结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6、CFP10基因的克隆、鉴定及其原核表达   总被引：3，自引：0，他引：3  

宫强  刘思国  王牟平  王春来  彭永刚  沈国顺 《中国兽医学报》2004,24(4):340-342

以人型结核分枝杆菌 H37RV株基因组 DNA为模板 ,应用 PCR法对 ESAT- 6和 CFP10基因进行扩增 ,产物经纯化后与载体 PMD18- T连接、转化及酶切鉴定 ,亚克隆到原核表达载体 PGEX- 6 P- 1,构建原核重组表达质粒 ,转化入大肠杆菌 BL2 1中 ,以 1mmol/L IPTG诱导 ,进行 SDS- PAGE电泳。结果表明 ,ESAT- 6和 CFP10基因表达的融合蛋白相对分子质量分别为 32 0 0 0和 36 0 0 0 ,与实测相符。重组结核杆菌分泌蛋白 ESAT- 6和 CFP10的成功表达为结核病诊断及重组疫苗的构建打下了基础  相似文献   

猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因的克隆、表达及其免疫活性研究     

刘思国  彭永刚  王牟平  王春来  宫强 《中国预防兽医学报》2004,26(6)

以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础.  相似文献   

鸭疫里氏杆菌形态特征的电镜观察   总被引：8，自引：0，他引：8  

韦强  鲍国连  季权安  俞坚群  盛楚江  章红兵 《畜牧兽医学报》2004,35(3):314-317

自鸭传染性浆膜炎的病死鸭中分离鉴定的鸭疫里氏杆菌(RA)Ⅰ、Ⅱ型两个菌株，用负染法和超薄切片法制备样品，于透射电镜下进行观察。结果观察到约占1／3的RA具有特殊的形态结构：在细菌的顶端或侧面有1～2个与菌体相连的芽状赘生物，有的也能从菌体上脱落下来。它在超薄切片中的大小约为菌体的1／3～1／5，能观察到其内部也具有类似菌体内部的结构。且具有类似菌体的“细胞壁”，类似于核体部分的结构位于“细胞壁”的一侧。而用相同的方法制作的鸭大肠杆菌(E．cozi)对照样品，却见不到这种特殊的形态结构。说明这种形态特征可能是RA特有的。  相似文献   

夏季狗牙根草坪不同建植方法及秋季交播黑麦草对成坪效果的影响   总被引：1，自引：2，他引：1  

王文恩  张俊卫  傅强  包满珠 《草业科学》2005,22(3):94-97

以狗牙根Cynodon dactylon种子和营养体为材料，在武汉地区，对5种不同建植方法建成的草坪从盖度变化、成坪时间、均一性、建植成本及秋季交播多年生黑麦草Lolium perenne后翌年狗牙根的草坪质量等方面进行综合比较。结果表明：采用夏季建植狗牙根草坪并于秋季交播多年生黑麦草的方法来建植四季常绿草坪，狗牙根采用撒茎覆沙法效果最佳，其他方法依次为开沟埋茎法、闻铺草皮法、穴植草茎法；种子直播法在翌年需重新建坪。  相似文献   

几种缓释肥的氮释放特性以及对草坪草生长的影响   总被引：6，自引：2，他引：6  

程滨  张强  杨治平  刘平  李磊  郑普山 《草业科学》2005,22(5):104-106

实验室内采用水浸泡法对尿素、3种缓效肥和山西省农业科学院土壤肥料研究所研制(自研草坪肥)的缓效肥的初期溶出率和微分溶出率进行了测定.其中尿素的初期溶出率为22.75%,超出了国际上公认的缓/控释肥的初期溶出率小于15%的指标,而微分溶出率为0.22%,也小于国际上公认的缓/控释肥的微分溶出率(0.25%～2.5%)指标.其他几种缓释肥的初期溶出率为8.73%～14.42%,微分溶出率为0.30%～2.11%,符合国际上公认的缓/控释肥的初期溶出率和微分溶出率指标.田间试验比较和研究了尿素、3种缓效肥和山西省农业科学院土壤肥料研究所研制的缓效肥对草坪草的干草产量和养分含量的影响,尿素和包衣尿素处理的草坪草的生长量前期较高,后期产草量较低,呈马鞍型.其他处理的草坪草干草产量则比较平缓,肥料的氮释放特性与草坪草生长趋势相同.不同肥料处理对草坪草的中量、微量元素含量有一定的影响.  相似文献   

