马疱疹病毒1型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立     

王征  郭巍  姬媛媛  曲娟娟  赵立平  李红梅  相文华 《中国预防兽医学报》2012,34(2):116-119

为建立马疱疹病毒Ⅰ型(EHV-1)的检测方法,本研究以EHV-1 gB基因的一段保守区域(1207 bp～1509 bp)作为检测的目的片段设计引物,通过对其反应条件的优化,建立了特异性检测EHV-1的SYBR Green I 荧光定量PCR方法.实验结果表明:该方法检测目的基因的灵敏度下限为10拷贝/μL,比常规PCR方法高100倍;与马疱疹病毒4型(EHV-4)及其他马传染病病原体无交叉反应;组内及组间的变异系数均小于2％.该方法检测速度快及高敏感性的特点为马鼻肺炎的防制提供了有力保障,同时也为进一步开展马鼻肺炎相关的研究提供了有效的辅助检测方法技术.  相似文献   

抗马动脉炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备     

赵世华  戚亭  郭巍  李红梅  王贵宾  刘翠云  仇铮  田志革  王征  卢刚  潘佳亮  相文华 《中国预防兽医学报》2012,(10):827-829

为制备抗马动脉炎病毒(EAV)衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达重组N蛋白,纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,细胞融合后经间接ELISA筛选获得两株能够稳定分泌抗EAV N蛋白的杂交瘤细胞株,MAbs亚型鉴定为IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,这两株杂交瘤细胞分泌的MAb均能够识别EAV。EAV N蛋白MAb的制备,为EAV血清学检测方法的建立奠定了基础。  相似文献   

草地螟中肠运载蛋白LstiSLC25基因的克隆及表达     

尹姣  郭巍  李克斌  宇文秋杰  曹雅忠 《农业生物技术学报》2009,17(3):516-521

利用甜菜夜蛾Spodoptera exigua（Hübner）围食膜多克隆抗体免疫筛选草地螟（Loxostege sticticalis L．）中肠cDNA表达文库,得到编码运载蛋白LstiSLC25的全长cDNA克隆。该cDNA克隆全长1399bp(GenBank登录号EU924506),开放阅读框长897 bp,编码299个氨基酸,预测分子量和等电点分别为32.1kD和9.46。序列含有三个典型的溶质运转重复结构,具有溶质运载蛋白家族的典型特征。将该基因与pET30载体重组后,经IPTG诱导,蛋白在大肠杆菌中获得了表达。  相似文献   

FRP复合材料在混凝土结构加固中的应用     

王福成  解国梁  郭巍  刘少东 《黑龙江八一农垦大学学报》2017,29(3)

利用FRP复合材料对钢筋混凝土梁进行加固,加固后的混凝土梁承载能力能够得到很大的提升,能弥补工程中混凝土梁承载能力的不足。通过工程实例验证,利用FRP复合材料对一住宅楼阳台底板处的悬挑梁进行加固处理,提高了悬挑梁的抗弯承载力,增强了混凝土结构使用的安全性,取消了因需重新浇筑混凝土梁造成的工程造价的增加,具有一定的社会经济效益。  相似文献   

六种杂草对华北大黑鳃金龟甲取食和繁殖的影响     

朱秀蕾  陆秀君  刘子欢  赵丹  李瑞军  郭巍 《植物保护学报》2017,44(2):351-352

正华北大黑鳃金龟甲Holotrichia oblita是农林业生产中重要的地下害虫,目前虽对其饲养技术进行了一些研究(周洪旭等,2009;刘子欢,2015),但其室内饲养体系仍不完善,因此研究其周年饲养技术具有重要意义。孙瑞红等(2010)发现暗黑鳃金龟甲H.parallela和铜绿丽金龟甲Anomala corpulenta取食不同植物对其成虫寿命、产卵期、产卵量影响显  相似文献   

