水稻稻瘟病菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立     

胡棕棂  蔡红  范静华  陈海如 《云南农业大学学报(自然科学版)》2009,24(3):349-353

依据GenBank中登录的稻瘟病菌28S rDNA保守区域设计合成了对稻瘟病菌特异的TaqMan探针,并对实时荧光PCR各反应条件进行摸索优化,得出水稻稻瘟病菌实时荧光PCR的最佳反应体系.利用该体系对其他侵染水稻常见的病原菌进行特异性检测,结果表明只有稻瘟病菌能检测到荧光信号的增加,检测的灵敏度为0.328pg/μL DNA样品.说明该方法是一种较常规PCR快速、特异性强的方法,并且可有效的用于稻瘟病菌的检测.  相似文献   

仙人掌丛枝病植原体检测和16S rDNA片段序列分析     

蔡红  孔宝华  李凡  陈海如  段永嘉  刘进元 《植物病理学报》2002,32(2):175-181

 对仙人掌丛生幼嫩组织进行超薄切片电镜观察,在韧皮部筛管中存在大量植原体;根据植原体16S rRNA基因保守序列设计的通用引物对R16 F₂/R₂,应用PCR技术对仙人掌丛枝病进行分子检测,结果扩增到约1.2 kb的特异性片段,而在健康组织中却没有此特异片段;通过16S rDNA片段核酸序列同源性比较,结果表明仙人掌丛枝病植原体与花生丛枝病植原体亲缘关系最近,据此可初步判断仙人掌丛枝病植原体是一种属于16Sr Ⅱ组的植原体,基本确定了其分类地位。  相似文献   

紫花苜蓿丛枝病植原体的分子检测及鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘涛  蔡红  赵丹  陈海如 《植物病理学报》2007,37(4):362-367

 利用植原体16S rRNA基因通用引物对云南昆明发生的苜蓿丛枝病感病植株总DNA进行巢式PCR扩增,得到1.2kb的特异片段,从分子水平证实了苜蓿丛枝病的病原是植原体。从PCR产物的RFLP酶切图谱可看出,该植原体株系的酶切图谱与马里兰翠菊黄化植原体(AY1)相同。对扩增片段进行克隆及序列测定后,利用最小进化法做Bootstrap验证的系统进化树,表明苜蓿丛枝病植原体为Candidatus Phytoplasma asteris成员之一,与植原体16SrI-B亚组成员关系密切。  相似文献   

三叶青早花基因的克隆及其对光质与光周期信号的响应     

闻静  林国卫  刘洁  蔡红  陈荣华  赵刚 《分子植物育种》2023,(7):2245-2252

早花基因是植物生物钟感受光信号的重要分子元件,而生物钟与植物碳水化合物的代谢及运输有重要关系。为了解光质及光周期信号对三叶青的块根产量及早花基因表达的影响,本研究以怀玉山三叶青为试材,从三叶青的块根发育不同时期的转录组中筛选到3个差异表达的早花基因cDNA序列,通过RT-PCR法对其开放读码框进行扩增,并对其核酸序列及推导的蛋白质序列进行初步的生物信息学分析。测产实验表明,蓝光补充光照处理组产量最高,白光处理组产量最低,且与对照组呈显著差异;长日光周期可显著提高三叶青块根产量,而短日处理条件下块根产量显著降低。通过RT-qPCR方法分析表明红光显著促进叶片中早花基因的表达,红光处理及蓝光处理条件下,块根中早花基因的表达显著受到抑制;光周期信号对早花基因表达分析表明,3个早花基因的表达都受光周期调控,表现出不同的表达模式。  相似文献   

云南烟草丛枝症病害研究 IV建立标准毒株     

程建勇  吴建宇  秦西云  钏相俊  杨程  孔宝华  李凡  蔡红  宋立明  陈观廉  李天飞  陈海如 《云南农业大学学报(自然科学版)》1999,(1)

以蚜虫传染发生云南烟草丛枝症病害的烟株为材料进行组织培养,连续培育３代,以第３代组培烟苗为毒源经蚜虫传染健康烟株,提取毒源和各实验烟株的总核酸进行琼脂糖凝胶电泳．结果表明：第３代组培烟苗为毒源经蚜虫传染的烟株发病表现丛枝症,并检测到与云南烟草丛枝症病害相关的低分子量ＲＮＡ．说明与云南烟草丛枝症病害相关的病原能在寄主离体培养组织中长期保存,成功建立云南烟草丛枝症病害的标准毒株．  相似文献   

