金黄色葡萄球菌肠毒素A在枯草芽孢杆菌中的表达及其活性分析     

韩佳丽  李昌  沈国顺  胡博  李霄  田明尧  孙珊珊  叶明  金宁一 《中国兽医学报》2010,30(3)

利用优化后的SEA基因片段与带有枯草芽孢杆菌启动子的表达载体pBC38c,成功构建了含有SEA基因的重组表达质粒pBC38c-SEA。通过电转化的方法,将重组质粒pBC38c-SEA转入枯草芽孢杆菌1A751中。对目的蛋白进行表达,采用硫酸铵沉淀法浓缩上清中的蛋白,超声波裂解法裂解菌体沉淀,SDS-PAGE凝胶电泳法检测蛋白表达情况,Western-blot对表达的目的蛋白进行活性分析,并对表达条件与硫酸铵浓度进行优化。结果表明,成功构建了枯草芽孢杆菌表达质粒pBC38c-SEA,并在枯草芽孢杆菌中获得了表达,目的蛋白存在于培养基上清中,且具有抗原性。随着培养时间的延长,目的蛋白表达产量增多,在35h时达到最多,同时硫酸铵终浓度为50%,目的蛋白得到最好沉淀。本试验结果表明,SEA基因得以分泌表达,为进一步研究其生物活性并作为佐剂在临床中应用奠定了基础。  相似文献   

O型FMDV复合多表位在毕赤酵母中的表达与鉴定     

胡博  李昌  王浩然  鲁会军  李霄  朱战波  杜寿文  叶明  袭莹  韩佳丽  王婧  金宁一 《中国兽医学报》2010,30(12)

将O型FMDV复合多表位CTB-TEpi与FMDV结构基因P1-2A(P1/2A)连入毕赤酵母表达载体pPIC9K,经SacⅠ线性化后,利用电转化法整合到毕赤酵母(Pichia pastoris)基因组中。通过G418浓度梯度筛选得到高拷贝阳性转化子GS115/P1/2A-CTB-TEpi。经甲醇诱导表达后,目的蛋白在毕赤酵母中获得成功表达,并在FMDV自裂解片段2A的作用下裂解为P1/2A和CTB-TEpi 2个片段,相对分子质量分别为81 800和39 400,占上清液中可溶蛋白的比例为25%。Western blotting分析表明,表达蛋白的2部分均可被抗O型FMDV的血清所识别,而且含有CTB片段的CTB-TEpi条带可以被兔抗霍乱毒素血清识别,证明表达的蛋白具有抗原活性,为进一步研究O型FMDV复合多表位亚单位疫苗的免疫效果打下了基础。  相似文献   

犬的急性胰腺炎   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐锦元  钱建华  汪一峰  叶明  李祯荣 《上海畜牧兽医通讯》2008,(1):114-114

胰腺炎是胰腺因胰蛋白酶的自身消化作用而引起的,可分为急性和慢性两种.犬的急性 胰腺炎以突发性前腹部疼痛,腹壁紧张、敏感、弓背,有时呈祈祷状、恶心、呕吐为特征. 急性胰腺炎又分水肿型和出血坏死型两种,而临床上多见水肿型.  相似文献   

根河盆地水合物成矿条件研究     

梁文君  肖传桃  叶明 《长江大学学报》2014,(5):44-46

作为我国高纬度多年冻土发育的地区之一,根河地区具有天然气水合物形成的良好条件。根据区域构造及地层充填等地质背景,结合冻土厚度和气温条件、烃类来源、圈闭条件,对根河地区天然气水合物的成矿条件进行了探讨。研究表明,根河地区既具有利于天然气水合物形成的多年冻土厚度、地温条件以及形成所需烃类气体的丰富母质及充足气源,又具有天然气水合物成藏所需的烃类气体持续供给的运移系统、圈闭及其中的储层和封盖条件;根河盆地基底发育晚古生代地层,其中红水泉组提供充足气源;根河盆地深部侏罗纪地层红旗组、万宝组发育的煤层地层可为油气的生成提供一定的物质基础,而且由于后期改造较弱,使油气保存条件良好。  相似文献   

禽蛋孵化温湿度控制系统的设计     

方婷  叶明  周平 《安徽农业科学》2017,45(33)

针对小型禽蛋孵化加工厂出现的温湿度控制不精确、孵化设备成本高等问题,系统采用加热器以及半导体制冷器作为恒温恒湿的加热与制冷执行元件。DS18B20温度传感器反馈温度信号,HR202L湿敏电阻反馈湿度信号,并且以STM32F103ZET6单片机作为核心控制单元,通过温湿度传感器实时监测封闭环境内的温湿度,同时将数据反馈在TFT彩屏上形成曲线图。采用超声波雾化器和外接带有轴流抽风机、干燥剂(活性炭)的盒体以及导管装置进行加湿和干燥。  相似文献   

斑玉蕈β-葡萄糖苷酶基因的序列分析及皂苷对基因表达的影响     

陈辉  冯志勇  冯川  陈明杰  汪虹  王倩  宋晓霞  赵妍  叶明  张津京 《食用菌学报》2017,(1):1-6

通过转录组测序获得了斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)SIEF3133菌株的β-葡萄糖苷酶基因的cDNA序列(命名为bgl1),采用荧光定量PCR检测bgl1的相对表达量。当PDB中加入0.05g/L的皂苷溶液,菌丝培养4~6d时,bgl1相对表达量降低了1/2左右(相比对照),8d开始升高,第10天为对照组的1.8倍;向工厂化生产用的栽培瓶(接种培养85d后搔菌处理)中添加0.05g/L的皂苷溶液15mL,可缩短子实体采收时间约3d(与对照组相比),在此过程中bgl1相对表达量在第5天时最低,20d时超过对照组,5d时为对照组的1.66倍。  相似文献