美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4与Bt Cry9Ea10结合特性分析     

王晓洁  王哲  赵丹  王倩  陆秀君  郭巍 《河北农业大学学报》2023,(5):76-82

为明确苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis Cry9Ea10毒素蛋白对美国白蛾（Hyphantria cunea）的作用,本研究测定了其对美国白蛾四龄幼虫的活性,采用邻接法构建了美国白蛾中肠受体蛋白HcABCC4系统发育树;Ligand blot和ELISA试验研究了Bt Cry9Ea10毒蛋白与HcABCC4受体蛋白间的结合能力;利用HcABCC4基因dsRNA,采用注射法比较了基因沉默前后Cry9Ea10毒素对美国白蛾的毒力变化。结果表明,Bt Cry9Ea10蛋白对美国白蛾幼虫有杀虫活性,毒力回归方程为y=-4.61+2.28x,LC50和LC70值分别为115.60和177.58μg/mL。美国白蛾HcABCC4氨基酸序列（GenBank登录号：MW727508.1）与夜蛾科棉铃虫Helicoverpaarmigera(XM049842273.1)、美洲棉铃虫H.zea(XM047179823.1)、草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(XM035574947.2)、斜纹夜蛾S.litura(KP335688.1)的ABCC4氨基酸序列聚为...  相似文献   

羊痘病毒P32蛋白基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建   总被引：6，自引：0，他引：6  

郭巍  陈杰  李一经  李晓成  黄保续  张燕霞  吴发兴 《中国预防兽医学报》2004,26(4):270-272

应用PCR方法扩增羊痘病毒特异性蛋白P32蛋白的基因,将其克隆至pMD18-T载体,测定核酸序列后将P32基因克隆至Bac-to-BacR杆状病毒表达系统中转移载体pFastBacl和pFastBacHTa,进而转化人含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得两种携带P32基因的重组转染质粒:Bacmid-Bacl-P32,Bacmid-BacHT-P32,经PCR试验鉴定,获得的这两种重组转染质粒是携带P32基因的杆状病毒表达载体,可分别用于转染Sf-9昆虫细胞以获得单一重组P32蛋白和六聚组氨酸融合体重组P32蛋白.  相似文献   

洛阳地区规模化猪场结肠小袋纤毛虫感染情况调查及分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

王天奇  董发明  杨光忠  郭巍  宋岳飞  韩丽敏 《中国动物检疫》2007,24(8):34-35

结肠小袋纤毛虫病(Balantidiosis)是由结肠小袋纤毛虫(Balantidiumcoli)引起的人畜共患寄生虫病,呈世界性分布,主要流行于热带和亚热带地区。目前已知包括人在内的33种  相似文献   

增强的UV-B辐射对水稻光合作用的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

殷红  郭巍  毛晓艳  张涛 《作物杂志》2009,(4)

以粳稻品种沈农6014及沈农265为试验材料,采用盆栽方法,研究UV-B辐射增强对水稻光合作用的影响.试验设3个处理,即自然光照(TCK)处理、紫外辐射增强5%(T1)和增强L0%(T2)处理.结果表明,增强的UV-B辐射能够降低水稻的叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a/b、净光合速率、光舍有效辐射利用量及可溶性蛋白含量,提高类胡萝卜素含量.对可溶性糖含量的影响为先增大后减少.  相似文献   

对斜纹夜蛾高效绿僵菌的筛选     

马丽娟  滕忠才  臧欢  刘廷辉  李瑞军  郭巍  巩兰菊 《植物保护》2012,38(5):78-83

对从土壤中分离到的金龟子绿僵菌中生长性状较好的6个菌株,通过测定对黄粉虫幼虫的僵虫率和致死中时,选出3株致病效果好的菌株M7-9、M7-(16-18)、M7-(64-65),再采用点滴法接种对斜纹夜蛾进行毒力测定。结果表明,不同菌株对斜纹夜蛾的毒力与菌株种类有密切关系,3株菌株对斜纹夜蛾的LT50分别为2.70、3.07、5.79d。以此3株菌进行抗高温及抗紫外线试验,菌株M7-9和M7-(16-18)对高温和紫外线都具有较好的抗性,且M7-9对紫外线的抗性强于M7-(16-18),两菌株均具有进一步研究的价值。  相似文献