三叶青怀玉1号与怀玉2号光合特性和表型比较     

张艳  蔡红  陈荣华  洪森荣 《浙江农业科学》2022,63(4):708-712

本文以怀玉山三叶青2个栽培种怀玉1号和怀玉2号为试材,对其光合参数、 叶绿素荧光参数、 叶绿素含量、 叶长、 叶宽以及叶形指数进行测量和比较,分析这2个栽培种的光合作用能力,为其在怀玉山种植基地的种植提供理论依据.结果表明:怀玉1号的净光合速率、 气孔限制值、 水分利用效率、 瞬时羧化速率、稳态荧光产量、 叶宽均值均显...  相似文献   

侵染怀玉山三叶青的病毒RT-PCR鉴定     

林国卫  闻静  石光禹  潘彬彬  陈丽丽  丁欢欢  蔡红  陈荣华  洪森荣 《分子植物育种》2020,(3):968-975

三叶青一般通过无性繁殖,极易感染病毒,造成其种性退化。为了探明三叶青携带病毒的种类,为其病毒病防控及病毒脱除提供科学依据,本研究在三叶青转录组和葡萄病毒序列的基础上,通过RT-PCR技术对怀玉山三叶青15种病毒(烟草花叶病毒,葡萄扇叶病毒,葡萄茎痘伴随病毒,葡萄卷叶病毒-1,葡萄卷叶病毒-2,葡萄卷叶病毒-3,葡萄卷叶病毒-4,葡萄卷叶病毒-5,葡萄卷叶病毒-6,葡萄卷叶病毒-7,葡萄卷叶病毒-9,葡萄病毒A,葡萄病毒B,葡萄病毒E,葡萄病毒F)进行RT-PCR验证。结果表明,怀玉山三叶青只检测出烟草花叶病毒,其他14种病毒没有检测到。本实验结果首次检测出了三叶青的主要病毒种类,可为三叶青脱毒苗的培育及其工厂化生产提供理论依据。  相似文献   

实施农业科技创新引领行动 为推进乡村振兴助力     

陈开勇  蔡红 《四川农业与农机》2018,(3)

正党的十九大报告指出,"创新是引领发展的第一动力,是建设现代化经济体系的战略支撑"。习近平总书记2013年在山东考察时专门指出:"要给农业插上科技的翅膀,按照增产增效并重、良种良法配套、农机农艺结合、生产生态协调的原则,促进农业技术集成化、劳动过程机械化、生产经营信息化、安全环保法治化,加快构建适应高产、优质、高效、生态、安全农业发展要求的技术体系"。中央农村工作会议提  相似文献   

牛副流感病毒3型NP单抗的制备及初步应用     

吕闯  朱远茂  董秀梅  蔡红  于作  高欲燃  薛飞 《中国预防兽医学报》2011,33(12)

为制备牛副流感病毒3型(BPIV3)核衣壳蛋白(NP)单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的重组NP (rNP)免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合.采用以BPIV3为检测抗原的间接ELISA方法筛选阳性细胞克隆,经3次克隆纯化后获得1株稳定分泌抗NP特异性MAb的杂交瘤细胞株(5E5)并制备腹水,采用rNP及BPIV3包被的ELISA效价分别是2×106和1.28×105.间接ELISA、western blot、IFA试验表明该MAb具有良好的反应性和特异性.经抗体亚类鉴定该MAb亚类为IgGl/κ.特异性试验表明该MAb不与牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒反应.免疫组化试验表明该MAb可以检测BPIV3感染动物体内的病原.该MAb还可用于建立检测BPIV3病原及抗体的诊断方法,同时为研究NP的结构和功能提供了条件.  相似文献   

应用分子生物学方法检测植原体研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

蔡红  杨根华  孔宝华  陈海如 《云南农业大学学报(自然科学版)》2002,17(2):188-191

 从血清学、核酸杂交技术以及PCR技术等方面综述了国内外植原体检测研究的概况及最新进展。  相似文献