次果,但葡萄的果肉硬度、可溶性固形物、还原糖、可滴定酸和维生素C含量等内在品质优于一次果。[结论]该技术适合成都平原地区葡萄二次果的生产。  相似文献   

楸子S6PDH基因启动子活性鉴定     

夏惠  梁东  刘继 《西北农业学报》2018,27(10):1492-1499

利用同源PCR技术从楸子(Malus prunifolia)基因组DNA中扩增得到6-磷酸山梨醇脱氢酶(Sorbitol-6-phosphate dehydrogenase,S6PDH)基因的启动子并命名为Mp-S-P。对启动子序列的顺式作用元件进行预测分析发现,Mp-S-P序列中除了含有植物启动子的基本结构元件外,还有多个与胁迫和激素诱导相关的元件。以β-葡萄糖苷酸酶(beta-glucuronidase,GUS)作为报告基因,构建含有pMp-S-P-GUS的融合表达载体并通过根癌农杆菌瞬时转化烟草叶片,然后分析该启动子对不同外界条件的响应。结果表明:低温、水杨酸和赤霉素处理可以提高该启动子的活性,而避光、脱落酸和茉莉酸甲酯可以降低该启动子的活性。  相似文献   

配方施肥对葡萄品质及土壤理化性质的影响     

潘峰  黄素平  李开军  吕秀兰  王进  林立金  梁东  夏惠 《湖南农业科学》2018,(4)

以四川省阿坝州茂县赤霞珠葡萄为试材,采用正交设计设置18组配方施肥方案,研究了配方施肥对赤霞珠葡萄果实品质及果园土壤理化性质的影响。结果表明:各组试验处理均对赤霞珠葡萄果实品质有促进作用,其中基肥施入干鸡粪2 kg/株+过磷酸钙0.167 kg/株,萌芽肥施入尿素0.021 kg/株+硼肥0.015 kg/株,壮果肥施入磷酸一铵0.050 kg/株+尿素0.017 kg/株,采前肥施入复合肥0.050 kg/株+硫酸钾0.075kg/株的施肥效果最佳,使赤霞珠葡萄果实单穗重、TSS、总糖、VC含量和总酸分别提高了21.04%、8.51%、11.23%、19.18%和16.00%;土壤有机质含量提高了6.99%,土壤p H值降低了1.43%,土壤全氮、有效磷和有效钾含量分别提高了7.86%、12.08%和13.62%,土壤交换性钙、交换性镁、有效铁、有效锰和有效铜含量分别提高了12.68%、1.94%、1.71%、1.89%和3.36%。因此,配方施肥可有效改善高原藏区赤霞珠葡萄实品质及果园土壤理化性质。  相似文献   

外源褪黑素对氯化钠胁迫下美味猕猴桃实生苗抗氧化物酶和渗透调节物质的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

高帆  谢玥  沈妍秋  雷芝  王秀  夏惠  梁东 《浙江农林大学学报》2018,35(2):291-297

盐胁迫是果树生长发育所面临的主要危机之一。为探讨外源褪黑素对缓解美味猕猴桃Actinidia deliciosa盐胁迫的生理机制,对根灌褪黑素后的美味猕猴桃实生苗进行盐胁迫处理。通过测定对照（ck）,氯化钠胁迫（S1）,褪黑素预处理和氯化钠胁迫（S2）下的美味猕猴桃实生苗叶片保护酶（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶）活性、抗坏血酸及渗透调节物质的变化,分析外源褪黑素提高植物耐盐性的生理机理。结果表明:与对照（ck）相比,氯化钠胁迫处理后,美味猕猴桃实生苗叶片中丙二醛、脯氨酸、保护酶活性先升高再下降,抗坏血酸和可溶性蛋白质先下降再升高,过氧化氢和可溶性糖显著上升;而根灌褪黑素可有效缓解美味猕猴桃实生苗膜脂过氧化程度,降低丙二醛和过氧化氢,最多时分别降低102.45%和44.35%。同时,可显著增加脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白质和抗坏血酸,并提高保护酶活性。外源褪黑素可以通过提高抗氧化物酶活性和渗透调节物质含量有效减缓氯化钠盐胁迫的危害,提高美味猕猴桃的耐盐性。  相似文献   

葡萄STS基因家族的鉴定与表达分析     

陈洪强  夏惠  王进  邓群仙  梁东  吕秀兰  唐礼平 《浙江农业学报》2019,31(3):401

白藜芦醇等芪类化合物与人类健康和植物抗逆性密切相关,芪合成酶(stilbene synthases,STS)是合成该类化合物的关键酶。为进一步明确葡萄中STS基因家族的表达特性,利用生物信息学技术,筛选了葡萄中的STS基因,并分析了其在果实生长过程和不同时期叶片中的表达模式。结果表明:葡萄全基因中共鉴定出48个STS基因,这些基因串联分布在10和16号染色体,其中32个STS基因能编码完整的氨基酸序列,且编码的氨基酸序列均为392 bp。根据氨基酸序列特性,可以将这些STS基因分为3类。在葡萄果实生长过程中,STS基因家族成员呈现出多种表达模式,但大多数STS基因在花后20~40 d和花后70~80 d的表达水平较高。大部分STS基因在葡萄叶片成熟阶段或衰老阶段表达水平较高。  相似文献   

转基因仙客来的生根移栽及耐热性     

刘倩  梁东  马锋旺 《西北农业学报》2009,18(6):268-271

以转Mn-SOD基因仙客来植株为材料,筛选出仙客来块茎诱导的不定芽生根培养基,研究仙客来组培苗的移栽技术及高温逆境胁迫对转基因和未转基因植株的生理机制的影响.研究表明:仙客来不定芽最适生根培养基为1/2MS+1.0 mg/L IBA;在38℃高温胁迫下,转基因仙客来的SOD活性高于未转基因植株,细胞膜透性和MDA的含量上升的速度均低于未转基因植株,可溶性蛋白含量高于未转基因植株,初步表明转基因植株的耐热性高于未转基因植株.  相似文献