新型鸭细小病毒VP3基因克隆与原核表达     

经美  王建昌  崔元  李晓轩  陈萍  王金凤  侯绍华  孙继国  袁万哲 《动物医学进展》2018,(6)

应用PCR方法扩增新型鸭细小病毒(NDPV)VP3基因,将其克隆至原核表达载体pQE1中,获得重组质粒pQE1-VP3。重组质粒pQE1-VP3经优化诱导表达后,通过SDS-PAGE对表达产物进行分析并利用His标签抗体对表达的蛋白进行Western blot鉴定。结果表明,NDPV VP3蛋白在25℃、IPTG浓度为1.0mmol/L经诱导5h,可获得最大诱导表达量,表达蛋白的分子质量约为60ku,主要以不溶性包涵体形式存在。纯化复性后,可获得浓度为5.165 mg/mL及纯度为97%的VP3蛋白。获得的重组菌pQE1-VP3以及高纯度的VP3蛋白,为进一步研究NDPV检测方法和新型疫苗奠定了基础。  相似文献   

口蹄疫病毒实时荧光RT-RPA快速检测方法的建立     

刘立兵  王金凤  张若曦  石蕊寒  韩庆安  李睿文  王建昌  袁万哲 《中国预防兽医学报》2019,(2):168-173

为建立一种简单、快速、特异的口蹄疫病毒(FMDV)分子检测方法,本研究基于FMDV的3D基因,设计特异性引物和exo探针,建立了用于FMDV快速检测的等温实时荧光反转录重组酶聚合酶(Real-time RT-RPA)方法。该方法采用便携式等温扩增仪-Genie Ⅲ实时监测扩增结果,40℃20 min即可完成检测。结果显示,FMDV RT-RPA方法能够特异性扩增FMDV 3D基因,而对水泡性口炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、脑心肌炎病毒等均无扩增;以体外转录的FMDV 3D RNA作为模板,该方法在95%置信区间检出下限为1.0×10~2拷贝/μL,组内和组间变异系数均小于1%;使用43份含有灭活FMDV的模拟临床样品分析显示,RT-RPA对FMDV的检出率为34.9%(15/43),略低于荧光定量RT-PCR的检出率(39.5%,17/43),而两种方法的符合率为95.3%(41/43)。RT-RPA能够在6 min～16 min内完成检测,而实时荧光RT-PCR则需要30 min～51 min。本研究所建立的实时荧光RT-RPA方法反应快速,特异性强,灵敏性高,操作简单,结合便携式具有荧光检测功能的等温扩增仪Genie Ⅲ,组建了FMDV快速检测平台,在基层兽医部门,尤其在野外及疫情现场的FMDV检测中具有极大的应用潜力,为设备仪器有限的实验室和田间对FMDV的快速检测提供了一种有效的方法,对于条件有限地区FMD的防控具有重要意义。  相似文献   

河北省太行山区耐贮鲜食枣品种的筛选     

王金凤 《河北农业科学》2008,12(2):37-38

通过对比方法,研究了适合太行山区栽培鲜食枣的保鲜技术,筛选出了一批耐贮藏品种。研究结果可为提高该地区生产鲜枣的贮藏技术提供依据。  相似文献   

高寒地区大豆根绒粉蚧发生规律与防治技术初探   总被引：2，自引：0，他引：2  

杨雪梅  王朝晖  赵珊珊  王金凤 《中国农技推广》2008,24(6):37-37

大豆根绒粉蚧（Eriococcus sp．）属同翅目,粉蚧科。是2000年以来黑龙江省北安市新发生的害虫。近年来,随着气候环境、耕作制度、种植模式的改变,该虫发生面积逐年加大。为害越来越重,对本市大豆生产造成严重威胁。为此,我们于2004～2007年在本市通过田间调查和室内饲养观察,对该虫的生活习性、发生规律和防治技术进行了初步研究。  相似文献   

超临界CO2流体从玉米胚芽中萃取 LA的研究     

黄宝玺  王大为  翟景波  杜研  王金凤  刘瑜 《农业工程技术:农产品加工》2008,(1):25-28

采用超临界CO2流体萃取技术从玉米胚芽中萃取亚油酸(LA),研究了萃取压力、温度、萃取时间和CO2流量对油脂中亚油酸萃取率的影响,优化了萃取工艺条件;萃取压力25MPa,温度45℃,时间80min,CO2流量25L/h,并利用气相色谱对最佳条件下玉米胚芽油中亚油酸进行定性定量分析.  相似文献   