植物化感作用影响因素的再认识   总被引：23，自引：13，他引：23  

黄高宝  柴强  黄鹏 《草业学报》2005,14(2):16-22

土壤养分、酶、微生物、本底特性,根茬还田、水分、植物根系、种植体系和种植模式与化感作用的互作关系,表明这些因子可通过对土壤养分有效性、微生物种群结构、土壤酶活性和化感物质浓度的影响而对化感作用产生直接或间接影响,这些可为通过化感作用途径构建高效农田生态系统提供新的思路.  相似文献   

24月龄生长母水牛绝食代谢的研究     

邹彩霞  杨炳壮  梁贤威  文秋燕  覃广胜  廖朝辉  庞春英  梁坤  陈明棠  熊小荣  潘玉红  方文远 《中国草食动物》2005,25(4):9-11

用传统开路式牛用呼吸面具对24月龄母水牛绝食产热(Fasting heat production,FHP)进行研究。结果表明:①24月龄母水牛FHP为306.013kJ/kgW0.75·d;每天排出内源尿氮(EUN)为39.66g;单位代谢体重每天排出EUN为0.48g;蛋白分解产热占总产热量为17.13%;EUN与FHP比值为1.60mg/kJ。②24月龄母水牛维持净能需要:NEm=397.817kJ/W0.75·d。  相似文献   

母牛一胎双犊技术的研究     

张居农  蒋学国  许斌  郭成宽  仇其山  李强  牛志宏  王安江  王凤娇  张建军  张选珠 《乳业科学与技术》2005,27(3):137-138

选择9头母牛先行人工授精、7天后再移植冷冻胚胎以生产双犊。试验结果表明,母牛产双犊达44.44%(P<0.01)。提示:采用A(I人工授精)+ET(胚胎移植)是提高母牛双犊率的有效技术措施之一。  相似文献   

Effects of five cryoprotectants on proliferation and differentiation‐related gene expression of frozen‐thawed bovine calf testicular tissue          下载免费PDF全文

Hao Li  Yi‐Lin Bian  Nicola Schreurs  Xiao‐Gang Zhang  Sayed Haidar Abbas Raza  Qian Fang  Li‐Qiang Wang  Jian‐Hong Hu 《Reproduction in domestic animals》2018,53(5):1211-1218

The cryopreservation of testicular tissue is a potential method for preserving male fertility. However, the effect of cryopreservation on bovine calf testicular tissue is scarce. This study investigated the effect of different cryoprotectants on bovine calf testicular tissue at the molecular level. Testicular tissue from ten immature bovine calves (6 months) was collected after slaughter and cryopreserved in an extender containing different concentrations of the following five cryopreservation solutions (CP): bovine serum albumin (BSA) with 5% dimethyl sulfoxide (DMSO), trehalose with 5% DMSO, DMSO and glycerol and ethylene glycol (EG). After 7‐day cryopreservation, the expression levels of three spermatogonial stem cell (SSC)‐related genes, octamer‐4 (OCT4), KIT ligand (MGF/SCF) and kit oncogene (C‐KIT), were investigated by quantitative PCR (qPCR). The cell viability was highest for the tissues preserved with 30 mg/ml BSA (77.82% ± 1.22) and 40 mg/ml trehalose (74.23% ± 1.16) compared with other groups (p < 0.05), and the level of expression of the three genes was highest with 30 mg/ml BSA (p < 0.05). Compared with other CPs, the 30 mg/ml BSA and 40 mg/ml trehalose have the better cryopreserve protection. The 30 mg/ml BSA is the most viable media for the cryopreservation of testicular tissue from cattle.  相似文献   

湖南省某生猪批发市场疫病传播风险评估     

杨宏琳  谭庆辉  张家军  李印  张毅  王幼明  康京丽  金秋实  张强  沈朝建 《中国动物检疫》2018,35(4):21-25

为评估湖南省某生猪批发市场猪群疫病的发生风险,找出可能的风险因素,便于提出针对性预防措施,采用自行设计的调查问卷,结合访谈和现场调查,对27户经营户进行了调查,并将调查结果和调运数据相结合进行了疫病传播风险定性评估。结果显示:该市场疫病传入的可能性"高",内部传播的可能性"中等",疫病传出的可能性"高"。生猪调运频次多、数量大,经纪人行为复杂,运输车辆清洗消毒不彻底是可能的风险因素。评估结果提示,应尽量减少经纪人行为影响,重点加强对运输车辆的清洗消毒。  相似文献