应用巢式PCR检测隐孢子虫     

李巍  吴康  张西臣  李建华  张国才  李淑红  宫鹏涛  杨举 《中国兽医学报》2010,30(6)

应用巢式聚合酶链反应(Nested PCR)建立了一种检测隐孢子虫(Cryptosporidium)的方法。试验中隐孢子虫卵囊纯化采用庶糖密度梯度离心法,以液氮-热水浴反复冻融及酚-氯仿抽提冷乙醇沉淀法制备模板DNA,根据隐孢子虫18S rRNA序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法。该方法特异性强,可检出牛源微小隐孢子虫(C.parvum)、羊源微小隐孢子虫(C.parvum)、牛源安氏隐孢子虫(C.andersoni)、鸡源贝氏隐孢子虫(C.baileyi)及猪源隐孢子虫(C.suis);敏感性高,该方法最低核酸DNA检测量达到10fg。初步应用结果表明,所建立的Nested PCR方法适合于隐孢子虫病的诊断和分子流行病学调查。  相似文献   

野猪资源的利用现状   总被引：11，自引：2，他引：11  

王京仁  李淑红 《经济动物学报》2001,5(2):59-62

从野猪、特种野猪及其产品加工利用几方面进行了详细介绍 ,并具体阐述了利用野猪的繁殖特性  相似文献   

猪瘟病毒E2蛋白猪源化单克隆抗体的制备及其中和活性鉴定     

李淑红  刘平黄  孙慧敏  仇华吉  李素 《中国兽医学报》2023,(2):223-228

本实验室前期制备了1株分泌针对猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白鼠源单克隆抗体的杂交瘤细胞株6E10,并验证其可特异性识别CSFV E2蛋白。由于杂交瘤细胞不稳定且不易储存，本研究将6E10抗体的轻、重链可变区基因和猪源抗体的恒定区基因融合并克隆至慢病毒表达载体pFUGW,分别构建了携带Strep标签的重组猪源化抗体轻、重链基因的慢病毒质粒pFU-p6E10-LC-Strep和pFU-p6E10-HC-Strep,进一步制备了慢病毒Lenti-p6E10-LC-Strep和Lenti-p6E10-HC-Strep,将二者共转导至HEK293S悬浮细胞，成功表达并纯化了重组猪源单克隆抗体6E10(p6E10)。经ELISA试验及Western blot证实，p6E10抗体能特异性识别E2蛋白。中和试验结果显示，p6E10抗体可以中和CSFV石门株。结果表明，本研究成功获得了针对CSFV E2蛋白的重组猪源化单克隆抗体p6E10,为深入研究CSFV E2蛋白的结构和功能以及开发新型诊断制剂奠定了基础。  相似文献   

内网质应激反应：调控天然免疫信号传导抵御病毒感染的枢纽     

曹宏伟  张柯慧  李淑红  仇华吉  李素 《中国兽医学报》2023,(4):804-811

内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)是细胞为应对内质网腔内错误折叠与未折叠蛋白聚集以及钙离子平衡紊乱等状况,而激活未折叠蛋白反应(unfolded protein response, UPR)、内质网过载反应和Caspase-12介导的凋亡通路等信号途径的反应过程，是细胞的一种保护性应激行为。ERS主要通过激活细胞内UPR,促进内质网正常功能的恢复。在病毒感染过程中，病毒会“劫持”细胞内质网合成大量病毒蛋白，加之细胞自身蛋白合成的需求，内质网中蛋白质合成超出了细胞的正常处理范围，造成大量未折叠或者错误折叠蛋白的积聚，接着诱导ERS和激活UPR。ERS作为细胞的一种保护性应激反应，在机体抗病毒感染和调节天然免疫反应中发挥着重要的作用。本研究对ERS的产生及功能、ERS与天然免疫信号通路的交互调控以及ERS诱导的细胞凋亡等方面进行了综述，以期为进一步研究抗病毒策略提供新思路。  相似文献   

鸡矢藤乙醇提取液体外抑菌活性与体内抗炎镇痛作用研究          下载免费PDF全文

杨宁宇  江佳丽  梁淑荧  曾琳  林红英  陈进军  康丹菊 《广东农业科学》2022,49(8):103-110

【目的】探索鸡矢藤有效活性成分的体外抑菌效果、体内抗炎镇痛作用，为充分利用鸡矢藤资源 提供理论依据。【方法】用 40% 乙醇溶液提取鸡矢藤，对所得提取物进行化学成分预试分析；采用药敏试验和 二倍梯度稀释法检测其对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡状芽孢杆菌的抑菌活性，测定 MIC；探究 鸡矢藤对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀、角叉莱胶所致小鼠 足跖肿胀的抗炎作用；并研究鸡矢藤对冰醋酸所致小鼠 扭体疼痛的镇痛作用。【结果】鸡矢藤乙醇提取液含有黄酮、萜类内酯等多种有效化学成分；能够抑制蜡状芽 胞杆菌生长，抑菌圈直径为 8.55 mm，MIC 为 500 mg/mL，但对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效 果不明显；与对照处理相比，中、高剂量鸡矢藤提取液对二甲苯所致小鼠耳廓炎性肿胀的抑制率分别为 30.93% 和 55.00%，对角叉莱胶所致小鼠足跖肿胀的抑制率分别为 49.74% 和 58.26%，抗炎作用极显著，且能够有效缓 减冰醋酸引起的小鼠外周性疼痛，使小鼠首次出现扭体反应的时间延迟，15 min 内出现扭体反应的次数减少。 【结论】鸡矢藤乙醇提取液含有丰富的药效活性成分，体外抑菌效果较弱，但对试验小鼠抗炎和镇痛作用显著， 可作为畜禽饲料添加剂候选中草药资源。  相似文献