加强植树造林技术及管理措施     

吴宪权  王金凤 《农民致富之友》2018,(13)

正植树造林是社会生产过程中的一项重要活动,造林可分为两个层次:培育森林,改善生态环境。植树造林是一种种植面积大、形成森林和森林环境。植树造林是改善生态环境的重要措施。它在保护水土、防风固沙、净化空气方面起着重要作用。因此,在社会发展中坚持植树造林,掌握造林技术和管理措施是十分必要的。一、植树造林的重要性1植树造林能缓解雨季植被覆盖度低、水土流失严重、泥沙入河等问题。树根大,能保持水土,保持水分,保证土  相似文献   

禽腺病毒4型hexon基因克隆与原核表达分析     

王许航  王林  经美  陈萍  王金凤  孙继国  刘聚祥  王建昌  袁万哲 《中国兽医杂志》2018,(7)

应用PCR方法扩增禽腺病毒4型(Fowl adenovirus 4,FAd V-4) Hexon基因,将其克隆至原核表达载体p QE1中,获得重组质粒p QE1-hexon。将重组质粒经诱导表达后,通过SDS-PAGE对表达产物进行分析。结果,Hexon蛋白在25℃经诱导4 h、IPTG浓度为0. 8 mmol/L时可获得最大诱导表达量,表达蛋白的相对分子质量约为107 k D,主要以不溶性包涵体形式存在。纯化复性后,可得到浓度为5. 165 mg/m L及纯度为97%的Hexon蛋白。本研究获得的重组菌p QE1-hexon以及高纯度的Hexon蛋白,为进一步研究FAd V-4检测方法和新型疫苗奠定了基础。  相似文献   

漳河上游径流变化特征及其归因分析     

王金凤  武桃丽 《干旱区资源与环境》2019,33(10):165-171

基于漳河上游流域周边台站的气象水文数据,综合运用Mann-Kendall突变检测、Hurst指数、流量历时曲线和气候弹性系数法等,分析了流域径流的年际变化特征和年内格局变化,探讨了气候变化和人类活动对径流减少的作用。结果表明:1955-2016年,流域径流的年际变化呈显著减少趋势,减少率为0.316×10~8m~3/a。年径流序列在1973年发生突变,突变前径流的减少趋势显著,其主要原因可能是气候变化;突变后减少趋势有所减缓,其主要原因是人类活动,具体表现为1970s-1980s的水利工程建设和土地改革兴起,1990s之后的工农业用水激增和城镇化加速推进。突变前后各月平均径流减少十分显著,相对减少率均超过70%,径流年内分布更加趋于不均,季节变化差异加大。基于气候弹性系数法,气候变化和人类活动对径流减少的贡献率分别为29.7%和70.3%。  相似文献   

基于被动微波遥感的积雪深度反演   总被引：1，自引：0，他引：1  

卢新玉  王秀琴  谢国辉  崔彩霞  王金凤 《干旱区资源与环境》2012,(12):108-112

利用北疆地区2009-2010年积雪季(12-2月)AMSR_E降轨数据19GHz与37GHz波段的水平极化亮温数据,结合北疆地区60个气象台站的实测雪深数据,建立了北疆地区基于AMSR_E亮度温度数据的雪深反演模型。对模型精度进行评价,结果显示:雪深在3-10cm时,模型反演的雪深值负向平均误差为-4.8cm,RMSE值为4.1cm;雪深在11-30cm时,模型反演雪深值的平均误差仅为-0.2cm,RMSE、正向平均误差、绝对平均误差均较小;雪深大于30cm时,模型反演的雪深值负向平均误差较小,其他各项误差较大。与实测值进行对比,模拟结果同台站观测情况基本一致。  相似文献   

探析物联网对农业的发展作用     

牛铭晨  徐建华  王金凤  徐敬业  万发仁 《农业网络信息》2012,(12)

近几年来物联网技术走进了人们的生活中,并受到了人们的广泛关注.本文介绍了物联网的定义,以基于RFID、传感器、M2M的物联网应用架构为例,对物联网的网络体系与服务体系进行了阐述;对物联网与农业领域的结合进行了分析.  相似文献