排序方式: 共有74条查询结果,搜索用时 15 毫秒
41.
42.
马立克氏病病毒类白细胞介素8(vIL-8)基因的克隆和表达 总被引:1,自引:0,他引:1
用马立克氏病痛毒(MDV)感染鸡胚成纤维细(CEF),提取总RNA,经RT—PCR扩增出由MDV编码的病毒类白细胞介素-8(vIL-8)基因,并将其克隆进pGEM—Teasy载体中,测序进行分析。将vIL-8基因片段插入表达性载体pGEX-5x-3中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导。结果获得了重组vIL-8-GST融合蛋白的表达。表达产物活性分析表明,vIL-8基因重组产物具有趋化鸡外周血淋巴细胞的活性。提示,MDV在致瘤过程中,vIL-8能吸引易感细胞促进病毒感染,并可能参与肿瘤的扩散和发展。 相似文献
43.
禽网状内皮组织增生症病毒囊膜糖蛋白gp90的原核表达 总被引:9,自引:0,他引:9
根据禽网状内皮组织增生症病毒(REV)SNV株的前病毒基因组cDNA序列,设计并合成1对引物,以SNV株前病毒CDNA全基因组克隆为模板,通过PCR技术,扩增出该病毒囊膜糖蛋白(env)gp90基因部分片段。将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进pGEX-5X-3载体中谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的下游,将重组质粒转化进宿主菌BL21中,在1.0mmol/L IPTG(37℃)诱导下,gp90基因部分片段以融合蛋白的形式获得了良好的表达。表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,确定其表达的融合蛋白相对分子质量为64000。将表达产物从凝胶中回收后免疫小鼠,所得的抗血清可与REV野毒株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)在免疫荧光试验中起反应。由此表明,体外表达的SNV株gp90-GST融合蛋白保留了天然蛋白所具有的抗原性。 相似文献
44.
45.
从发病雏鹅肝脏中分离到1株细菌,根据培养特性、镜检结果、生化特征、血清学分型及PCR检测结果,表明分离茵为鼠伤寒沙门菌.动物试验结果表明,分离菌可致死雏鹅;药敏试验表明,该菌对环丙沙星、痢特灵、茵必治、阿米卡星、链霉素等药物敏感,对利福平和四环素耐药,与其它家禽或水禽来源的沙门菌相比,该分离株耐药性不严重.将分离茵16SrDNA基因进行扩增,PCR产物经胶回收试剂盒纯化后测序,序列Blast分析与血清型鉴定一致.将序列与GenBank上已登录的29株不同来源的鼠伤寒沙门茵序列进行比较,构建系统进化树,结果显示分离菌与美国分离的VDL-SS334株位置最为接近,同源性为95.9%. 相似文献
46.
鸡肿瘤病快速鉴别诊断技术的建立 总被引:19,自引:2,他引:19
根据病毒基因组特征,以聚合酶链反应(PCR)为基础,建立一种能快速鉴别马立克氏病(MD)、禽白血病(AL)和网状内皮增生症(RE)3种常见鸡肿瘤病的诊断技术。研究确定以MDV的132-bpr及ALV和REV的LTRs作为PCR扩增的特异性基因片段,改进样品DNA的提取程序,优化PCR及三重PCR的反应条件及参数,并对该诊断技术的特异性、敏感性进行研究,结果表明:建立的诊断技术具有特异、敏感、快速、经济的优点,为开发鸡肿瘤病快速鉴别诊断试剂盒奠定了基础。 相似文献
47.
鸡贫血病毒衣壳蛋白基因的PCR扩增和克隆 总被引:2,自引:0,他引:2
通过聚合酶链式反应(PCR)扩增鸡贫血病毒(CAV)衣壳蛋白基因(1.4kb),并将此基因克隆进pUC-18载体中。通过原位杂交、酶切分析、Southern杂交及其标记成探针对CAV基因组的特异性反应等试验证实所获得的克隆是含有CAV衣壳蛋白基因的重组质粒克隆。此工作为下一步CAV衣壳蛋白体外表达的研究奠定了基础 相似文献
48.
抗禽流感病毒H5亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制 总被引:18,自引:0,他引:18
以禽流感H5亚型病毒免疫Ballb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用血凝抑制试验检测细胞培养上清,结果获得3株阳性细胞株,分别命名为4B6、4A3、3H1。经2次亚克隆后,100%杂交瘤细胞保持了分泌抗禽流感病毒H5亚型抗体的能力。实验证明,所有这3株单克隆抗体仅与试验的H5病毒株反应,而不能与禽流感H9亚型病毒、鸡新城疫病毒、鹅新城疫病毒和鹅腺病毒等反应。间接免疫荧光试验检测结果表明这3株单克隆细胞的培养上清均能与感染H5亚型病毒的成纤维细胞呈现亮绿色荧光。 相似文献
49.
50.